糖尿病的實驗室檢查主要是胰島功能的檢查及由于胰島功能異常引起的各種異常生化指標(biāo)的檢查,主要分為尿液和血液檢查。
一 、 尿液檢查
(一)尿糖尿糖的檢查包括定性實驗和定量實驗。
1 定性試驗方法
尿糖定性有多種方法,包括硫酸銅還原法、葡萄糖氧化酶法和氰化高鐵法。過去尿糖定性最常用的是硫酸銅還原法。原理為硫酸銅能與尿中含醛基的葡萄糖發(fā)生還原反應(yīng),產(chǎn)生氧化亞銅而呈現(xiàn)一定的顏色。方法是班氏液與尿液以10:1混合煮沸1min觀察顏色變化,根據(jù)顏色的深淺判斷尿糖的多少。以“+”表示。目前多用葡萄糖氧化酶法。
現(xiàn)在一般醫(yī)院多用尿液分析儀,將8聯(lián)試紙條浸于尿液立即取出置于分析儀上自動測出PH值、蛋白、糖、酮體、尿膽元、亞硝酸鹽、潛血等多項結(jié)果,比班氏法敏感。
臨床意義:
葡萄糖是機(jī)體主要能源,正??崭寡呛繛?/span>3.9-6.1mmol/L。當(dāng)血糖不高于腎糖閾(8.9~10mmol/L)時,葡萄糖幾乎全部被腎小管再吸收入血液。因此正常尿液用一般方法檢查為陰性。而糖尿病病人血糖往往高于腎糖閾,則尿糖測定常呈不同程度的陽性反應(yīng),因此尿糖試驗在過去家庭微型血糖儀未普及時,常用于糖尿病日常監(jiān)測。需要指出的是尿糖反映血糖有一定缺陷,在時間上尿糖變化滯后于血糖變化,且不能有效反映低血糖狀態(tài),故胰島素治療和強(qiáng)化治療的患者一定要檢測血糖。
同時試驗當(dāng)中應(yīng)注意以下幾點:
(1)班氏試劑可與乳糖、果糖、戊糖、尿酸、維生素C、先鋒霉素、異煙肼、水楊酸、葡萄糖醛酸等物質(zhì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。鑒別方法有生化法及發(fā)酵試驗,可資鑒別。
(2)妊娠及哺乳期糖尿,主要是乳糖尿。鑒別方法同上。
(3)腎性糖尿:由于先天性或獲得性原因使腎小管重吸收葡萄糖的功能減退,腎糖閾值降低,尿中出現(xiàn)葡萄糖。某些慢性腎炎有時也出現(xiàn)腎性糖尿。
(4)滋養(yǎng)性糖尿:少數(shù)正常人、甲亢患者和胃大部分切除患者大量攝取糖類食物后,由于小腸吸收葡萄糖的速度太快,血糖迅速升高,可出現(xiàn)暫時性糖尿。
(5)應(yīng)激性尿糖:急性創(chuàng)傷、腦血管意外、急性心梗等應(yīng)激因素,可出現(xiàn)暫時性高血糖和糖尿。
(6)其他糖尿:由于進(jìn)食過多的半乳糖、甘露醇、果糖、乳糖及一些戊糖,如體內(nèi)代謝失常可出現(xiàn)相應(yīng)的糖尿;肝功能不全或遺傳性缺陷也會出現(xiàn)果糖尿、半乳糖尿、乳糖尿或戊糖尿。
2. 尿糖定量:方法與血糖同法,但應(yīng)將標(biāo)本稀釋再測,一般測定24小時尿糖定量。正常人每天從尿中排出微量葡萄糖約0.1~0.9g/24h,糖尿病病人最多可排出1000g/24h,一般決定于血糖的高低和病情的嚴(yán)重程度。
(二) 尿蛋白
1 試驗方法
尿蛋白的測定過去多用磺柳酸沉淀法,現(xiàn)在一般采用試紙法用分析儀測定,定量一般用比濁法。方法不再詳述。
2 臨床意義
正常腎小球可濾出一些低分子量的蛋白質(zhì),經(jīng)近端腎小管重吸收,24小時尿白蛋白排出量低于30mg,尿蛋白定性試驗呈陰性反應(yīng)。當(dāng)尿白蛋白量>300mg/24h,相當(dāng)于24小時尿蛋白排量>500mg,尿蛋白定性陽性,稱顯性蛋白尿。劇烈運動、發(fā)熱、體位變化、寒冷等因素可引起一時性蛋白尿,是生理性蛋白尿。由于腎小球器質(zhì)性病變引起的蛋白尿為持續(xù)性,蛋白尿程度與病變部位和性質(zhì)有關(guān)。當(dāng)糖尿病合并腎病時可出現(xiàn)持續(xù)性的蛋白尿。該檢查對于糖尿病早期腎病的診斷、觀察及治療有重要意義。
