人參總皂苷照 高效液相色譜法(附錄 Ⅵ D )測定對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Re 對照品 5mg ,置 5ml 量瓶中,加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。供試品溶液的制備精密稱取本品約 50mg ,置 25ml 量瓶中,加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。標準曲線的制備精密吸取對照品溶液 20μl 、 40μl 、 80μl 、 120μl 、 160μl 、 200μl ,分別置于具塞試管中,低溫揮去溶劑,加入 1%香草醛高氯酸試液 0.5ml ,置 60 ℃ 恒溫水浴上充分混勻后加熱 15 分鐘,立即用冰水冷卻 2 分鐘,加入 77% 硫酸溶液 5ml ,搖勻,以試劑作空白,消除氣泡后照紫外 - 可見分光光度法(附錄 Ⅴ A )檢測,在 540nm 的波長處測定吸光度,以吸光度為縱坐標,以濃度為橫坐標,繪制標準曲線。測定法精密吸取供試品溶液 50μl ,照標準曲線的制備項下的方法,自“置于具塞試管中”起操作,依法測定吸光度,從標準曲線上讀出供試品溶液的含量,計算結(jié)果乘以 0.84 即得。本品按干燥品計,含人參總皂苷以人參皂苷 Re ( C 48 H 82 O 18 )計,應(yīng)為 65% ~ 85% 。人參皂苷 Rg 1 、 Re 、 Rd 照高效液相色譜法(附錄 Ⅵ D )測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈為流動相 A ,以 0.1% 磷酸溶液為流動相 B ,以下表進行梯度洗脫;檢測波長為 203nm 。理論板數(shù)按人參皂苷 Re 峰計算應(yīng)不低于 3000 。時間(分鐘)流動相 A (%)流動相 B (%) 0 ~ 30 19 81 30 ~ 35 19→24 81→76 35 ~ 60 24→40 76→60 對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷 Rg 1 與人參皂苷 Re 和人參皂苷 Rd 對照品適量,加甲醇制成 1ml 中含人參皂苷 Rg 1 0.30mg ,人參皂苷 Re0.50mg 和人參皂苷 Rd 0.20mg 的混合溶液。供試品溶液的制備精密稱取本品約 30mg ,置 10ml 量瓶中,加甲醇超聲(功率 250W ,頻率 50kHz )溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。
測定法分別精密吸取上述對照品溶液 20μl 與供試品溶液 5 ~ 20μl ,注入液相色譜儀,測定,即得。本品按干燥品計算,含人參皂苷 Rg 1 ( C 42 H 72 O 14 ),人參皂苷 Re ( C 48 H 82 O 18 ),人參皂苷 Rd ( C 48 H 82 O 18 )的總量應(yīng)為 15% ~ 25% 。