微生物學習題
說明：本習題供校內(nèi)微生物學習參考。
各章分別由名詞解釋、習題兩部分組成，習題已給出答案。
第一章 緒論... 3一、術語或名詞... 3二、習 題... 3三、習題解答... 5第二章 微生物的純培養(yǎng)和顯微鏡技術... 6一、術語或名詞... 6二、習 題... 7三、習題解答... 9第三章 微生物細胞的結構與功能... 12一、術語或名詞... 12二、習 題... 14三、習題解答... 17第四章 微生物的營養(yǎng)... 18一、術語和名詞... 18二、習 題... 20三、習題解答... 22第五章 微生物代謝... 24一、術語或名詞... 24二、習 題... 25三、習題解答... 28第六章 微生物的生長繁殖及其控制... 30一、術語或名詞... 30二、習 題... 31三、習題解答... 33第七章 病毒... 35一、術語或名詞... 35二、習 題... 37三、習題解答... 39第8章 微生物的遺傳... 41一、術語及名詞... 41二、習 題... 43三、習題解答... 46第九章 基因表達調(diào)控... 47一、術語或名詞... 47二、習 題... 48三、習題解答... 50第十章 微生物與基因工程... 51一、術語或名詞... 51二、習 題... 51三、習題解答... 53第十一章 微生物的生態(tài)... 53一、術語或名詞... 53二、習題... 54三、習題解答... 55第十二章 微生物的進化、系統(tǒng)發(fā)育和分類鑒定... 56一、術語或名詞... 56二、習 題... 57三、習題解答... 58第十三章 微生物物種的多樣性... 59一、名詞及術語... 59二、習 題... 59三、習題答案... 60第十四章 感染與免疫... 62一、術語或名詞... 62二、習 題... 64三、習題解答... 66第十五章 微生物工業(yè)和產(chǎn)品... 68一、術語或名詞... 68二、習 題... 69三、習題解答... 72緒論
1．微生物(microorganism) 因太小，一般用肉眼看不清楚的生物。這些微小生物包括：無細胞結構不能獨立生活的病毒、亞病毒(類病毒、擬病毒、朊病毒)；具原核細胞結構的真細菌、古生菌以及具真核細胞結構的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、單細胞藻類、原生動物等。但其中也有少數(shù)成員是肉眼可見的。
2。微生物學(microbiology) 研究肉眼難以看清的稱之為微生物的生命活動的科學，分離和培養(yǎng)這些微小生物需要特殊技術。
3．分子微生物學(molecularmicrobiology) 在分子水平上研究微生物生命活動規(guī)律的科學。
4．細胞微生物學(cellularmicrobiology) 重點研究微生物與寄主細胞相互關系的科學。
5．微生物基因組學(microbic genomics) 研究微生物基因組的分子結構、信息含量及其編碼的基因產(chǎn)物的科學。
6．自生說(spontaneousgeneration) 一個古老的學說，認為一切生命有機體能夠從無生命的物質(zhì)自然發(fā)生的。
7。安東·列文虎克(AntonyvanLeeuwenhoek，1632—1723) 荷蘭商人，他是真正看見并描述微生物的第一人，他利用自制放大倍數(shù)為50～300倍的顯微鏡發(fā)現(xiàn)了微生物世界(當時被稱之為微小動物)，首次揭示了一個嶄新的生物世界——微生物界。
8．路易斯·巴斯德(LouisPasteur，1822—1895) 法國人，原為化學家，后來轉(zhuǎn)向微生物學研究領域，為微生物學的建立和發(fā)展做出了卓越的貢獻，成為微生物學的奠基人。主要貢獻：用曲頸瓶實驗徹底否定了“自生說”，從此建立了病原學說，推動了微生物學的發(fā)展；研究了雞霍亂，發(fā)現(xiàn)將病原菌減毒可誘發(fā)免疫性，以預防雞霍亂??；其后他又研究了牛、羊炭疽病和狂犬病，并首次制成狂犬疫苗，證實其免疫學說，為人類防病、治病做出了重大貢獻；分離到了許多引起發(fā)酵的微生物，并證實酒精發(fā)酵是由酵母菌引起的，也發(fā)現(xiàn)乳酸發(fā)酵、醋酸發(fā)酵和丁酸發(fā)酵都是不同細菌所引起的，為進一步研究微生物的生理生化和工業(yè)微生物學奠定了基礎。
