王佩瑜從小學習蘇州評彈。

1987年，演奏的《木蘭辭》獲得蘇州評彈藝術(shù)節(jié)一等獎，并代表江蘇、浙江、福建三省赴北京參加故事大賽 。

1989年，開始接觸京劇，學唱老旦。同年，在范石人的建議下改學余派 。

1991年，以業(yè)余京劇愛好者身份，憑借表演《

1992年，考入文昭關(guān)》 。

1994年，獲得"寶鋼杯"全國優(yōu)秀少年京劇邀請賽專業(yè)組一等獎、"新苗杯"全國少兒京劇大賽一等獎 。

1996年，獲得"梨園杯"全國戲曲中?；竟Υ筚惾A東區(qū)一等獎、"藍島杯"海峽兩岸五戲校京劇邀請賽一等獎 。

1999年9月，考入

5月11日，以98.59的節(jié)目最高分，獲得《CCTV全國青年京劇演員電視大賽》的"老生組最佳表演獎" 。7月，進入上海京劇院工作。

2002年10月13日，憑借在京劇《問樵鬧府·打棍出箱》中飾演范仲禹，獲得"第13屆白玉蘭戲劇獎主角獎" 。

2005年8月12日至13日，擔任"第5屆大學生戲劇節(jié)"的表演嘉賓 。

2006年3月4日，參加在解放軍歌劇院舉辦的"梨園之春--優(yōu)秀青年京劇演員慈善演唱會" 。

2007年9月，提名第6屆中國金唱片獎"戲曲類演員獎" 。

11月13日，參加在北京長安大戲院舉行的"中國京劇優(yōu)秀青年演員研究生班十周年匯報演出之老生經(jīng)典劇目專場"，演出劇目《擊鼓罵曹》 。

2008年，參演陳凱歌執(zhí)導的電影《梅蘭芳》，為章子怡扮演的孟小冬配唱《游龍戲鳳》選段 。

2010年6月16日，參加梅蘭芳京劇團重建15周年紀念演出，與梅葆玖等共同主演劇目《四郎探母》 。

2011年6月10日，憑借親自制作的"墨本丹青版"《趙氏孤兒》中的程嬰一角，獲得"第25屆中國戲劇梅花獎" 。

11月18日，參加在北京大學舉行的"京昆明星公開課校園行"北京站活動，講授戲曲課程 。

2013年4月19日，登臺"紀念張伯駒先生誕辰115周年京劇演唱會"。

5月18日，在河北大學舉行由其擔任主講的蓮池讀書會第十四講《古調(diào)今談-淺談京劇老生的演唱與表演》。

2017年2月2日，參加中央電視臺戲曲頻道融媒體互動戲曲節(jié)目《

2018年，當選為"上海市第十五屆人民代表大會代表" 。

9月24日，擔任《2018年中央廣播電視總臺中秋晚會》表演嘉賓，演唱歌曲 《但愿人長久》。

2019年2月4日，擔任《2019年中央廣播電視總臺春節(jié)聯(lián)歡晚會》表演嘉賓，參與表演戲曲節(jié)目《錦繡梨園》 。

3月30日，當選為"上海市青年聯(lián)合會第十二屆副主席" 。

2020年1月24日，擔任"

12月25日，擔任中央廣播電視總臺國風少年創(chuàng)演節(jié)目《

2021年4月23日，憑借歌曲《少年行》獲得硬地圍爐夜·網(wǎng)易云音樂原創(chuàng)盛典"最佳跨界金曲獎" 。

6月11日，參加的綜藝節(jié)目《流淌的歌聲第三季》在廣東衛(wèi)視播出 。

9月21日，參加《2021年中央廣播電視總臺中秋晚會》并表演歌舞《傾國傾城》 ;

9月29日，王佩瑜主演8K全景聲京劇電影《捉放曹》在上海首映 。

2022年2月15日，參加嗶哩嗶哩出品的《上元千燈會》，并演唱《燕歸巢》。

王佩瑜精通攝影、瑜伽、高爾夫、茶道、香道 。

截至2017年11月，王佩瑜學習了《失空斬》《搜孤救孤》《捉放曹》等余派戲，學演過《法場換子》《武家坡》《打漁殺家》等各種流派各種風格的劇目 。

以下是一些演過的劇目:

2021年9月，《捉放曹》 (主演)

王佩瑜的唱腔是京劇流派中的余派唱腔，她掌握了余派唱腔的精髓，在吐字、發(fā)音、用氣、行腔諸方面精心調(diào)度，渾然一體，不露斧鑿痕跡，追求"恬淡雍容，內(nèi)涵筋骨"的境界，于淡泊中寓神韻。嚴謹工整的吐字、規(guī)范有矩的行腔，展現(xiàn)出她的余派風范 。她的吐字發(fā)音、用氣行腔都有獨到心得，嗓音能高能寬，清醇味厚。她在演唱《搜孤救孤》中的"娘子不必太烈性"、《捉放曹》中的"聽他言嚇得我心驚膽怕"等，唱得古樸雋永，流暢悅耳。用氣行腔卻高亢、清亮，富有穿透力和感染力 。

王佩瑜扮相俊秀，演唱古樸雋永氣質(zhì)儒雅，書卷氣濃厚。

王佩瑜是中華人民共和國建國以來專業(yè)戲校培養(yǎng)的第一位女老生，被譽為梨園"小冬皇"。從藝后，她在藝術(shù)上執(zhí)著追求，獲得多項專業(yè)領(lǐng)域戲劇獎項。她愛崗敬業(yè)，甘于奉獻，數(shù)十年如一日從事推廣工作，創(chuàng)立的《瑜樂京劇課》《京劇其實很好玩》等成為品牌傳播項目，為培養(yǎng)京劇觀眾、拓展京劇市場做出了積極努力，是京劇藝術(shù)優(yōu)秀的傳承者和弘揚者 。她在藝術(shù)上執(zhí)著于繼承傳統(tǒng)，潛心學習骨子老戲，唱念做表皆深具古風，她扮相俊秀儒雅、演唱古樸雋永。性格真誠率性、特立獨行 。(人物評價綜合自:中青在線、《中國藝術(shù)報》)