(三) 微量白蛋白(Malb)
在無尿路感染的情況下,尿中有少量白蛋白存在,濃度在20μg/min以下(相當(dāng)于30mg/24h),當(dāng)腎臟結(jié)構(gòu)與功能輕度受損或損傷初期時,尿中白蛋白排泄明顯高于正常,但用常規(guī)蛋白半定量方法不能監(jiān)測,需用放免法或酶聯(lián)免疫吸附法、免疫比濁法檢測。一般尿樣需在3~6個月內(nèi)復(fù)檢3次,才能更準(zhǔn)確地反映尿白蛋白的實際排出量。
測定方法
根據(jù)實驗要求,可按規(guī)定時間留取24小時尿、禁食12-14小時晨尿、隨機(jī)尿、或短時間隔尿等。以24小時尿最佳。尿標(biāo)本應(yīng)放于2℃-8℃保存,加入防腐劑。
檢測方法有放射免疫測定法(RIA)、酶免疫測定法(EIA)、免疫透射比濁法(ITA)和免疫散射比濁法(INA)。RIA法最大優(yōu)點是靈敏度高,特異性強(qiáng),不足之處是需要專門的儀器設(shè)備,放射性核素對人體有一定的損害。EIA法操作簡便、靈敏度高,沒有發(fā)射性核素污染,且試劑穩(wěn)定,缺點是難以自動化。INA法全自動操作,干擾因素少,當(dāng)測定的白蛋白過剩時會自動稀釋。其缺點是檢測成本稍高,并須專門儀器。近來國內(nèi)外許多公司和單位研制開發(fā)出供自動生化分析儀使用的ITA法測定尿Malb的試劑盒。具有較好的精密度和特異性,且操作簡便,成本低,可與其他項目同時測定,受到實驗室的廣泛歡迎。
臨床意義:正常人微量尿白蛋白定量為5~30mg/24h﹙或尿微量尿白蛋白排泄率<20μg/min),超過30mg/24h(或尿微量尿白蛋白排泄率>20μg/min)稱微量白蛋白尿。微量白蛋白尿也是血管內(nèi)皮損傷的指標(biāo)。可見于:
1.糖尿病腎病,用放射免疫法檢測的尿微量白蛋白排泄率大于20-200μg/min(相當(dāng)于30-300mg/24h)為早期糖尿病腎病的診斷指標(biāo)。對糖尿病早期腎損傷有重要的臨床診斷和監(jiān)測價值。糖尿病患者出現(xiàn)微量白蛋白尿時,應(yīng)引起極大關(guān)注,如不予治療,可逐漸發(fā)展為顯性蛋白尿。
2. 尿微量白蛋白也可見于大多數(shù)腎小球疾病、狼瘡性腎炎、小管間質(zhì)疾病等。
3.高血壓、肥胖、高脂血癥、吸煙、劇烈運動與飲酒也可致微量白蛋白尿。
(四)酮體
酮體是β-羥丁酸、乙酰乙酸、和丙酮的總稱。三者是體內(nèi)脂肪代謝的中間產(chǎn)物。酮體檢測實際是測定乙酰乙酸和丙酮。
正常人24小時尿酮體(以丙酮計)20~50mg,尿酮體定性檢測為陰性。當(dāng)發(fā)生酮癥酸中毒時尿酮體可顯陽性,但酮尿陽性與尿糖陽性程度不成比例。高熱、嚴(yán)重嘔吐、腹瀉、長期饑餓、禁食酒精性肝炎、肝硬化等也可因糖代謝障礙出現(xiàn)酮尿。
(五) 尿β2微球蛋白(β2-MG)測定
β2-MG就是HLAI類抗原中的β2輕鏈,其功能穩(wěn)定與HLAI類抗原的表達(dá)有關(guān),它是由100個氨基酸殘基組成的非糖基化單鏈多鈦,分子質(zhì)量11800.11。β2-MG主要由人體間質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞和造血系統(tǒng)的正常細(xì)胞、惡性細(xì)胞合成。正常人血中濃度很低,為0.8~2.4mg/L。其血漿半衰期小于2小時,主要從腎臟排泄,95%循環(huán)β2-MG可經(jīng)腎小球自由濾過,其中99.9%以上由近端腎小管以胞飲形式攝取,并降解。
