国产一级a片免费看高清,亚洲熟女中文字幕在线视频,黄三级高清在线播放,免费黄色视频在线看

第七章  基因的轉(zhuǎn)錄

一、名詞解釋

1.轉(zhuǎn)錄：是指以DNA為模板，合成RNA的信息傳遞過程。除了某些RNA病毒的基因組之外，所有的RNA都是轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。

2.反義鏈：在基因的DNA雙鏈中，轉(zhuǎn)錄時(shí)作為mRNA合成模板的那條單鏈叫做模板鏈或反義鏈。

3.上游順式作用元件：在真核基因中存在著很多的位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游的順式調(diào)控序列，這些DNA序列稱之為上游順式作用元件。是指與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)、能夠被調(diào)控蛋白特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列，包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子元件等，它們是通過與反式作用因子的相互作用來調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性。

4.啟動(dòng)子：是基因DNA中一段特定的核苷酸序列，是與啟動(dòng)機(jī)因表達(dá)相關(guān)的順式作用元件，式RNA聚合酶在轉(zhuǎn)錄起始時(shí)對(duì)模板DNA的識(shí)別位點(diǎn)和結(jié)合位點(diǎn)，是基因轉(zhuǎn)錄的開始部位,也即是轉(zhuǎn)錄是否能起始的決定位點(diǎn)。

5.終止子：促進(jìn)轉(zhuǎn)錄終止的DNA序列，在RNA水平上通過轉(zhuǎn)錄出的終止子序列形成莖-環(huán)結(jié)構(gòu)而起作用。又可分為依賴于ρ因子的終止子和不依賴于ρ因子的終止子兩類。

二、思考題

1.原核生物和真核生物基因轉(zhuǎn)錄的異同？

①相同點(diǎn):轉(zhuǎn)錄過程是相似的,都是以DNA的一條鏈為模板,4種NTP為底物,經(jīng)過起始、延伸和終止三個(gè)階段，以5′→3′方向合成RNA。

②不同點(diǎn)：

2.熟悉原核生物啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)與功能、其中的－35區(qū)、－10區(qū)等的結(jié)構(gòu)？

①域中的基序并與之結(jié)合，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的起始。一般將DNA上的轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)定位+1來排序，其下游（右側(cè)）為正值，其上游（左側(cè)）為負(fù)值。原核生物不同基因的啟動(dòng)子雖然結(jié)構(gòu)也有一定的差異，但明顯具有共同的特點(diǎn)?！艚Y(jié)構(gòu)典型，都含有識(shí)別（R），結(jié)合（B）和起始（I）三個(gè)位點(diǎn)；◆序列保守，如-35序列，-10序列結(jié)構(gòu)都十分保守；◆位置和距離都比較恒定；◆直接和多聚酶相結(jié)合；◆常和操縱子相鄰；◆都在其控制基因的5′端；◆決定轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)和方向。

②-35序列又稱為Sextama盒,其保守序列為TTGACA，與-10序列相隔16～19bp。其功能是：◆為RNA 聚合酶的識(shí)別位點(diǎn)。RNA 聚合酶的核心酶只能起到和模板結(jié)合和催化的功能，并不能識(shí)別-35序列，只有σ亞基才能識(shí)別-35序列，為轉(zhuǎn)錄選擇模板鏈?！?35序列和-10序列的距離是相當(dāng)穩(wěn)定的，過大或過小都會(huì)降低轉(zhuǎn)錄活性。這可能是因?yàn)镽NA 聚合酶本身的大小和空間結(jié)構(gòu)有關(guān)。

③-10序列也稱為Pribnow框盒,其保守序列為TATAAT，位于-10bp左右，其中3′端的“T”十分保守。A,T較豐富，易于解鏈。它和轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)“I”一般相距5bp。其功能是：◆與 RNA聚合酶緊密結(jié)合；◆形成開放啟動(dòng)復(fù)合體；◆使RNA聚合酶定向轉(zhuǎn)錄。

