近日，全球首例在臨床中將克隆腫瘤突變基因復(fù)制個體化多肽應(yīng)用于腫瘤治療技術(shù)，在天津北辰醫(yī)院取得臨床應(yīng)用成功。天津北辰醫(yī)院腫瘤科杜學(xué)明主任聯(lián)合美國知名癌癥研究機構(gòu)——MD安德森癌癥中心的Gregory Lizée教授在美國著名醫(yī)學(xué)雜志《ONCOIMMUNOLOGY》上，共同發(fā)表題為《Rapid tumor regression in an Asian lung cancer patient following personalized neo-epitope peptide》的醫(yī)學(xué)論文，詳細闡述如何利用腫瘤患者的基因突變信息，研制個體化腫瘤克隆多肽疫苗，并應(yīng)用于患者，最終通過激活患者的自身免疫系統(tǒng)，有效抑制了癌細胞的增殖，延長了患者生命。此次臨床應(yīng)用的成功，也標(biāo)志著我國在個體化腫瘤克隆多肽疫苗的研制上已處于全球同領(lǐng)域的前沿行列。
癌癥已嚴重影響國民健康指數(shù)
根據(jù)國家癌癥中心的相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，在我國，每天約有1萬人確診為癌癥，而肺癌更是在發(fā)病率、死亡率中高居榜首。一直以來，肺癌的診斷、治療主要依據(jù)組織學(xué)分型。診治早期癌癥患者，針對局部，采用手術(shù)和放療聯(lián)合治療或者放化療。但是，由于肺癌發(fā)病的隱蔽性，多數(shù)患者確診時已是晚期，不能再采用手術(shù)治療，只能進行單獨的化療。而化療毒性較大，對患者身體造成的傷害十分嚴重，且中位生存期僅為12個月。對患者而言，化療并非最佳治療方案。近些年，隨著精準(zhǔn)醫(yī)療技術(shù)的進步，對部分適用于靶向治療的患者，采用分子靶向藥物的治療模式，提高了生存期；但是在靶向治療有效的患者中，依然有一半的患者在10個月左右會產(chǎn)生耐藥現(xiàn)象。在長期的臨床實踐中，醫(yī)生和病患一直都期待更有效的新藥和新技術(shù)的問世幫助更多的癌癥患者。
克隆腫瘤突變基因復(fù)制個體化多肽應(yīng)用于腫瘤治療
在2013年，杜學(xué)明主任聯(lián)合Gregory Lizée教授共同進行克隆肺癌患者突變基因的試驗。在試驗過程中，通過克隆肺癌患者突變基因，再結(jié)合患者的HLA分型，進行親和力配型分析，復(fù)制成可以和T細胞結(jié)合的個體化多肽。當(dāng)這些攜帶基因突變信息的小蛋白質(zhì)片段與患者體內(nèi)的T細胞結(jié)合，人體就會產(chǎn)生特異性殺死腫瘤的T細胞。在進行為期一個月的治療后，此前無藥可用的肺癌患者腫瘤逐步縮小、乃至消失?；颊咴\治的不同階段的血樣檢測數(shù)據(jù)顯示，患者體內(nèi)特異性T細胞大量繁殖，并隨著患者腫瘤的消失，T細胞也逐步減少。
Gregory Lizée教授解釋到，“通常，100個突變基因中，有大約3~5個可以克隆的個體化多肽。它們中許多只存在于一個單一病人的腫瘤細胞中。因為它們不是在健康的細胞上原有的，因此叫做‘新抗原’。對于人體免疫系統(tǒng)來說，它們看起來像生物等效的霓虹燈在閃爍。個體化多肽在實驗室進行克隆，添加佐劑，加強免疫系統(tǒng)的作用，從而殺傷癌細胞。事實上，這樣自發(fā)緩解也反映了真實的生物學(xué)現(xiàn)象——即免疫系統(tǒng)的特異性激活可以控制腫瘤。這讓生物學(xué)家開辟其它途徑，即讓免疫系統(tǒng)只有在癌細胞，通常是只有在一個病人的癌細胞上發(fā)現(xiàn)的抗原進行攻擊?！?/p>