正常人尿中排泄β2-MG很少,尿濃度<100μg/L,臨床上一般用RIA法或酶標(biāo)法來檢測。當(dāng)體內(nèi)β2-MG合成增多,血β2-MG水平高于正常3倍以上時,腎小球濾過量超過腎小管重吸收能力,則尿中β2-MG排出增多,因此用尿β2-MG測定評價腎功能時應(yīng)測血β2-MG,排除引起血β2-MG增高的疾病。若血中β2-MG含量正常而尿中β2-MG含量增高,說明腎近端小管功能受損。糖尿病、高血壓患者早期尿β2-MG即增高,說明糖尿病和高血壓患者早期即有腎小管損害,尿β2-MG增高與腎功能損害程度顯著相關(guān),治療后隨病情控制,尿β2-MG明顯下降。
(六)尿液鏡檢
主要觀察細(xì)胞、管型、結(jié)晶等,借以發(fā)現(xiàn)其有臨床意義的改變。尿液鏡檢應(yīng)于排尿后立即檢驗,以免有形成份分解破壞。尿液鏡檢常見的有形成份有:上皮細(xì)胞、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、膿細(xì)胞及結(jié)晶體。各種管型包括:透明管型、粗細(xì)顆粒管型、細(xì)胞管型、蠟樣管型、脂肪管型等;結(jié)晶體包括藥物結(jié)晶和鹽類結(jié)晶等。糖尿病病人繼發(fā)尿路感染或造成腎臟損害時尿液鏡檢可發(fā)現(xiàn)異常改變。
二、血液檢查
(一)血糖
葡萄糖是人體細(xì)胞的主要能源。正常人的血糖濃度在神經(jīng)激素的調(diào)解下,保持著相對的恒定,當(dāng)某些臟器發(fā)生病理變化或機(jī)體的調(diào)節(jié)機(jī)能失調(diào)時,血糖的濃度就會發(fā)生變化,所以體液中葡萄糖的測定是臨床生化檢驗中經(jīng)常進(jìn)行的檢測項目。
1.標(biāo)本的來源
測血糖標(biāo)本的來源一般有兩種:第一是靜脈血,分靜脈全血和血漿。一般用血漿或血清測定;第二是毛細(xì)血管血,即現(xiàn)在所謂的全血,常用于糖尿病患者血糖的自我檢測及兒童或靜脈血采取困難者。用毛細(xì)血管血測血糖一般用便攜式血糖儀,目前臨床上亦較常用這種儀器,體積小,便于攜帶,方便快速。不足之處是試紙條價格較貴,有效期短,成本較高。毛細(xì)血管血測得的血糖值一般比靜脈血漿血糖低5%左右。血糖測定一般應(yīng)即采即測,因室溫下血標(biāo)本中的血糖以每小時0.4mmol/L的速度分解,所以如不能立即測定應(yīng)將血標(biāo)本冰凍保存。
2.血糖的測定方法
血糖測定的方法有鄰甲苯胺法、福林吳憲二氏法、葡萄糖氧化酶法等。鄰甲苯胺法因試劑有較強(qiáng)的毒性;福林吳憲二氏法標(biāo)本處理較麻煩,需制備無蛋白血濾液,所以均逐漸被淘汰。葡萄糖氧化酶法因?qū)ζ咸烟怯刑禺愋?,可在其他糖存在的情況下進(jìn)行葡萄糖的測定,所以目前臨床上應(yīng)用較廣泛。
其正常值為:空腹全血3.6~5.3mmol/L、空腹血漿3.9~6.1mmol/L。6.1~7.0mmol/L為空腹血糖異常;連續(xù)兩次空腹血糖≥7.0mmol/L,即可診為糖尿病??崭寡侵饕从吃诨A(chǔ)狀態(tài),沒有加上飲食負(fù)荷時的血糖水平,主要反映患者自身胰島素分泌能力。餐后2小時血糖測定對糖尿病的診斷同樣重要,因為餐后2小時血糖容易發(fā)現(xiàn)高血糖,特別對2型糖尿病患者能反映平時血糖控制情況。
3.血糖測定的臨床意義
血糖濃度是各種調(diào)節(jié)作用對立統(tǒng)一的結(jié)果。當(dāng)神經(jīng)肌肉的調(diào)節(jié)失去原有的相對平衡時,則出現(xiàn)高血糖或低血糖。
(1)生理性或暫時性高血糖:飯后1~2小時、注射葡萄糖后、情緒緊張時、腎上腺素分泌增多或注射腎上腺素后可以出現(xiàn)。