3.原核生物轉(zhuǎn)錄的起始分幾個(gè)階段？

①核心酶在σ因子參與下接觸到DNA上，形成特異性結(jié)合；

②起始識(shí)別，RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合，形成封閉性起始復(fù)合物；

③從封閉性轉(zhuǎn)變?yōu)殚_放形起始復(fù)合物，酶結(jié)合在－10序列，啟動(dòng)子活化，并解開雙鏈結(jié)構(gòu)，暴露模板鏈；

④形成DNA－酶－底物NTP的三元起始復(fù)合物，酶移動(dòng)到轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)，在起始位點(diǎn)加上開頭的幾個(gè)核苷三磷酸。

4.真核生物基因類型II啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)與功能？

①轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)：是RNA合成的開始位置；

②基本啟動(dòng)子：和Inr一起構(gòu)成核心啟動(dòng)子；

③轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)下游元件：

④轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游元件：

5.真核生物基因轉(zhuǎn)錄的一般規(guī)律？

①典型的真核基因轉(zhuǎn)錄單元為單順反子，原核為多順反子。

②真核生物的RNA聚合酶高度分工。

③轉(zhuǎn)錄的正常進(jìn)行，除了需要RNA聚合酶以外，還需要許多蛋白質(zhì)因子的參與。

④真核基因DNA的順式作用元件要比原核基因復(fù)雜得多。

⑤真核基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控以正調(diào)控為主。

第八章　轉(zhuǎn)錄后加工

一、名詞解釋

1.轉(zhuǎn)錄后加工：在轉(zhuǎn)錄中新合成的RNA往往是較大的前體分子，需要經(jīng)過進(jìn)一步的加工修飾，才轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂猩飳W(xué)活性的、成熟的RNA分子，這一過程稱為轉(zhuǎn)錄后加工。

2.多順反子：在原核細(xì)胞中，通常是幾種不同的mRNA連在一起，相互之問由一段短的不編碼蛋白質(zhì)的間隔序列所隔開，這種mRNA叫做多順反子mRNA。

3.RNA編輯：某些mRNA的核苷酸序列，在生成轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物后還需插入、刪除或取代一些核苷酸殘基，方能生成具有正確翻譯功能的模板，遺傳信息在mRNA水平上的改變過程，稱為RNA編輯。

二、思考題

1、內(nèi)含子RNA剪接的三種方式？

第一類：自我剪切。由于內(nèi)含子的特殊結(jié)構(gòu)而能自發(fā)地進(jìn)行剪切。

第二類：蛋白質(zhì)參與剪切的內(nèi)含子，主要在tRNA前體中發(fā)現(xiàn)。剪切在一系列酶催化下進(jìn)行。

第三類：內(nèi)含子是snRNP參與剪接的內(nèi)含子。

2、原核生物tRNA前體以幾種方式存在？

①多個(gè)相同tRNA串聯(lián)排列在一起；

②不同的tRNA串聯(lián)排列；

③tRNA與rRNA混合串聯(lián)排列在一起。因而RNA前體必須經(jīng)歷加工，在tRNA與一些RNA片段之間先切斷，完成此任務(wù)的似乎是RNaseⅢ。然后，RNA片段再進(jìn)行5’端、3’端加工，某些堿基進(jìn)行修飾

3、真核生物RNA前體的加工過程包括？

真核生物tRNA和rRNA前體的加工包括轉(zhuǎn)最初始產(chǎn)物中間隔序列的除去、內(nèi)含子的剪接、5’和3’端修飾、堿基的修飾等。這些過程需要酶和蛋白質(zhì)的參與。