中國人民解放軍總醫(yī)院醫(yī)院腫瘤內(nèi)科白莉教授說道：“腫瘤本身就是基因病，沒有基因的改變腫瘤的發(fā)生是比較少的。根據(jù)它的一些特點，基于遺傳學(xué)或者是基因組學(xué)的改變進行分析，有針對性的選擇一些靶向的藥來做到同病異治、異病同治，達到一個精準(zhǔn)治療的目的。你可以看到，人群中發(fā)病相對比較高的是哮喘、糖尿病、關(guān)節(jié)炎、老年癡呆和腫瘤，其中腫瘤的異質(zhì)性是最強的。一種藥能夠大概有效率，覆蓋三之一的病人已經(jīng)不錯了，所以體現(xiàn)出個體化治療的重要性。研究表明，經(jīng)過個體化分析以后，有效率達到31%，沒有經(jīng)過篩選的病人是10%?！?/p>
杜學(xué)明主任說到，“眾所周知，煙草煙霧中的高致癌影響使得肺癌成為所有癌癥中最為容易變異的癌癥之一。在亞洲，L858R突變的高發(fā)性及多肽HLA相結(jié)合的同種抗免疫球蛋白，預(yù)示著基于限制性CD8＋細胞毒性T細胞（CTL）的新抗原表位的靶向免疫治療將會使5%的亞洲肺癌患者受益。對于中國不斷高發(fā)的癌癥患者而言，采用個體化克隆多肽的治療方式，能夠為我國不斷高發(fā)的腫瘤病人提供一個全新的治療方式和手段。”
個人定制化癌癥治療方案即將實現(xiàn)
腫瘤疫苗的臨床試驗雖然已經(jīng)開展20余年，但受試者對疫苗的免疫應(yīng)答一直不理想。而本方法有別于之前大部分腫瘤疫苗的一個主要特征是基于下一代基因測序技術(shù)，得到患者的致病基因相關(guān)突變特征，根據(jù)對腫瘤組織的全外顯子組測序結(jié)果以及特定panel基因檢測結(jié)果，再通過CWES預(yù)測患者突變肽抗原，結(jié)合個體HLA分型，定制個體化突變多肽免疫疫苗來實現(xiàn)。從目前的研究結(jié)論來看，本療法適用于有多種基因突變，靶向藥物耐藥的實體腫瘤患者。
“任何兩個患者都不可能有相同的癌細胞特異性新抗原，”波士頓Dana-Farber研究所的Catherine Wu博士說，“這就是為什么我們有機會通過裝配特定病人的新抗原，讓癌癥治療真正個性化。”
肺癌疫苗將能幫助我國患者提升健康指數(shù)
近年來，國家政策也正在鼓勵科學(xué)治療癌癥，延長患者生命，提高全民健康。中共中央、國務(wù)院發(fā)布了《“健康中國2030”規(guī)劃綱要》，這是我國首次在國家層面提出健康領(lǐng)域中長期戰(zhàn)略規(guī)劃，也是我國積極參與全球健康管理，首次將健康提升到國家戰(zhàn)略高度的重要體現(xiàn)?！毒V要》提出：“在2030年，實現(xiàn)全人群、全生命周期的慢性病健康管理，總體癌癥5年生存率提高15%”。國家衛(wèi)計委在“關(guān)于加強腫瘤規(guī)范化診療管理工作的通知”中明確要求“優(yōu)化腫瘤診療模式，即推行‘單病種、多學(xué)科’診療模式?！?/p>
隨著天津北辰醫(yī)院填補了個體化克隆多肽免疫治療癌癥的空白，并隨著項目進一步完善臨床應(yīng)用試驗信息，將能幫助更多癌癥患者延長生命。