(2)病理性高血糖:①胰島素不足,可分胰島素相對不足或絕對不足;②升高血糖的激素分泌增加,如垂體前葉功能相對亢進(jìn)、腎上腺皮質(zhì)機(jī)能亢進(jìn)、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)、嗜鉻細(xì)胞瘤、胰島A細(xì)胞瘤等;③顱內(nèi)壓增加,如顱外傷、顱內(nèi)出血、腦膜炎等;④間接由于脫水引起的高血糖,如嘔吐、腹瀉、高熱等,此種高血糖多為輕度增高。
(3)生理性或暫時性低血糖:多發(fā)生于饑餓和肌肉運動,注射胰島素后,口服降糖藥物后等。
(4)病理性低血糖:①胰島素分泌過多,如胰島細(xì)胞瘤。②升高血糖的激素分泌減少,如腦垂體前葉功能減退。③血糖來源減少,如長期營養(yǎng)不良、肝炎、肝壞死、糖原累積病等。④血糖損失過多,如根皮甙引起的腎小管中毒性糖尿。
(二)口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)
口服葡萄糖耐量試驗(OGTT),主要用于診斷癥狀不明顯或血糖升高不明顯的可疑糖尿病,其原理是葡萄糖負(fù)荷可因胰島功能存在缺陷而誘發(fā)高血糖反應(yīng)。糖尿病的診斷根據(jù)主觀癥狀和客觀指標(biāo)。客觀指標(biāo)除觀察空腹血糖水平;還可觀察糖負(fù)荷后血糖水平。典型糖尿病病人空腹血糖測定即可確診糖尿病,不需再做糖耐量試驗,但較輕的糖尿病病人或糖耐量減低的病人空腹血糖水平不增高或無明顯的增高,而糖負(fù)荷后血糖水平則可明顯增高,因此葡萄糖耐量試驗,對一部分糖尿病及IGT病例仍不可少。
1.OGTT試驗方法
OGTT的方法有用100g、75g和50g葡萄糖的不同,根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)專家意見,常規(guī)用75g葡萄糖來試驗,兒童用每公斤體重1.75g,總量不超過75g。對用75g葡萄糖仍存有顧慮或不能接受的病人,可做100g面粉的饅頭實驗代替葡萄糖,其結(jié)果與75g葡萄糖相仿。
具體方法是:①被檢者前三天正常飲食,每日碳水化合物攝入量不少于150g。停用胰島素及其它降糖藥物治療,試驗前一天晚餐后,即不再飲食。②次晨,空腹抽血2ml測血糖。③將75g無水葡萄糖(含1分子水的葡萄糖則為82.5g)溶于300ml溫開水內(nèi),使受試者一次服下(5min內(nèi)),并于服后0.5 h 、1h、2h、3h分別采血,并測定各次血糖值,繪出曲線。
2.臨床意義
(1)正常人OGTT:F<6.1mmol/L,口服葡萄糖后0.5-1小時血糖升高達(dá)峰值既7.78-8.89 mmol/L。 2h恢復(fù)至空腹使血糖值。
(2)糖尿病患者空腹血糖≥7.0mmol/L,服糖后2h血糖≥11.1mmol/L,且維持高血糖的時間長;如空腹血糖<7.0mmol/L,2h血糖7.8~11.1mmol/L,則為葡萄糖耐量減低(IGT)。如空腹血糖6.1-7.0 mmol/L ,2h血糖<7.8mmol/L ,為空腹葡萄糖受損(IFG)。
(3)其他內(nèi)分泌疾病引起的各種對抗胰島素的激素分泌過多,也會出現(xiàn)高血糖。如垂體前葉功能亢進(jìn)時,生長激素或促腎上腺皮質(zhì)激素分泌過多,或患腎上腺皮質(zhì)、腎上腺髓質(zhì)腫瘤時,腎上腺皮質(zhì)或髓質(zhì)激素分泌過多,也會導(dǎo)致高血糖。腎上腺皮質(zhì)激素能促進(jìn)糖異生,因為糖類食物攝入減少時,可因此種作用保持血糖值。阿狄森氏病患者,因腎上腺皮質(zhì)機(jī)能減退,糖異生作用降低及糖的氧化作用加強(qiáng),其血糖濃度較正常人低;這種病人進(jìn)食大量葡萄糖后,血糖升高極不明顯且短暫。
(4)某些肝病(如急性肝炎),服用葡萄糖后0.5~1.5小時之間,血糖急劇增高,超過正常。