9．羅伯特．柯赫(Robert Koch，1843—1910) 德國人，著名的細菌學家，曾經(jīng)是一名醫(yī)生，對病原細菌的研究做出了突出的貢獻：(1)具體證實了炭疽病菌是炭疽病的病原菌；(2)分離、培養(yǎng)了肺結核病的病原菌，這是當時死亡率極高的傳染性疾病，因此柯赫獲得了諾貝爾獎；(3)提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則——柯赫氏定律。他也是微生物學的奠基人。
10．伍連德(1879—1960) 我國廣東香山人，著名公共衛(wèi)生學家，我國海港檢疫創(chuàng)始人。他用微生物學理論和技術對鼠疫和霍亂的病原進行研究和防治，在中國最早建立起衛(wèi)生防疫機構，培養(yǎng)了第一支預防鼠疫的專業(yè)隊伍，在他的領導和組織下，有效地戰(zhàn)勝了1910—1911和1920—1921年間我國東北各地鼠疫的大流行，被國際上譽為著名的防疫專家，世界鼠疫會議1911年4月在我國沈陽舉行時，他任大會主席和中國首席代表。著有“論肺型鼠疫”、“鼠疫概論”和“中國醫(yī)史”等。
11。湯飛凡(1879—1958) 我國湖南醴陵人，著名的醫(yī)學微生物學家，在醫(yī)學細菌學、病毒學和免疫學等方面的某些領域做出·了顯著的貢獻，特別是首次應用雞胚卵黃囊接種法從病人的眼結膜刮屑物中分離、培養(yǎng)沙眼衣原體的成功，確證了沙眼衣原體的存在，為世界上首創(chuàng)，成為醫(yī)學微生物學方面的重大成果。
12。SARS Severe Acute Respiratory Syndrome的簡稱，嚴重急性呼吸道綜合征，即我國稱為的非典型肺炎，也簡稱為非典。
題
填空題
1．微生物與人類關系的重要性，你怎么強調(diào)都不過分，微生物是一把十分鋒利的雙刃劍，它們在給人類帶來 的同時也帶來 。
2．1347年的一場由 引起的瘟疫幾乎摧毀了整個歐洲，有1／3的人(約2 500萬人)死于這場災難。
3。2003年SARS在我國一些地區(qū)迅速蔓延，正常的生活和工作節(jié)奏嚴重地被打亂，這是因為SARS有很強的傳染性，它是由一種新型的 所引起。
4．微生物包括： 細胞結構不能獨立生活的病毒、亞病毒(類病毒、擬病毒、朊病毒)；具細胞結構的真細菌、古生菌；具 細胞結構的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、單細胞藻類、原生動物等。
5．著名微生物學家Roger Stranier提出，確定微生物領域不應只是根據(jù)微生物的大小，而且也應該根據(jù)有別于動、植物的 。
6．重點研究微生物與寄主細胞相互關系的新型學科領域，稱為 。
7．公元6世紀(北魏時期)，我國賈思勰的巨著“ ”詳細地記載了制曲、釀酒、制醬和釀醋等工藝。
8，19世紀中期，以法國的 和德國的 為代表的科學家，揭露了微生物是造成腐敗發(fā)酵和人畜疾病的原因，并建立了分離、培養(yǎng)、接種和滅菌等一系列獨特的微生物技術，從而奠定了微生物學的基礎，同時開辟了醫(yī)學和工業(yè)微生物學等分支學科。 和 是微生物學的奠基人。
9．20世紀中后期，由于微生物學的 、 等技術的滲透和應用的拓寬及發(fā)展，動、植物細胞也可以像微生物一樣在乎板或三角瓶中分離、培養(yǎng)和在發(fā)酵罐中進行生產(chǎn)。
10，目前已經(jīng)完成基因組測序的3大類微生物主要是 、 及 。而隨著基因組作圖測序方法的不斷進步與完善，基因組研究將成為一種常規(guī)的研究方法，為從本質(zhì)上認識微生物自身以及利用和改造微生物將產(chǎn)生質(zhì)的飛躍。
11．微生物從發(fā)現(xiàn)到現(xiàn)在的短短的300年間，特別是20世紀中期以后，已在人類的生活和生產(chǎn)實踐中得到廣泛的應用，并形成了繼動、植物兩大生物產(chǎn)業(yè)后的 。
選擇題(4個答案選1)
1．當今，一種新的瘟疫正在全球蔓延，它是由病毒引起的( )。
(1)鼠疫 (2)天花 (3)艾滋病(AIDS) (4)霍亂
2．微生物在整個生物界的分類地位，無論是五界系統(tǒng)，還是三域(domain)系統(tǒng)，微生物都占據(jù)了( )的“席位”。