招募首批臨床患者
面向全國征集100名肺癌患者
為了進一步推動克隆多肽技術(shù)的臨床應(yīng)用，天津市北辰醫(yī)院積極與中國癌癥基金會保持溝通，并在BBI生命科學(xué)有限公司的支持下，計劃免費招募100位肺癌患者入組克隆多肽免疫治療技術(shù)臨床試驗。專家表示，隨著克隆多肽技術(shù)臨床應(yīng)用的進一步完善，將能幫助更多癌癥患者延長生命，重返健康生活。
詳細了解進一步信息，請到天津市北辰醫(yī)院腫瘤科咨詢。
杜學(xué)明主任演講
我今天匯報的題目是《克隆突變基因個體化多肽治療腫瘤的臨床研究》。這個項目是怎么想起來的？我自己的感觸頗深。因為作為一個腫瘤科的醫(yī)生，最后我感覺都是以失敗告終。因為很多的病人，在采用一般治療方式后，患者的耐藥肯定會出現(xiàn)，有可能在半年，有可能在一年，但是肯定會出現(xiàn)。而且很多病人的化療，也是反復(fù)的換藥。比如他用了一線耐藥以后用二線，二線之后用三線，反復(fù)的去經(jīng)受各種治療，但是最后好多患者都是遇到了一個無藥可用的情況。
在開始講之前，先給大家展示一下我最近收到了三封海內(nèi)外家屬來的信，給大家簡單介紹一下我自己的感觸。第一封患者家屬來信是他妻子的弟弟患了非小細胞肺癌，他也經(jīng)受了一些傳統(tǒng)的放療、化療治療，出現(xiàn)了腦轉(zhuǎn)移。他給我來信咨詢，看看能不能通過我們的克隆多肽項目獲益，因為他通過一些渠道看到我們發(fā)的文章。第二位患者是來自澳大利亞的，也是一位患者家屬來信，他的妻子患了非小細胞肺癌，同樣是接受了傳統(tǒng)的放化療，還有靶向藥物的治療，目前她正在接受化療當(dāng)中。他給我來信，正在尋找多肽治療的方法，他看到之后就趕緊跟我們聯(lián)系，希望得到我們的幫助。第三個是前天收到的一封信，是我們南京河海大學(xué)的一位教授，他其實是一個學(xué)者，他看到了我們這個文章以后，他給我發(fā)了一個郵件，他就說現(xiàn)在是什么情況，經(jīng)受了靶向藥物，化療以后反復(fù)耐藥，希望參加我們這個臨床項目的入組。
看到這幾封來信以后我心里特別有感觸，我們無論是各種病人，無論是在國外的發(fā)達國家，還是在我們這種國家，都會遇到一個局面，就是治著治著沒有藥可用了，而且家屬的求生欲望，讓他還要去尋找一些方法，能不能幫助他，其實這種渴望，這種癌癥患者的心理我們是非常理解的，有的幫助他的親人，有的幫助他的家屬，有的是幫助他自己，所以給我的感觸非常強烈。
我們的醫(yī)學(xué)已經(jīng)很發(fā)達了，包括我們從基因測序上，可以從驅(qū)動基因、致癌基因很多的層面去分析這個病人腫瘤的因素，他是在哪個通道，哪個基因的片段發(fā)生的問題，這個本質(zhì)我們已經(jīng)很清楚了。但是還有一個我們的靶向藥物和各種藥物已經(jīng)相對比較豐富了，每年數(shù)以百億的投入研發(fā)新藥當(dāng)中，大家很多人心里很明白。包括我們每年會有大量的廠家新藥的推出臨床實驗，靶向藥物也比較多。還有一個，我們的醫(yī)生也是各種手術(shù)，都會做的難度比較高，包括一些微創(chuàng)、介入手術(shù)。但是我們患者最后依然會遇到很多問題。從我自己的臨床經(jīng)驗來看，因為費用太多，很多的藥物患者吃不起，或者在中國買不到，很多人甚至找一些特殊渠道去嘗試。還有一個就是患者反復(fù)的用藥、耐藥以后的無藥可救。所以說結(jié)合我們中國的現(xiàn)狀，全國現(xiàn)在每天有一萬人確診癌癥，肺癌的死亡率和發(fā)病率又都是第一名。作為一個腫瘤科醫(yī)生，我反復(fù)的在思考這個問題，我們應(yīng)該能做點什么，能夠幫助這一類的病人。因為最可怕的不是死亡，而是失去希望的等待。