4、RNA前體的剪切過程要通過4個(gè)步驟：

①首先在5’端切除非編碼的序列，生成41S中間物；

②41S的RNA切成32S和20S兩段，分別含有28S rRNA和18S rRNA，32S中還含有5.8S rRNA；

③20S剪切成18S；

④32S剪切成28S rRNA和5.8S rRNA，它們相互進(jìn)行堿基配對(duì)。

5、5’端帽子結(jié)構(gòu)具有如下3個(gè)功能。

①對(duì)mRNA的保護(hù)作用，保護(hù)mRNA免受RNase從5’端開始的攻擊。

②5’端帽子結(jié)構(gòu)使mRNA具有可翻譯能力。

③5’端帽子有利于成熟的mRNA從細(xì)胞核輸送到細(xì)胞質(zhì)，只有成熟的mRNA才能進(jìn)行輸送。

第九章  蛋白質(zhì)生物合成和翻譯后加工

一、名詞解釋

1.tRNA荷載作用：翻譯起始之前不斷地供應(yīng)各種氨基酰-tRNA，也就是氨基酸必須被活化，共價(jià)連接在tRNA上，即為tRNA荷載作用。

2.開放閱讀框架：從mRNA 5’端起始密碼子AUG到3’端終止密碼子之間的核苷酸序列，各個(gè)三聯(lián)體密碼連續(xù)排列編碼一個(gè)蛋白質(zhì)多肽鏈，稱為開放閱讀框架(ORF)。

3.肽鏈合成的延伸：是指第二個(gè)和以后的密碼子編碼的氨基酸不斷進(jìn)入核糖體，并形成肽鍵的過程。

4.核定位信號(hào)：是另一種形式的信號(hào)肽, 可位于多肽序列的任何部分。一般含有 4～8個(gè)氨基酸, 且沒有專一性, 作用是幫助親核蛋白進(jìn)入細(xì)胞核。

5.共翻譯轉(zhuǎn)動(dòng)機(jī)制：

6.分子伴侶和分子伴素：分子伴侶專指一類多功能蛋白，它能通過阻止諸如聚合作用這樣的副反應(yīng)來促使其他蛋白質(zhì)按正確的方式進(jìn)行折疊，而它本身卻不是最終形成的功能蛋白的部分。分子伴素是指不對(duì)共價(jià)連接的蛋白質(zhì)能特異性地幫助折疊，而是非特異性地幫助蛋白質(zhì)折疊，建立起他的正確結(jié)構(gòu)。

7.遺傳密碼的特點(diǎn)：①三聯(lián)密碼；②無標(biāo)點(diǎn)符號(hào)；③不重疊；④通用性和變異性，其中通用性是指各種生物共用一套遺傳密碼；⑤簡(jiǎn)并性；⑥起始密碼子和終止密碼子。

8.擺動(dòng)假設(shè)要點(diǎn)：①密碼子和反密碼子之間的堿基配對(duì)中，密碼子的5´端前兩位堿基必須嚴(yán)格地按照堿基配對(duì)原則同反密碼子配對(duì)。②密碼子的第3個(gè)核苷酸為A時(shí)，由于受到立體化學(xué)因素的影響，將產(chǎn)生與G,U和C配對(duì)的一組特異構(gòu)象。

9.滑動(dòng)搜索模型：是闡述核糖體在帶有5´帽子結(jié)構(gòu)地真核生物mRNA上如何啟動(dòng)翻譯的起始反應(yīng)。

10.三位點(diǎn)模型：現(xiàn)在認(rèn)為核糖體結(jié)合tRNA有三個(gè)位點(diǎn)，即P位點(diǎn)，A位點(diǎn)和E位點(diǎn)。在早期，普遍認(rèn)為核糖體只有兩個(gè)結(jié)合tRNA的位點(diǎn)，即P位點(diǎn)和A位點(diǎn)，后來發(fā)現(xiàn)還有E位點(diǎn)。因而提出三位點(diǎn)模型。

