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單克隆抗體
【教材分析】
在細胞融合和單克隆抗體的教學中,教師可以啟發(fā)學生回顧植物體細胞雜交技術的過程,再通過動植物細胞異同點的比較,引導學生大膽的推測出動物細胞融合與植物原生體融合的原理和基本方法相同
【學情分析】
對植物細胞過程學生已經了解,而本節(jié)的知識與植物的很想,相信學生能掌握的不錯
【教學目標】
知識目標
舉例說出動物細胞融合與單克隆抗體的原理和應用
能力目標
收集有關動物細胞工程研究進展和應用方面的資料
情感態(tài)度價值觀目標
關注動物細胞工程的發(fā)展和應用前景
【教學重難點】
動物細胞融合與單克隆抗體的原理和應用
【教學方式】
課前預習
【教學用具】
掛圖及多媒體輔助教學
【教學課時】
1課時
【教學過程】
單克隆抗體
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質單一,特異性強,靈敏度高。
(1)獲得雜交瘤細胞
① 將抗原注入小鼠體內獲得效應B細胞
② 效應B細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合
③ 用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞
(2)動物細胞培養(yǎng)
① 篩選能夠產生所需抗體細胞群
② 再生培養(yǎng)液或小鼠腹腔中培養(yǎng)
(3)提取單克隆抗體
:從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取
3.單克隆抗體的制備:(展示課件)
動物細胞融合
單克隆抗體
抗原
效應
B淋巴細胞
雜交瘤細胞
篩選(     )
細胞融合
選特定抗體的細胞群繼續(xù)培養(yǎng)(體外、體內)
提取
單克隆抗體
骨髓瘤細胞
方法:
特點:
雜交瘤細胞具備雙親的遺傳物質,不僅具有B淋巴細胞產生特異性抗體的能力,還具有骨髓瘤細胞在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的能力。從而可以克服單純B淋巴細胞不能無限增殖的缺點,能力大量產生單克隆抗體。
4.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導彈”
(3)分離和純化抗原分子。
☆應抓住三個一,即“一種誘導細胞融合的新方法——滅活的病毒;一種新細胞——雜交瘤細胞;一種優(yōu)勢——單克隆抗體的特異性強、靈敏度高的抗體)。
☆細胞工程中的一些技術手段的比較
1、植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較
項目
主要原理
培養(yǎng)基
結果
培養(yǎng)目的
植物組織培養(yǎng)
細胞全能性
固體:營養(yǎng)物質、激素
培育成植株
快速繁殖培育無病毒植株
動物細胞培養(yǎng)
細胞增殖
液體:營養(yǎng)物質、動物血清
培育成細胞株或細胞系
獲得細胞或細胞產品等
2、植物體細胞雜交和動物細胞融合
項目
原理
融合方法
誘導手段
用途
植物體細胞雜交
細胞膜的流動性
去細胞壁后誘導原生質體融合
離心、振動、電刺激、聚乙二醇誘導
獲得雜種植株
動物細胞融合
細胞膜的流動性
使細胞分散后誘導細胞融合
(同上)再加上滅活的病毒誘導
制備單克隆抗體
3、植物體細胞雜交(番茄馬鈴薯植株)和動物細胞融合
植物細胞雜交(番茄馬鈴薯植株)
動物細胞融合(單克隆抗體制備)
過   程
第1步
原生質體的制備(酶解法)
正常小鼠的處理(注射滅活抗原)
第2步
原生質體的融合(物化法)
動物細胞融合(物化生法)
第3步
雜種細胞的篩選和培養(yǎng)
雜交瘤細胞的篩選和培養(yǎng)
第4步
雜種植株鑒定
提純單克隆抗體(特異性強、靈敏度高)
原理/理論基礎
細胞膜的流動性、植物細胞的全能性
細胞膜的流動性、細胞增殖
融合前處理
酶解法除去細胞壁:纖維素酶、果膠酶
注射特定抗原法免疫處理正常小鼠
促融因子
物理法:電刺激、離心、振動
化學法:聚乙二醇
物化法:與植物相同
生物法:滅活的仙臺病毒
意義和用途
(1)克服有性遠緣雜交不親和性障礙
(2)培育作物新品種
有助于疾病的診斷、治療、預防
4、受精作用、原生質體融合、動物細跑融合
受精作用
原生質體融合
動物細跑融合
細胞類型不同
精子與卵細胞
體細胞
體細胞
細胞來源不同
來自同一生物個體
一般來自不同種的生物個體
一般來自不同種的生物個體
染色體數目變化不同
2N
2N+2N不一定是2N×2
2N+2N不一定是2N×2
融合條件不同
不需人工誘導
需人工誘導
需人工誘導
都有兩個細胞融合成一個細胞,并且融合成這個細胞的遺傳物質都是由原來的兩個細胞決定的
5、植物體細胞雜交和多倍體育種
植物體細胞雜交
多倍體育種
基本原理不同
原生質體融合和組織培養(yǎng)
染色體數目的變異
方法不同
原生質體融合
秋水仙素處理萌發(fā)的種子和幼苗
染色體來源和數目不同
一般來自不同種的生物,染色體不一定是倍數關系(2N+2N)
來自同種生物,加倍的是同源染色體
都是通過改變細胞的染色體數目來改變遺傳物質,從而改變生物的性狀。
【本節(jié)小結】
本節(jié)的知識重點在于單克隆抗體的制備,要求學生對于流程問題要重點掌握還有應用
【板書設計】
一.     動物細胞融合
1.     概念
2.     原理
3.     方法
4.     意義
二.     單克隆抗體
1.          制備
2.          應用
【課后作業(yè)】
立體設計相關習題
【課后反思】
學生對動物細胞融合這部分知識掌握的還可以,但單克隆抗體里的流程里的有些問題還是搞不懂,在講解題時的時候要注意提醒同學們注意
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