現(xiàn)在腫瘤的常規(guī)治療手段，傳統(tǒng)治療方式就是手術(shù)、化療、放療，還有靶向治療、免疫治療，這就是一個治療的現(xiàn)狀我們在克隆多肽當(dāng)中到底做了什么，這個項目我們是在2014年開始的。我們做的第一個病人，有一次我們打完了這個病人的多肽，合成完了以后開始嘗試，患者到一個月復(fù)查的時候我不太相信，他是兩肺多發(fā)的轉(zhuǎn)移瘤。第一次復(fù)查的片子，轉(zhuǎn)移瘤都消失了，他是靶向藥物都無效的病人，就打了一個多肽轉(zhuǎn)移瘤就消失了，所以我們就不斷的追蹤和隨訪。通過兩年的數(shù)據(jù)積累，兩年我們一共做了82例的多肽病人。經(jīng)過反復(fù)的收集數(shù)據(jù)，并將我們的科研成果發(fā)在專業(yè)的雜志上。今年重點的工作就是想做深一步的研究。 下面簡單介紹一下我們這個項目具體的流程。我們就從腫瘤的組織里面提取組織做基因測序，就是大Panel的測序，測完序之后找到突變的基因點，就是測基因突變的位點。因為往往一個腫瘤的患者會有多個基因突變的位點。我們即使吃靶向藥物，只是針對一個靶點，所以往往很快就會出現(xiàn)耐藥，其他基因突變的出現(xiàn)會影響這個問題。所以我們會做多基因組的突變，然后根據(jù)這個多針的HER2分型，我們會結(jié)合出來每一個基因突變會合成一到兩條多肽，然后進行一個小的蛋白質(zhì)的多肽，用它進行一個體內(nèi)刺激。刺激患者的DC細胞，讓患者自己發(fā)生一種很巧妙的免疫反應(yīng)，讓患者真正的殺腫瘤的T細胞能夠針對性的殺掉腫瘤。因為大家知道，為什么患者得腫瘤？是因為我們自己體內(nèi)的T細胞不能殺掉或者清除掉癌細胞。所以在治療過程當(dāng)中，我們想到了這個環(huán)節(jié)，我們讓他的細胞重新再具有殺掉腫瘤細胞的能力，這是我們需要做的事情，我們就是這么篩選出來特異性抗原?？赡茉谶@個過程當(dāng)中還需要一個評分。當(dāng)我們做分型、配型以后，會評估出這個患者的分值是多少，肽鏈發(fā)揮的作用會有多大，都有一個詳細的評估計劃，我這里只是做大概的介紹，最后是這個抗原用到患者體內(nèi)。
這張幻燈片是美國MD安德森癌癥中心Gregory教授做的，克隆多肽的治療包括兩個階段，一個是刺激階段，克隆出來的特定多肽，直接到體內(nèi)刺激DC細胞，讓DC細胞和蛋白質(zhì)的進行有效的結(jié)合。我們的DC細胞再與T細胞進行刺激，讓T細胞產(chǎn)生記憶和識別功能，它就能針對性的去識別和殺傷我們需要殺傷含帶有這個基因突變的腫瘤細胞，這個攻擊過程是整個刺激結(jié)果和效應(yīng)結(jié)果，是這么一個原理。