11.信號(hào)肽和導(dǎo)肽的特點(diǎn)：

①信號(hào)肽：◆幾乎所有的信號(hào)肽整體上都是疏水的?！粜盘?hào)肽一般位于蛋白質(zhì)的N端，進(jìn)入膜后被信號(hào)肽酶水解，真核細(xì)胞信號(hào)肽酶位于ER膜，原核細(xì)胞位于質(zhì)膜內(nèi)側(cè)?！粜盘?hào)肽中部常常由12～14個(gè)殘基構(gòu)成疏水性酸，稱為信號(hào)肽疏水酸?！粜盘?hào)肽是初生蛋白質(zhì)穿過膜所必須的疏水性肽段，位于蛋白質(zhì)分子的各個(gè)部位?！粜盘?hào)肽幾乎沒有嚴(yán)格的專一性?！粜盘?hào)肽可能不是以一直線通過雙脂層膜，而是一種環(huán)狀結(jié)構(gòu)。

②導(dǎo)肽的共性：◆帶正電荷的堿性氨基酸（特別是Arg）含量較豐富?！舨缓蚧旧喜缓瑤в胸?fù)電荷的酸性氨基酸?！袅u基氨基酸（特別是Ser）含量較高◆有形成兩親的а螺旋結(jié)構(gòu)的傾向。

二、思考題

1.核糖體的組分和立體結(jié)構(gòu)？

2.原核和真核生物翻譯的起始？?jī)烧咂鹗挤磻?yīng)的比較？

①起始階段一樣：◆只在核糖體小亞基上結(jié)合荷載的起始tRNA；◆在mRNA上必須找到合適的起始密碼子；◆在已經(jīng)形成有小亞基，mRNA和起始tRNA的起始復(fù)合物之后，大亞基參與形成完整的起始復(fù)合物。

②差異：◆原核細(xì)胞中，mRAN首先與小亞基結(jié)合，再有起始tRNA加入形成起始復(fù)合物。而真核細(xì)胞中，起始tRNA首先結(jié)合于小亞基，形成四元復(fù)合物，然后在多種因子參與下結(jié)合mRNA，才形成起始復(fù)合物?！粜喕鹗紡?fù)合物在mRNA上尋找起始密碼子的方式不同。

3.翻譯延伸和終止的過程？

①延伸反應(yīng)：◆進(jìn)位反映是延伸的開始步驟；◆轉(zhuǎn)位和肽鍵的合成；◆移位反應(yīng)。

②終止的過程：◆終止密碼子；◆終止密碼的校正；◆釋放因子。

4.蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的3種機(jī)制？

①核孔對(duì)特定大分子起選擇性通道的作用，核孔以其充分折疊的構(gòu)象轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)；

②分泌蛋白的邊翻譯邊轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制；

③翻譯后轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。

5.蛋白質(zhì)前體的共價(jià)修飾類型，蛋白質(zhì)的剪切形式，內(nèi)含肽的剪切過程？

①共價(jià)修飾類型：◆肽鏈N端殘基fMet或Met的切除；◆二硫鍵的形成；◆氨基酸側(cè)鏈的共價(jià)修飾。

②蛋白質(zhì)的剪切形式：前胰島素原，胰凝乳蛋白酶原，凝血酶原的活化，及蛋白質(zhì)內(nèi)含子，外顯子和自我剪切。

③內(nèi)含肽的剪切過程：內(nèi)含肽的切除相應(yīng)于hnRNA中內(nèi)含子的剪切。內(nèi)含肽是蛋白質(zhì)的內(nèi)部片段，翻譯后很快被剪切，兩個(gè)外顯肽連接到一起。內(nèi)含肽的長(zhǎng)度一般在300～ 600個(gè)氨基酸之間。內(nèi)含肽的剪接位點(diǎn)的序列非常相似，第一個(gè)氨基酸通常是半胱氨酸，有時(shí)為絲氨酸，最后兩個(gè)氨基酸的序列一般總是組氨酸和天冬氨酸。下游外顯肽的第一個(gè)氨基酸是半胱氨酸、絲氨酸或蘇氨酸。剪接是由內(nèi)含肽自我催化的，具體機(jī)制不詳。

