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常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

ELISA檢測(cè)


服務(wù)介紹

    酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定ELISA(Enzyme linked immunosorbent assay),是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),再用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開(kāi),最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)底物后,底物被酶催化為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)反應(yīng)后顏色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

客戶(hù)提供

     待檢測(cè)樣品,ELISA kitELISA說(shuō)明書(shū)

最后交付

     完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告包括實(shí)驗(yàn)步驟,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及分析等

 

熒光素酶報(bào)告基因DLA檢測(cè)

服務(wù)介紹:

    螢光素酶是理想的報(bào)告基因,因?yàn)椴溉閯?dòng)物細(xì)胞中不含內(nèi)源性螢光素酶,其轉(zhuǎn)錄完成后就立刻生成功能性的螢光素酶;Dual-Luciferase?雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)采用同時(shí)表達(dá)螢火蟲(chóng)螢光素酶和海腎螢光素酶組成雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)系統(tǒng)(Dual-Luciferase Reporter Assay簡(jiǎn)稱(chēng)DLA),兩者沒(méi)有種源同源性并對(duì)應(yīng)不同的反應(yīng)底物,故而沒(méi)有交叉干擾。本實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)被廣泛用于:轉(zhuǎn)錄因子/啟動(dòng)子luciferase報(bào)告基因研究和miRNA對(duì)靶基因調(diào)控研究。

客戶(hù)提供

   1.  轉(zhuǎn)錄因子/啟動(dòng)子luciferase報(bào)告基因研究:

        a. 提供待研究的轉(zhuǎn)錄因子名稱(chēng)(如果有轉(zhuǎn)錄因子過(guò)表達(dá)質(zhì)粒,可提供予我們);

        b. 提供預(yù)測(cè)的轉(zhuǎn)錄因子靶基因的啟動(dòng)子結(jié)合位點(diǎn)(如果有啟動(dòng)子熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒,可提供予我們);

        c. 確定是在目的細(xì)胞還是293工具細(xì)胞開(kāi)展。

    2. miRNA對(duì)靶基因調(diào)控研究:

        a. 提供miRNAmimics或者inhibitor;

        b. 提供預(yù)測(cè)的miRNA靶基因的3-UTR結(jié)合位點(diǎn)(如果有轉(zhuǎn)錄因子過(guò)表達(dá)質(zhì)粒,可提供給我們);

        c. 確定是在目的細(xì)胞還是293工具細(xì)胞開(kāi)展。

最后交付

        完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告包括實(shí)驗(yàn)試劑耗材,廠家貨號(hào),實(shí)驗(yàn)步驟及實(shí)驗(yàn)結(jié)果等;

 

流式細(xì)胞儀檢測(cè)

服務(wù)介紹

        流式細(xì)胞儀(flow cytometer)是一種能夠探測(cè)和計(jì)數(shù)以單細(xì)胞液體流形式穿過(guò)激光束的細(xì)胞檢測(cè)裝置,由于在檢測(cè)中使用的細(xì)胞標(biāo)志示蹤物質(zhì)為熒光標(biāo)記物,因此,用來(lái)分離、鑒定細(xì)胞的流式細(xì)胞儀有被稱(chēng)為熒光激活細(xì)胞分類(lèi)儀,是分離和鑒定細(xì)胞群及亞群的一種強(qiáng)而有力的應(yīng)用工具。

    流式細(xì)胞分析/分選系統(tǒng)主要應(yīng)用于:1.干細(xì)胞組織工程在研究;2.細(xì)胞增值、活性和凋亡研究;3.疾病細(xì)胞如炎癥細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸研究;4.基因表達(dá)和表達(dá)調(diào)控研究;5.細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)和生物大分子間相互作用研究;6.各種病原體如病毒、細(xì)菌等基礎(chǔ)和致病性和致病機(jī)理研究;7.藥理藥效和藥物開(kāi)發(fā)研究;8.移植和細(xì)胞治療研究;9.生物材料對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、活性和功能的影響等。

 

客戶(hù)提供

      1. 組織、血液樣本或細(xì)胞樣本。

        2. 分選所采用的熒光、熒光抗體(或由公司代購(gòu))

        3. 運(yùn)輸說(shuō)明:外地血清,血漿樣本,用冰袋運(yùn)輸,樣本用泡沫隔開(kāi),不要直接與冰袋接觸,防止凝血。

 

最后交付

      1. 分離后的細(xì)胞。

        2. 實(shí)驗(yàn)報(bào)告:詳細(xì)操作步驟、分選圖片

 

核酸水平研究平臺(tái)

基因克隆

 

服務(wù)介紹

      獲得基因的途徑有兩個(gè),一是通過(guò)PCR直接從生物體的核酸(基因組DNAmRNA)中調(diào)??;二是通過(guò)人工化學(xué)合成的方式獲得。其中基因的化學(xué)合成即人工合成寡核甘酸片段,通過(guò)PCR拼接的方法,獲得所需要的基因表達(dá)序列或者啟動(dòng)子等功能性元件片段?;蚧瘜W(xué)合成使合成任何基因序列成為可能。

客戶(hù)提供

     1.  提供基因信息包括基因的名稱(chēng),GeneID及轉(zhuǎn)錄本號(hào);

     2.  提供構(gòu)建的載體及圖譜信息(包括載體的抗性,標(biāo)簽及酶切位點(diǎn)等信息)。

最后交付

    提供構(gòu)建好的質(zhì)粒及菌液,測(cè)序結(jié)果等。 

 

慢病毒包裝

 