(1)少數(shù) (2)非常少數(shù) (3)不太多 (4)絕大多數(shù)
3，微生物學的不斷發(fā)展，已形成了基礎微生物學和應用微生物學，它又可分為( )的分支學科。
(1)幾個不同 (2)少數(shù)有差別 (3)許多不同 (4)4個不同
4．公元9世紀到10世紀我國已發(fā)明( )。
(1)曲蘗釀酒 (2)用鼻苗法種痘 (3)烘制面包 (4)釀制果酒
5．安東·列文虎克制造的顯微鏡放大倍數(shù)為( )倍，利用這種顯微鏡，他清楚地看見了細菌和原生動物。
(1)50—300 (2)10左右 (3)2—20 (4)500～1 000
6．據(jù)有關統(tǒng)計表明，20世紀諾貝爾獎的生理學或醫(yī)學獎獲得者中，從事微生物問題研究的就占了( ) 。
(1)1／10 (2)2／3 (3)1／20 (4)1／3
7，巴斯德為了否定“自生說”，他在前人工作的基礎上，進行了許多試驗，其中著名的( )無可辯駁地證實：空氣中確實含有微生物，它們引起有機質(zhì)的腐敗。
(1)厭氧試驗 (2)滅菌試驗 (3)曲頸瓶試驗 (4)菌種分離試驗
8．柯赫提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則——( )。
’(1)巴斯德原則 (2)柯赫原則 (3)菌種原則 (4)免疫原理
9．微生物基因組序列分析表明，在某些微生物中存在一些與人類某些遺傳疾病相類似的基因，因此可以利用這些微生物作為( )來研究這些基因的功能，為認識龐大的人類基因組及其功能做出重要貢獻。
(1)模式生物 (2)受體 (3)供體 (4)突變材料
10．我國學者湯飛凡教授的( )分離和確證的研究成果，是一項具有國際領先水平的開創(chuàng)性成果。
(1)鼠疫桿菌 (2)沙眼病原體 (3)結核桿菌 (4)天花病毒
是非題
1．微生物是人類生存環(huán)境中必不可少的成員，有了它們才使得地球上的物質(zhì)進行循環(huán)，否則地球上的所有生命將無法繁衍下去。
2．由于現(xiàn)代生物技術的應用，尤其是基因治療和基因工程藥物的產(chǎn)生，許多已被征服的傳染病，例如：肺結核、瘧疾、霍亂、天花等，不可能有“卷土重來”之勢。
3．當今研究表明：所有的細菌都是肉眼看不見的。
4．微生物學家要獲得微生物的純種，通常要首先從微生物群體中分離出所需的純種，然后還要進行培養(yǎng)，因此研究微生物一般要使用特殊的技術，例如：消毒滅菌和培養(yǎng)基的應用等，這也是微生物學有別于動、植物學的。
5．巴斯德不僅用曲頸瓶實驗證明微生物非自然發(fā)生，推翻了爭論已久的“自生說”，而且做了許多其他重大貢獻，例如：證明乳酸發(fā)酵是由微生物引起的，首次制成狂犬疫苗，建立了巴氏消毒法等。
6．細菌學、真菌學、病毒學、原生動物學、微生物分類學、發(fā)酵工程、細胞工程、遺傳工程、基因工 程、工業(yè)微生物學、土壤微生物學、植物病理學、醫(yī)學微生物學及免疫學等，都是微生物學的分支學科。
7．微生物學的建立雖然比高等動、植物學晚，但發(fā)展卻十分迅速，其重要原因之一，動、植物結構的復雜性及技術方法的限制而相對發(fā)展緩慢，特別是人類遺傳學的限制大。
8．微生物學與迅速發(fā)展起來的分子生物學理論和技術以及其他學科匯合，使微生物學全面進入分子研究水平，并產(chǎn)生了其分支學科“分子微生物學”。
9．在基因工程的帶動下，傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵工業(yè)已從多方面發(fā)生了質(zhì)的變化，成為現(xiàn)代生物技術的重要組成部分。
10．DNA重組技術和遺傳工程的出現(xiàn)，才導致了微生物學的許多重大發(fā)現(xiàn)，包括質(zhì)粒載體，限制性內(nèi)切酶、連接酶、反轉(zhuǎn)錄酶等。
11．微生物個體小、結構簡單、生長周期短，易大量繁殖，易變異等特性，因而與動、植相比，十分難于實驗操作。
12．現(xiàn)在，微生物學研究的不可替代性，并將更加蓬勃發(fā)展，這是因為微生物具有其他生物不具備的生物學特性；又具有其他生物共有的基本生物學特性，及其廣泛的應用性。
問答題
1．用具體事例說明人類與微生物的關系。
2．為什么說巴斯德和柯赫是微生物學的奠基人?