這是我們前期的數(shù)據(jù)總結(jié)，我們做了82例患者，我們分析了他的血液學(xué)的結(jié)果。這個血液是在患者打肽鏈之前的第一個月、第二個月、第三個月、第四個月，分別去采集他的血，分離他的血清。最后我們做一個實驗數(shù)據(jù)的分析。當(dāng)然這個數(shù)據(jù)還沒有發(fā)表，只是我們分析這個多肽的有效率和分布圖形。同時我還做一個病理展示，就是說這個患者，我們做的那個病人，這是一個85歲的男性，這個病人接受過化療、靶向治療，在我們醫(yī)院接受了免疫治療。其實他在2014年的12月份就出現(xiàn)了一個靶向無效的情況，我們就給他合成了一個11條的多肽。好像里面涵蓋了有兩條的長肽，23個氨基酸系列，另有9條短肽。兩周以后呼吸狀態(tài)見好，38天以后，肺里的腫瘤明顯見小。我們做了整個的血液分析，我們檢測這個患者體內(nèi)，驗證了他血里面含有基因突變信息殺傷細胞有多少，明顯比之前要高了很多，說明了這個病人具有了抗腫瘤的特性。
此外，我們正式的啟動全國免費招募。希望有更多的無藥可治的病人，能夠有更多的治療方法進行治療。這個病人使用了多種技術(shù)的結(jié)合，包括腫瘤組織下一代基因測序技術(shù)，HLA高分辨率分型技術(shù)，克隆多肽合成技術(shù)等。
媒體專訪
問題：您有一些固定的肽鏈，每一個病人是不是都要重新做基因測序？重新來選擇敏感的位置？
杜學(xué)明：腫瘤是一個復(fù)雜的多基因病，因此需要根據(jù)每個患者的腫瘤特征進行基因測序，每個人的突變，根據(jù)基因突變信息合成個體化多肽。
提問：也就是說每個人都有一個獨特的東西，我看到了您引用了一個疫苗的概念。
杜學(xué)明：其實這個不應(yīng)該叫做疫苗，更多的是克隆多肽技術(shù)。這是一個方法，就是通過我們體外的克隆，復(fù)制體內(nèi)的蛋白質(zhì)小片段進行刺激，并不是說這個化學(xué)成份是我們創(chuàng)造出來的，是患者自己體內(nèi)自有的。在體外復(fù)制，進入患者體內(nèi)之后進行刺激，是這么一個過程。
提問：現(xiàn)在您做了這82例病人，總體的有效率是什么樣的？
杜學(xué)明：目前，63%的病人血清學(xué)有了反應(yīng)，這一數(shù)據(jù)有可能跟我們開始入組的篩選不太一樣。后來我們慢慢總結(jié)出來：隨著篩選率更高，篩選的基因突變頻率一定在5%以上。一般我們原來基因突變頻率控制的不是那么嚴格，我們要求的突變頻率更高一些，可能位點結(jié)合率更高一些。
提問：您需要招募100個病人，我們肯定都會發(fā)這個消息，我想知道您入組有什么樣必要的條件？
杜學(xué)明：我們有一個臨床入組的標(biāo)準(zhǔn)，包括患者的預(yù)計生存率在半年以上，還有基因突變的頻率在5%以上，還有就是患者有可見的實體性的腫瘤。其他的生活質(zhì)量評分，我們會有具體表格。
提問：我這邊看到您對這種多肽來治療腫瘤有這樣一些臨床的應(yīng)用。我想了解一下，咱們的患者，尤其是您舉的這個例子是在很短的時間內(nèi)就有了很明顯的了解，你們有長期跟蹤這個結(jié)果嗎？會不會有這種類似于前面的靶向藥物出現(xiàn)的耐藥這種情況嗎？
杜學(xué)明：這個問題也是我們一直想摸索的：到底肽鏈需要打多長時間，需要多大的劑量，還有就是臨床里面需不需要我們再定期的做基因測序，看看有沒有新的突變出現(xiàn)，我們再合成新的肽，整個過程也是我們的摸索過程。我們現(xiàn)在一般的病人隨訪半年可能就沒有繼續(xù)跟蹤隨訪了，打多肽最早打到三個月，現(xiàn)在打到半年往后延。是不是這種多肽可以持續(xù)性的打？這都是我們未來做實驗的時候需要做的工作。