(三)胰島素(Ins)的測定
Ins由51個氨基酸組成,分子量5734。胰島素原是胰島素和C肽的前體。Ins的測定主要用RIA法,直接測定外周血中胰島素濃度是評價胰島B細(xì)胞功能的常用檢查手段,但只測一次空腹胰島素濃度其臨床價值有限,一般均需做葡萄糖負(fù)荷后或饅頭餐后胰島素釋放試驗,并與OGTT同步進(jìn)行,這種聯(lián)合測定已廣泛應(yīng)用于臨床。
1.Ins的測定方法
用RIA法,一般要注意以下幾點:
(1)目前一般試劑盒所測Ins為免疫活性Ins(IRI)而不是生物活性胰島素。IRI內(nèi)包含部分胰島素原(PI)和外源Ins,PI的含量約占IRI測定值的5%~10%,其生物活性只有Ins的3%~5%。在PI增加的病理情況下,IRI不能準(zhǔn)確反應(yīng)生物活性Ins的水平,如胰島素瘤、異常PI血癥等,測出的IRI中一半甚至一半以上是PI。
(2)血中存在胰島素抗體(Ins-Ab)時,影響二抗法測定系統(tǒng)使IRI升高,此時的結(jié)果不能正確反映胰島B細(xì)胞的功能,因為與抗體結(jié)合的Ins無生物活性;應(yīng)用外源Ins時所測C-肽也并不可靠,因為外源Ins中也含有一定量的PI,所以C-肽值偏高。此時最好用游離Ins盒測定。
目前測定真胰島素的方法,逐漸應(yīng)用于科研和臨床。其能測定血中不包含胰島素原的真實胰島素水平,該測定值為血中有生物活性的Ins水平,但鑒于試劑盒昂貴,目前尚不能普及。
2.Ins測定的臨床意義
正如前述,單獨測定一次空腹血中Ins價值不大,通常都要做口服葡葡糖耐量-胰島素釋放-C-肽釋放試驗,甚至胰高血糖素釋放試驗,以下簡稱OGTT-IRT。這種聯(lián)合測定方法已廣泛應(yīng)用于臨床。空腹IRI值反映基礎(chǔ)分泌水平,而OGTT-IRT各時相IRI值反映胰島B細(xì)胞貯備功能。正常人Ins釋放試驗的正常值為:F:5~20 mU/L,口服葡萄糖后胰島素高峰在30分鐘~1小時,峰值為空腹胰島素的5~10倍,2h胰島素值<30 mU /L,3h后達(dá)空腹水平。對于高IRI無明確定義,一般認(rèn)為FIRI>15 mU /L、2hIRI>65 mU /L被認(rèn)為是高IRI血癥。
(1)糖尿病:胰島素測定及釋放試驗對糖尿病的分型、判斷病情嚴(yán)重程度及指導(dǎo)是否需要用胰島素治療具有十分重要的意義。
①1型糖尿病未用Ins治療的FIRI值小于5 mU /L,甚至測不到,OGTT-IRI呈無反應(yīng)或顯著的低反應(yīng)。
②2型糖尿?。河腥N情況:第一以顯著的Ins抵抗為主伴相對Ins分泌不足者,Ins分泌曲線常顯示1h較空腹上升幅度不大,2h、3h正?;蛏撸挥行┗颊吒鲿r相IRI皆升高,這是由于較高的血糖水平引起高Ins水平,但其胰島B細(xì)胞功能是正常的,但Ins的分泌不足以補(bǔ)償所產(chǎn)生的Ins抵抗。第二以顯著的Ins不足為主伴有Ins抵抗者,1h值較低,2h、3h值下降緩慢。第三以顯著的Ins分泌不足為主不伴Ins抵抗者常常是各時相血IRI水平均較低下。
另有一部分2型糖尿病患者對口服降糖藥原發(fā)或繼發(fā)失效,其基礎(chǔ)及餐后胰島素水平很低,往往判斷為胰島B細(xì)胞功能衰竭。但改用胰島素治療后高血糖得到控制,血C-P水平及C-P釋放曲線可以恢復(fù),再改用口用降糖藥則有效,這是由于長期的高血糖通過葡萄糖毒性作用抑制了胰島B細(xì)胞功能,使B細(xì)胞對高血糖的刺激不敏感所致。IGT者IRI高峰延遲不能與血糖同步,如2hIRI反應(yīng)低下則易發(fā)展為DM。