3．為什么微生物學比動、植物學起步晚，但卻發(fā)展非常迅速?
4．簡述微生物學在生命科學發(fā)展中的地位。
5．試述微生物學的發(fā)展前景
填空題
1．巨大利益 “殘忍”的破壞 2．鼠疫桿菌 3．病毒 4．無 原核 真核 5．研究技術 6．細胞微生物學 7．齊民要術 8．巴斯德 柯赫 巴斯德 柯赫 9．消毒滅菌分離培養(yǎng) 10．模式微生物 特殊微生物 醫(yī)用微生物 11．第三大產(chǎn)業(yè)
選擇題 1． (3) 2． (4) 3． (3) 4． (4) 5． (1) 6． (4) 7． (3) 8． (2) 9． (1) 10． (2)
是非題 1． + 2。 - 3． - 4． + 5． + 6． 一 7． + 8． + 9． + 10． - 11． - 12． +
問答題
1．微生物與人類關系的重要性，可以從它們在給人類帶來巨大利益的同時也可能帶來極大的危害兩方面進行分析。能夠例舉：面包、奶酪、啤酒、抗生素、疫苗、維生素及酶等重要產(chǎn)品的生產(chǎn)；微生物使得地球上的物質(zhì)進行循環(huán)，是人類生存環(huán)境中必不可少的成員；過去瘟疫的流行，現(xiàn)在一些病原體正在全球蔓延，許多已被征服的傳染病也有“卷土重來”之勢；食品的腐敗等等具體事例說明。
2．這是由于巴斯德和柯赫為微生物學的建立和發(fā)展做出了卓越的貢獻，使微生物學作為一門獨立 的學科開始形成。巴斯德徹底否定了“自然發(fā)生”學說；發(fā)現(xiàn)將病原菌減毒可誘發(fā)免疫性，首次制成狂犬疫苗，進行預防接種；證實發(fā)酵是由微生物引起的；創(chuàng)立巴斯德消毒法等。柯赫對病原細菌的研究做出了突出的成就：證實了炭疽病菌是炭疽病的病原菌，發(fā)現(xiàn)了肺結核病的病原菌，提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則——柯赫原則，創(chuàng)建了分離、純化微生物的技術等。
3．其原因從下列幾方面分析：微生物具有其他生物不具備的生物學特性；微生物具有其他生物共有的基本生物學特性；微生物個體小、結構簡單、生長周期短，易大量培養(yǎng)，易變異，重復性強等優(yōu)勢，十分易于操作。動、植物由于結構的復雜性及技術方法的限制而相對發(fā)展緩慢。微生物的廣泛的應用性，能迅速地符合現(xiàn)代學科、社會和經(jīng)濟發(fā)展的需求。
4．20世紀40年代，隨著生物學的發(fā)展，許多生物學難以解決的理論和技術問題十分突出，特別是 遺傳學上的爭論問題，使得微生物這樣一種簡單而又具完整生命活動的小生物成了生物學研究的“明星”。微生物學很快與生物學主流匯合，并被推到了整個生命科學發(fā)展的前沿，獲得了迅 速的發(fā)展，為整個生命科學的發(fā)展做出了巨大的貢獻(可舉例說明)，在生命科學的發(fā)展中占有重要的地位。
5．可從以下幾方面論述微生物學的發(fā)展前量景：微生物基因組學研究將全面展開；以了解微生物之間、微生物與其他生物、微生物與環(huán)境的相互作用為研究內(nèi)容的微生物生態(tài)學、環(huán)境微生物學、細胞微生物學等，將在基因組信息的基礎上獲得長足發(fā)展，為人類的生存和健康發(fā)揮積極的作用；微生物生命現(xiàn)象的特性和共性將更加受到重視；與其他學科實現(xiàn)更廣泛的交叉，獲得新的發(fā)展；微生物產(chǎn)業(yè)將呈現(xiàn)全新的局面。培養(yǎng)物能較好地被研究、利用和重復結果。
微生物的純培養(yǎng)和顯微鏡技術
1．菌落(c010ny) 單個微生物細胞在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到——定程度形成的肉眼可見的、有一定形態(tài)結構的子細胞生長群體。
2．菌苔(lawn) 固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片時所形成的微生物生長群體。
3．平皿(Petri dish) 由玻璃或透明塑料制成的圓形皿底和皿蓋組成，皿蓋可覆蓋于皿底之 上，防止空氣中微生物的污染。其英文名稱是為紀念其發(fā)明者Richard Petri。
4．純培養(yǎng)物(pureculture) 由一種微生物組成的細胞群體，通常是由一個單細胞生長、繁殖所形成。
5．培養(yǎng)基(culturemedium) 供微生物生長、繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，根據(jù)其中固化劑含量的不同可分為固體、半固體、液體3種。