6.蛋白質(zhì)折疊的意義和過程及自動(dòng)裝配原則？

①雙重意義：結(jié)構(gòu)上，這個(gè)過程使伸展的肽鍵成為特定的三維結(jié)構(gòu)；功能上，它使無活性的分子具有特定生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)分子。

②自動(dòng)裝配原則：蛋白質(zhì)在離體就已具有自發(fā)裝配的能力，并且不需要外加能量。自裝配原則只適用于小分子的蛋白質(zhì)。

第十一章  原核生物基因和真核生物基因表達(dá)的調(diào)空

1、名詞解釋

1.操縱子：原核生物基因表達(dá)和調(diào)空的單位，包括功能相關(guān)的幾個(gè)結(jié)構(gòu)基因和能被調(diào)空基因產(chǎn)物識(shí)別的DNA 控制元件。

2.結(jié)構(gòu)基因：是指一類編碼細(xì)胞結(jié)構(gòu)和基本代謝活動(dòng)所必要的RNA、蛋白質(zhì)或酶。一般來說，它們不是調(diào)控因子。

3.調(diào)控基因：是指那些編碼那些控制其他基因表達(dá)的RNA或蛋白質(zhì)的基因。調(diào)控基因的表達(dá)產(chǎn)物是調(diào)控因子。調(diào)控基因也是結(jié)構(gòu)基因，只是它的編碼蛋白質(zhì)具有基因調(diào)控的功能，是在基因水平上而不是蛋白質(zhì)水平上的控制。

4.反式作用因子：指真核細(xì)胞內(nèi)含有的大量可以通過直接或間接結(jié)合順式作用元件而調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)因子。　

5.誘導(dǎo)作用：原核生物以及低等真核生物中廣泛存在著一種機(jī)制，某些酶或一組酶的合成是對(duì)特定物質(zhì)作出的反應(yīng)，即所謂誘導(dǎo)作用。

6.正調(diào)控：與缺乏調(diào)控因子時(shí)作為比較，若調(diào)控因子使靶基因的表達(dá)水平上升，這種調(diào)控方式稱為正調(diào)控。

7.負(fù)調(diào)控：與缺乏調(diào)控因子時(shí)作為比較，若調(diào)控因子使靶基因的表達(dá)水平下降，甚至關(guān)閉，這種調(diào)控作用稱為負(fù)調(diào)控。

8.乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)：E.coli的乳糖操縱子是乳糖分解代謝的3個(gè)基因，lacZ編碼β半乳糖苷酶,lacY編碼β半乳糖透性酶,lacA編碼β半乳糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶構(gòu)成的一個(gè)典型的操縱子。

9.色氨酸操縱子的結(jié)構(gòu)：包括結(jié)構(gòu)基因(E、D、C、B、A)：分別編碼合成色氨酸途徑的酶或酶亞基。以及調(diào)控區(qū)域：阻遏基因（R）、啟動(dòng)子區(qū)（P）、操縱區(qū)（O）、前導(dǎo)肽編碼區(qū)（L），弱化子區(qū)（a）。

10.可阻遏型的負(fù)調(diào)控：調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物阻遏蛋白使trp操縱子關(guān)閉，這種作用稱為可阻遏型的負(fù)調(diào)控。它是某些氨基酸等生物合成酶類有關(guān)基因表達(dá)調(diào)控的基本形式。

11.弱化作用：是RNA聚合酶從啟動(dòng)子出發(fā)（開始轉(zhuǎn)錄）的轉(zhuǎn)錄受到衰減子的調(diào)控，也稱為衰減作用。

12.抗終止作用：抗終止因子pN和pQ依賴于基因內(nèi)特殊序列和特殊蛋白銀子的相互作用，影響RNA聚合酶對(duì)終止位點(diǎn)的識(shí)別功能，使RNA聚合酶在終止位點(diǎn)通讀，形成一個(gè)較長(zhǎng)的mRNA。pN和NusA蛋白如果作用于nut位點(diǎn)，就能引起抗終止作用。

