專題1：基因工程
1.DNA重組技術(shù)的基本工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），DNA連接酶，運(yùn)載體。
2.基因工程中用到的酶，及其作用：
限制酶：切割DNA。
DNA連接酶：把DNA片段拼接成新的DNA。
3.基因表達(dá)載體的組成：目的基因，啟動子，終止子，標(biāo)記基因。
4.啟動子的作用：驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需蛋白質(zhì)。
5.終止子的作用：終止mRNA的轉(zhuǎn)錄。
6.標(biāo)記基因的作用：為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。
7.基因工程的變異原理：基因重組。
8.DNA分子雜交技術(shù)的原理：堿基互補(bǔ)配對原則。
9.PCR技術(shù)的原理：DNA雙鏈復(fù)制的原理（堿基互補(bǔ)配對）。
10.獲取目的基因的方法：①從基因文庫中獲取。②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。③利用化學(xué)方法人工合成。
11.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法：①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。②基因槍法。③花粉管通道法。
12.將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞的方法：顯微注射技術(shù)。
13.將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法：用處理成感受態(tài)細(xì)胞。
14.檢測目的基因是否插入受體細(xì)胞的方法：DNA分子雜交技術(shù)。
15.檢測是否轉(zhuǎn)錄出mRNA的方法：分子雜交技術(shù)。
16.檢測是否翻譯出蛋白質(zhì)的方法：抗原—抗體雜交。
17.基因工程常用的載體有哪些：質(zhì)粒、λ噬菌體衍生物、動植物病毒
18.培育轉(zhuǎn)基因植物常用什么細(xì)胞做受體細(xì)胞：受精卵或體細(xì)胞。
19.培育轉(zhuǎn)基因動物常用的細(xì)胞：受精卵
20.基因工程制藥常用的受體細(xì)胞：微生物細(xì)胞
21.基因工程的載體必須具備的條件：
①能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存；
②具有一至多個限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接
③具有某些標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。
④對受體細(xì)胞無害
⑤載體DNA分子大小應(yīng)合適，以便提取和在體外進(jìn)行操作
22.基因工程操作的核心步驟：基因表達(dá)載體的構(gòu)建
23.構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的：
①使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳，并且可以遺傳下一代。
②使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。
24.目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵：轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因。
25.Ti質(zhì)粒上的T—DNA的特點(diǎn)：
Ti質(zhì)粒上的T—DNA（可轉(zhuǎn)移的DNA）可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。
26.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中構(gòu)建基因表達(dá)載體時目的基因插入的部位：Ti質(zhì)粒上的T—DNA上