提問：針對這個我也想了解一下，前面比如說EGFR這種靶向治療，或者咱們這種多肽的治療，在應(yīng)用范圍，還有特點方面區(qū)別點在哪里？我們的優(yōu)勢是什么？
杜學(xué)明：其實多肽這種技術(shù)優(yōu)勢就在于，它不是某個位點。包括合成一個EGFR，只是EGFR可能是克唑替尼，但是只要是多肽，就可以合成自己的靶向，不存在基因突變的約束。同時還可以多基因的同時起作用，包括一個患者，比如說有三個突變位點或者是五個突變位點，可以是10條或者20條，或者是30條，這個作用非常個體化，完全是不一樣的。
提問：北辰醫(yī)院腫瘤科現(xiàn)在有多少張床位？
杜學(xué)明：我們現(xiàn)在有100張床位。
提問：您說的多肽治療的機理就是激活T細胞，殺死腫瘤細胞，除了對于肺癌適應(yīng)以后，其他的腫瘤是不是也是一種適應(yīng)癥呢？
杜學(xué)明：理論上只要有特定的致病基因突變就可以合成個體化的克隆多肽。我們?yōu)槭裁凑心挤伟┑?，就是我們現(xiàn)在想以肺癌為突破口，我們后期可能還要招募肝癌、胰腺癌和結(jié)腸癌。因為美國跟我們做同步的，F(xiàn)DA批準(zhǔn)的他們招募的是結(jié)腸癌，今天我們做的事情美國也在做，他們做的是結(jié)腸癌，我們也是共同互補發(fā)展。
提問：也就是說所有的，只要存在基因突變的，包括乳腺，其他都有可能。
杜學(xué)明：剛才我們在病房看到的就是一個乳腺癌的病人，春節(jié)前疾病進展很快，病情比較嚴重，病人現(xiàn)在各方面指標(biāo)有所好轉(zhuǎn)。很多就是用病人的事實來說明，其實病人需要的就是一個有質(zhì)量的生活，他可能不懂得那么高大上，我們做的工作，包括測序也好，研究也好，他可能要求的就是一個很好的生活質(zhì)量。比如我今天需要能和健康人一樣的吃飯、睡覺，這就是他簡單的要求。其實我們做腫瘤治療，最終的臨床還是追求這個。
提問：我們了解到肺癌有很多種類的，適用這個技術(shù)的是符合您的入組條件就可以了還是屬于哪個子類的？
杜學(xué)明：我們設(shè)計的是不分亞型，非小細胞肺癌和小細胞肺癌均可以入組。我們病理分型是一個基礎(chǔ)，但是我們克隆多肽的合成依據(jù)致病基因突變，沒有根據(jù)是鱗癌或者是腺癌。所以為什么我們更有應(yīng)用前景呢？肺鱗狀細胞癌的病人沒有突變，對化療不敏感，患者面臨的問題就是無藥可治，我們這種方式更有一個優(yōu)勢，通過我們這些治療，給這些無藥可治的病人一個希望，哪怕讓他穩(wěn)定，哪怕他的生存期能夠長，盡量的病情發(fā)展得慢，這就是我們想達到的一個治療效果。
提問：我想請教您一個問題，現(xiàn)在克隆多肽這種治療方法在臨床上普及的效果怎么樣？以后有什么樣的應(yīng)用前景？
杜學(xué)明：這個臨床項目只是我們跟美國進行了一個同步的臨床研究，只是我們的實驗成果發(fā)布比較早，沒有咱們國內(nèi)的病人這么多，我們經(jīng)過兩年的研究，已經(jīng)把這個成果發(fā)出來了。后面的應(yīng)用前景，我覺得通過我們對臨床82個病人的評估，我們認為效果還是很不錯的。未來我們的想法就是說，把這個成本不斷的壓低，能夠讓更多的癌癥患者能夠獲益，這也是我們的一個真正的想法。