2、思考題

1.乳糖操縱子的正負(fù)調(diào)控？

①阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控:◆當(dāng)細(xì)胞內(nèi)有誘導(dǎo)物時(shí)，誘導(dǎo)物結(jié)合阻遏蛋白，此刻聚合酶與啟動(dòng)子形成開放式啟動(dòng)子復(fù)合物轉(zhuǎn)錄乳糖操縱子結(jié)構(gòu)基因?！舢?dāng)無誘導(dǎo)物時(shí)，阻遏蛋白結(jié)合與啟動(dòng)子與蛋白質(zhì)部分重疊不轉(zhuǎn)錄。

②CAP正調(diào)控: ◆當(dāng)細(xì)胞內(nèi)缺少葡萄糖時(shí)ATP→CAMP結(jié)合，CRP生成CAP與CAP位點(diǎn)結(jié)合，增前RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄活性。◆當(dāng)有葡萄糖存在時(shí)CAMP分解多合成少，CAP不與啟動(dòng)子上的CAP位點(diǎn)結(jié)合RNA聚合酶不與操縱區(qū)結(jié)合無法起始轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu)基因表達(dá)下降。

2.前導(dǎo)肽序列的特點(diǎn)？

①前導(dǎo)序列某些區(qū)段富含GC，GC區(qū)段之間容易形成莖環(huán)二級(jí)結(jié)構(gòu)，接著有8個(gè)U的寡聚區(qū)段構(gòu)成一個(gè)不依賴于ρ因子的終止信號(hào)。

②除了這個(gè)終止信號(hào)的發(fā)夾結(jié)構(gòu)之外，由1區(qū)和2區(qū)序列構(gòu)成第二個(gè)發(fā)夾結(jié)構(gòu)。

③3區(qū)也可以與2區(qū)互補(bǔ)，形成另一個(gè)由2區(qū)和3區(qū)組成的發(fā)夾結(jié)構(gòu)。

④前導(dǎo)序列RNA中編碼了一段14個(gè)氨基酸的前導(dǎo)肽，在它的前面有5個(gè)核糖體的強(qiáng)結(jié)合位點(diǎn)，在編碼序列之后有一終止密碼子UGA。

⑤前導(dǎo)序列中并列兩個(gè)色氨酸密碼子。

3.原核生物時(shí)序表達(dá)在轉(zhuǎn)錄調(diào)控點(diǎn)的3種方式？

①幾種新的蛋白因子代替RNA聚合酶原來的σ因子，協(xié)助RNA聚合酶的核心酶識(shí)別新的啟動(dòng)子。

②合成新的RNA聚合酶，代替原有的酶，開動(dòng)一套新的啟動(dòng)子。

③合成新的調(diào)控因子，影響RNA聚合酶對(duì)轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)的行為。

4. λ噬菌體中DNA轉(zhuǎn)錄的3個(gè)階段？

①早期基因從P_L和P_R啟動(dòng)子開始；

②晚早期基因的轉(zhuǎn)錄；

③晚期基因的轉(zhuǎn)錄。

5.溶源化和裂解的命運(yùn)選擇？

6.CI基因在溶源化過程中自我調(diào)控？

①λ阻遏蛋白低濃度時(shí)，能促進(jìn)它自己的轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生更多的阻遏蛋白；

②高濃度的阻遏蛋白能抑制，關(guān)閉自己基因的轉(zhuǎn)錄；

③阻遏蛋白能阻遏Cro基因轉(zhuǎn)錄。C1阻遏蛋白在低濃度時(shí)，Cro轉(zhuǎn)錄有某些抑制作用；在高濃度時(shí)，Cro轉(zhuǎn)錄完全停止；在更高濃度時(shí)，C1嚴(yán)重受抑制。