其它:異常Ins血癥、異常PI血癥、Ins受體異常伴黑棘皮病、伴Ins抵抗的脂肪萎縮性糖尿病、皮質(zhì)醇增多癥、肢端肥大癥、巨人癥、胰高血糖素瘤、原發(fā)性醛固酮增多癥、laron侏儒、原發(fā)甲旁減、垂體前葉功能減退癥、腎上腺皮質(zhì)功能減退癥等通過不同機(jī)理使胰島B細(xì)胞分泌功能降低、血IRI降低。
(2)低血糖癥:胰島素瘤:空腹IRI可達(dá)100~200μU/ml。Ins釋放指數(shù)即血IRIμU/ml/Gmg/dl>0.4,可達(dá)1.0以上,而正常為0.3。Ins自身免疫綜合癥是從未用過Ins的人,血中存在大量Ins抗體,其血IRI水平可達(dá)1000uU/ml以上,甚至高達(dá)3500uU/ml,這種抗體具有低親合力、高容量的特點,當(dāng)胰島素大量游離時發(fā)生自發(fā)性低血糖。藥物引起的低血糖癥,如酒精、水楊酸等所致低血糖癥可使血IRI降低。特發(fā)性功能性低血糖癥,Ins分泌峰延遲至1.5h或2h,往往在3~5小時發(fā)生低血糖。
(3)代謝綜合癥:以腹型肥胖為中心,有內(nèi)源性高IRI血癥或胰島素抵抗,常合并多種動脈硬化危險因子,如IGT、高TG血癥、低高密度脂蛋白血癥、高血壓等(詳見相關(guān)章節(jié))。
(四)C-肽的測定
C-肽(connective peptide)是胰島素原A鏈和B鏈之間的連接肽,與胰島素(Ins)等摩爾釋放,含31個氨基酸,分子量3021,C肽在外周血濃度較高,在外周組織中的清除率較Ins慢,半衰期11分鐘,而Ins為5分鐘,所以空腹及餐后的水平分別為Ins的5倍及10倍;C-肽與Ins無交叉反應(yīng),受外源Ins影響小,由于其外周血濃度高,所以受PI的影響也相對較小。所以C肽的測定是了解胰島B細(xì)胞功能的重要手段,尤其對于已用胰島素治療的糖尿病患者,同時對于糖尿病的分型也有重要的意義。
1.C-肽測定方法
一般C-肽的測定與OGTT和Ins釋放試驗同步,采用RIA法。
2.C-肽測定的臨床意義
(1)正常值:由于實驗的方法及試劑盒來源不同測出的正常值有所不同,但一般正常人餐后0.5~1h C-肽值達(dá)峰,較空腹C-肽值升高5~6倍。
(2)糖尿病:C-肽測定可用于糖尿病分型及了解糖尿病患者B細(xì)胞功能。1型或2型糖尿病患者,都可以通過檢測C-肽或Ins水平以判斷B細(xì)胞功能,由于外周血中C-肽被肝細(xì)胞攝取少,約占10%~15%,而Ins攝取率為50%~60%,更能反映B細(xì)胞分泌時濃度;加之其基礎(chǔ)清除率穩(wěn)定,不受多種因素(如血糖、胰島素濃度等)的影響,故C-肽釋放試驗曲線下面積優(yōu)于胰島素釋放試驗,更能代表B細(xì)胞功能。另外,C-肽的測定能夠排除由外源Ins而產(chǎn)生抗體所造成的干擾,所以C-肽的測定顯得更為重要。
(3)低血糖綜合癥:一般低血糖時,懷疑胰島素瘤的病人測定胰島素可鑒別,測血糖與胰島素的比值有助于診斷。而應(yīng)用外源性胰島素治療的病人發(fā)生低血糖,測C-P可鑒別其低血糖發(fā)生的原因是由于胰島素過量還是進(jìn)食不足。
(4)胰島移植:接受胰島移植的病人應(yīng)用胰島素治療時,測定C-肽可以了解移植后B細(xì)胞的分泌功能。
(5)肝腎疾?。焊窝谆蚋斡不瘯r,肝臟對Ins攝取減少,血中Ins水平有升高趨勢,而C肽受其影響小,血中C肽與Ins比值降低。腎臟疾病時,C肽降解減慢,血中C肽水平升高,C肽與胰島素比值明顯高于正常,當(dāng)腎功能嚴(yán)重?fù)p壞時,比值接近于正?;蚪档?。
(五) 胰高血糖素(GL)的檢測
GL是含29個氨基酸的單鏈多肽,分子量3485,半衰期3~6分鐘。它是由胰島A細(xì)胞和腸道合成的,主要生理作用是促進(jìn)肝糖元分解、糖元異生、脂肪分解和酮體生成。
1.實驗方法 一般采用RIA方法測定。
2.臨床意義