服務(wù)介紹

    慢病毒(Lentivirus)是一類(lèi)改造自人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒載體,基因組為RNA,對(duì)分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力。慢病毒基因組進(jìn)入細(xì)胞后,在細(xì)胞漿中反轉(zhuǎn)錄為DNA,形成DNA整合前復(fù)合體,進(jìn)入細(xì)胞核后,DNA整合到細(xì)胞基因組中。整合后的DNA轉(zhuǎn)錄成mRNA,回到細(xì)胞漿中,表達(dá)目的蛋白或產(chǎn)生小RNA。慢病毒介導(dǎo)的基因表達(dá)或小RNA干擾作用持續(xù)且穩(wěn)定,并隨細(xì)胞基因組的分裂而分裂。

 

客戶(hù)提供

      1. 確定過(guò)表達(dá)/敲降慢病毒包裝;

       2. 提供基因信息包括基因名稱(chēng),GeneID,種屬及序列;

       3. 確定對(duì)于過(guò)表達(dá)/敲降慢病毒載體的要求比如抗性及標(biāo)簽等。

 

最后交付

       1. 目的基因慢病毒及對(duì)照病毒:滴度≥ 1×108 UT

      2. 完成的實(shí)驗(yàn)報(bào)告包括實(shí)驗(yàn)步驟,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及原始圖片等

 

qPCR檢測(cè)

 

服務(wù)介紹

      qPCR即實(shí)時(shí)熒光定量PCR,是一種以SYBR Green染料法/Taqman探針?lè)ㄟM(jìn)行相對(duì)定量的檢測(cè)服務(wù),即用已知管家基因做為內(nèi)參照,根據(jù)目的基因和管家基因的相對(duì)表達(dá)作為定量的最后結(jié)果。該技術(shù)具有準(zhǔn)確度,靈敏度高等特點(diǎn)。qPCR現(xiàn)已成為一種成熟的mRNA、microRNAlncRNA等定量手段。其中,Sybr-Green法因?yàn)槭褂梅奖?、價(jià)格低廉(相對(duì)于Taqman探針?lè)ǎ┒粡V泛使用。

 

客戶(hù)提供

    1.  確定待檢測(cè)的基因名稱(chēng),Gene ID及基因類(lèi)型(mRNA / microRNA /lncRNA等);

    2.  提供待檢測(cè)的樣品(細(xì)胞樣品:細(xì)胞數(shù)量>106;組織樣品:組織總量>100 mg;血清樣品>200ul,避免提供帶有紅色溶血的血清樣本);

  

最后交付

    完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告包括試劑耗材,廠家貨號(hào),實(shí)驗(yàn)步驟及實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。

 

Chip實(shí)驗(yàn)

 

服務(wù)介紹

       ChIP是結(jié)合了ChIP和實(shí)時(shí)定量PCR的技術(shù),通過(guò)特異性抗體富集與特定轉(zhuǎn)錄因子/組蛋白修飾結(jié)合的DNA片段;然后進(jìn)行qPCR檢測(cè),從而能夠檢測(cè)到與特定轉(zhuǎn)錄因子/組蛋白修飾結(jié)合的已知基因啟動(dòng)子區(qū)域;ChIP常用于在已知啟動(dòng)子范圍內(nèi)尋找特定轉(zhuǎn)錄因子/組蛋白修飾的結(jié)合位點(diǎn)。

 

客戶(hù)提供

     1.  實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案(比如細(xì)胞名稱(chēng),細(xì)胞的分組,細(xì)胞的處理方式等實(shí)驗(yàn)信息);

     2.  免疫沉淀所用的ChIP級(jí)抗體;

     3.  預(yù)測(cè)好的轉(zhuǎn)錄因子靶基因啟動(dòng)子結(jié)合位點(diǎn)序列信息。

     4.  提供生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)條件,抗體,細(xì)胞處理的實(shí)驗(yàn)材料等;

 

最后交付

     完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告包括試劑耗材,廠家貨號(hào),實(shí)驗(yàn)步驟及實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。

 

DNA甲基化檢測(cè)

服務(wù)介紹

         DNA甲基化(Methylation)是指在DNA甲基化轉(zhuǎn)移(DNMTs)的作用下,CpG二核苷酸的5'端胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)?/span>5'甲基胞嘧啶,其在人的正常發(fā)育、X 染色體失活、衰老以及許多人類(lèi)疾?。ㄈ绨l(fā)育畸形、癌癥、心血管疾病、糖尿病和神經(jīng)心理失調(diào)等)發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。DNA甲基化檢測(cè)常用的方法:亞硫酸氫鹽修飾后測(cè)序法(簡(jiǎn)稱(chēng):BSP法)和甲基化特異性的PCR 法(簡(jiǎn)稱(chēng):MSP法)。

         亞硫酸氫鹽修飾后測(cè)序法(BSP)特點(diǎn):可靠性高,精確度好,能明確目的片段中每一個(gè)CpG位點(diǎn)的甲基化狀態(tài)。

         甲基化特異性的PCR 法(MSP)特點(diǎn):敏感性高,適合于甲基化的定性研究。

 

客戶(hù)提供

        1. 提供詳細(xì)的基因信息(包括基因序列,Gene ID及啟動(dòng)子序列分析可能的甲基化區(qū)域位點(diǎn))。

           2. 提供待檢測(cè)的樣品及數(shù)量(細(xì)胞:大于3X10E6;組織:大于100mg等)

 

最后交付

        完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告包括實(shí)驗(yàn)步驟,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及實(shí)驗(yàn)電泳圖,測(cè)序圖等。

 

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