正常值:F:81.56±32.4pg/ml,1h:68.62±28.90pg/ml,2h:66.99±30.18pg/ml,3h:73.23±32.16pg/ml。
糖尿病病人的GL的分泌不適當(dāng)升高,在糖尿病的高血糖和高酮體血癥中確實起了重要作用。非糖尿病病人胰島素引起的低血糖可使血漿胰高血糖素濃度明顯升高,但在糖尿病人中這種升高卻常常缺失,其機(jī)制尚未闡明。由于兒茶酚胺刺激胰高血糖素的濃度升高,以致這種功能的缺失不會造成嚴(yán)重的后果。
(六)GHbA1c的測定
糖化血紅蛋白(GHb)是血紅蛋白A組分的某些特殊分子部位和葡萄糖經(jīng)過緩慢而不可逆的反應(yīng)形成的,其主要形式為HbA1c。對空腹血糖正常而血糖波動范圍較大的患者,可反映近2~3個月以來的血糖情況,與糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生密切相關(guān)。
1.測定方法
主要有色譜法、電泳法、免疫法、和化學(xué)法。目前最常用的測定方法是交換層析法和電泳法。
2.臨床意義
正常值:外周血GHb以GHbA1c為主要成份,正常含量是血紅蛋白總量的4%~6%,控制不佳的糖尿病病人,其含量高于正常值2~4倍。GHb使血紅蛋白與2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)的結(jié)合受阻或敏感性下降,從而使血紅蛋白對氧的親合力增加,在組織間隙中血紅蛋白與氧不易分離,引起組織缺氧;同時游離2,3-DPG增加又反饋抑制2,3—DPG合成,引起紅細(xì)胞僵硬,導(dǎo)致微循環(huán)障礙。由于葡萄糖與血紅蛋白的結(jié)合是緩慢的不可逆的,所以GHb可反映近2~3個月內(nèi)血糖總的水平,這與即刻血糖的測定不同,糖化血紅蛋白的測定有助于監(jiān)測病情的控制程度。GHb除監(jiān)測糖尿病血糖總體水平外,還發(fā)現(xiàn)血清蛋白、紅細(xì)胞內(nèi)的蛋白、膠原蛋白、角蛋白、晶體蛋白都有不同程度的糖基化,從而導(dǎo)致這些蛋白質(zhì)的變性,引起相應(yīng)器官發(fā)生病變,其糖基化程度與GHb的濃度相一致。因此,測定糖化血紅蛋白還有助于對糖尿病慢性并發(fā)癥的預(yù)測及診斷。另外,糖化血漿蛋白與GHb意義相同,反映2~3周內(nèi)血糖的平均水平。
(七)糖化血清蛋白(GSP)測定
GSP又稱果糖胺,是血清中的各種蛋白質(zhì)與葡萄糖發(fā)生緩慢的非酶促糖化反應(yīng)的產(chǎn)物,與HbA1c相平行,可反映近2~3周內(nèi)血糖情況。正常值為2.13±0.24mmol/L(血漿值低0.3mmol/L),不論1型還是2型糖尿病血清果糖胺均增高,尤以1型增高顯著。
(八) 胰島素自身抗體(IAA)
新診斷的1型糖尿病病人未胰島素治療前可存在胰島素自身抗體,為胰島B細(xì)胞自身免疫損傷的標(biāo)志之一,其陽性率及滴度隨起病年齡增加而下降,并與HLA基因型有關(guān)。據(jù)報道,5歲以下兒童新診斷1性糖尿病的病人IAA陽性率為50%,滴度也較高。
(九) 胰島細(xì)胞抗體(Islet cell Antibody ICA)
胰島細(xì)胞抗體(ICA)屬于IgG型免疫球蛋白,新診斷的1型糖尿病的個體中陽性率可達(dá)88%,而其前期的陽性率也可高達(dá)81%,1型糖尿病兒童陽性率可達(dá)94%。隨病情遷延,陽性率逐漸下降。1型自身免疫型糖尿病Ins合成減少是由于ICA的免疫破壞造成的,這種異常(自身免疫)可來自于基因遺傳、接觸化學(xué)毒物、病毒感染和各種應(yīng)激反應(yīng)。
ICA的檢測常用間接免疫熒光和組織化學(xué)方法來檢測,這些方法都比較復(fù)雜,不易開展,但現(xiàn)在有ElisA試劑盒用起來很方便但價格較貴。
ICA能早于臨床診斷8年而被檢測出來,這樣它可以作為疾病的一個早期指標(biāo)或?qū)膊∵M(jìn)行早期預(yù)測。ICA陽性個體表現(xiàn)為胰島細(xì)胞功能的進(jìn)行性減退,當(dāng)Ins的釋放反應(yīng)消失時臨床上就表現(xiàn)為1型糖尿病。許多研究指出1型糖尿病的直系親屬中ICA陽性者會逐漸發(fā)展成糖尿病。有人指出對患者進(jìn)行ICA檢測有助于鑒別糖尿病的分型診斷,并且能先于臨床癥狀診斷和早期預(yù)測是否需要Ins來治療。所以,ICA的測定對糖尿病的分型、早期診斷治療都有極其重要的意義。
(十)谷氨酸脫羧酶抗體(GAD-Ab)
GAD-Ab主要位于細(xì)胞的胞漿,在胰島內(nèi)具有抑制生長抑素和胰高血糖素分泌的作用,并可調(diào)節(jié)胰島素的分泌及前胰島素的合成。GAD-Ab為GAD的自身抗體,它與ICA聯(lián)合檢測,有助于1型糖尿病的診斷。
GAD-Ab檢測的臨床意義基本上與ICA相同,但ICA常隨病程的延長而減低,而GAD-Ab持續(xù)時間長。對LADA能協(xié)助診斷,敏感度高達(dá)60%~80%,特異性幾乎100%,故預(yù)測價值優(yōu)于ICA。
(十一)血β2-MG的測定
血β2-MG的測定方法與尿β2-MG的測定方法相同。當(dāng)體內(nèi)β2-MG合成增多或腎臟排泄減少時可引起血β2-MG增高。惡性腫瘤、風(fēng)濕病、肝病、慢性炎癥等許多疾病,均可因體內(nèi)β2-MG合成增多而引起β2-MG增高,因此用血β2-MG估測腎功能時應(yīng)首先排除這些疾病。
1.血β2-MG測定是反映腎小球濾過功能的靈敏指標(biāo) β2-MG分子量小,可自由通過腎小球,并僅由腎臟排泄和分解,而且產(chǎn)生速度恒定,不受年齡、性別、機(jī)體肌肉組織的影響,因此測定血β2-MG比血肌酐能更好的反映腎小球濾過率的變化。研究發(fā)現(xiàn)血β2-MG與GFR顯著負(fù)相關(guān),而與血肌酐、尿素氮顯著正相關(guān)。
2.血β2-MG是反映糖尿病腎損害的早期指標(biāo)糖尿病患者GFR降至80ml/min時,血β2-MG已開始增高,且與血糖控制情況及病程非常平行,與糖尿病微血管病變也密切相關(guān)。因此血β2-MG是反映糖尿病患者輕度腎功能減退和觀察療效的敏感指標(biāo)。
3.血β2-MG也是反映長期血透患者淀粉樣變性及移植腎功能,預(yù)防排斥反應(yīng)的重要指標(biāo)。
(十二)血酮體、血脂、肝功能、腎功能的測定
正常血酮體濃度<0.5mg/dl(0.05mmol/L),這些酮體多數(shù)經(jīng)血循環(huán)轉(zhuǎn)運至肌肉和腎臟內(nèi)被氧化,不會積聚為酮血癥,更不會發(fā)生酮癥酸中毒。對糖尿病患者來說,血酮體的監(jiān)測有助于早期診斷糖尿病酮癥酸中毒。血酮體>50mg/dl(5mmol/L),可診斷為酮癥酸中毒。
控制不佳或未治療的糖尿病患者多同時有高脂血癥和高脂蛋白血癥,尤以肥胖型2型糖尿病患者為多,但消瘦型糖尿病病人也可發(fā)生。這種高脂蛋白血癥多屬V型,甘油三酯多為正常的4~6倍,游離脂肪酸為正常濃度的2倍以上,總膽固醇、磷脂、β脂蛋白均明顯增高。當(dāng)糖尿病并發(fā)動脈粥樣硬化性心血管病變及腎臟病變時,脂質(zhì)上升更明顯,游離脂肪酸升高,高密度脂蛋白,尤其是亞型降低,APoA、A2降低。
治療糖尿病的一些藥物對肝、腎都有一定的損害,特別是糖尿病性腎病是糖尿病最易并發(fā)的疾病之一,所以對糖尿病患者定期進(jìn)行肝、腎功能(包括血β2-MG)的檢測,對于糖尿病的治療及預(yù)后都有很大的意義。