6。無菌技術(aseptic technique) 在分離、轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)純種微生物時，防止其被環(huán)境中微生物污染或其自身污染環(huán)境的技術。
7．培養(yǎng)平板(cultureplate) 常簡稱為平板，指固體培養(yǎng)基倒人無菌平皿，冷卻凝固后所形成的培養(yǎng)基平面。
8．稀釋倒平板法(pour plate method) 將待分離的材料稀釋后與已熔化并冷卻至50℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后制成可能含菌的培養(yǎng)平板，保溫培養(yǎng)后分離得到的微生物菌落生長在固體培養(yǎng)基表面和里面。
9。涂布平板法(spread plate method) 在培養(yǎng)平板表面均勻涂布經(jīng)過稀釋的微生物懸液后，保溫培養(yǎng)，在固體培養(yǎng)基表面得到生長分離的微生物菌落。
10．平板劃線法(streakplatemethod) 用接種環(huán)在培養(yǎng)平板表面劃線接種微生物，使微生物細胞數(shù)量隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分開。保溫培養(yǎng)后，在固體培養(yǎng)基表面得到生長分離的微生物菌落。
11．稀釋搖管法(dilutionshakeculturemethod) 將待分離的材料稀釋后與已熔化并冷卻至
50~C左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后用石蠟封蓋，保溫培養(yǎng)后分離得到的微生物菌落生長在瓊脂柱中間。
12．單細胞分離法(singlecellpickupmethod) 采用顯微操作技術直接挑取微生物的單細胞(孢子)，培養(yǎng)后獲得純培養(yǎng)物。
13．富集培養(yǎng)(enrichmentculture) 利用不同微生物間生命活動特點的不同，制定特定的環(huán)境條件，使僅適應于該條件的微生物旺盛生長，從而使其在群落中的數(shù)量大大增加，從自然界中分離到所需的特定微生物。
14．二元培養(yǎng)物(two—componentculture) 由兩種具有特定關系(例如寄生或捕食)的微生 物組成的混合培養(yǎng)物。
15．原子力顯微鏡(atomicforcemicroscope) 掃描探針顯微鏡的一種，利用細小的探針對樣品表面進行恒定高度的掃描，同時通過一個激光裝置來監(jiān)測探針隨樣品表面的升降變化來獲取樣品表面形貌的信息。
16. 明視野顯微鏡(bright—field microscope) 這種顯微鏡的照明方式為透射照明，即光線直接進入視野，在一個相對明亮的背景中形成一個暗的物像。
17．聚焦掃描激光顯微鏡(confocal scanning laser microscope，CSLM) 這種顯微鏡采用激光作為光源，每次僅對一個點進行照射，從而大大減少樣品其他部分發(fā)出的雜散光的干擾。觀察時通過激光器或載物臺掃描，計算機處理，最終獲得反差鮮明、高分辨率的三維立體數(shù)字圖像。
18．熒光顯微鏡(fluorescence microscope) 這種顯微鏡用紫外線或藍紫光照射經(jīng)過熒光染料染色的樣品，然后觀察激發(fā)出的熒光所形成的物像。
19．數(shù)值孔徑(numerical aperture) 決定顯微鏡物鏡分辨率性能物理指標，取決于物鏡的鏡口角和玻片與鏡頭間介質(zhì)的折射率。
20．相差顯微鏡(phase—contrast microscope) 這種光學顯微鏡通過特殊的裝置把樣品不同部位間折射率和細胞密度的微弱差異轉(zhuǎn)變?yōu)槿搜劭梢圆煊X的明暗差，可在不染色的情況下對透明的活細胞及其內(nèi)部結構進行直接觀察。
21．分辨率(resolution) 能辨析兩點之間最小距離的能力，距離越小，分辨率越高。
22．掃描電子顯微鏡(scanning electron microscope，SEM) 這種電子顯微鏡用電子束掃描樣品表面，收集從表面發(fā)出的二次電子形成樣品的表面圖像。
23．掃描探針顯微鏡(scanning probe microscope) 通過在物體表面移動一種敏銳的探針來研究表面特征的顯微鏡(如掃描隧道顯微鏡)。
24．掃描隧道顯微鏡(scanning tunnelingmicroscope) 掃描探針顯微鏡的一種，用細小的探針在樣品表面進行掃描，通過檢測針尖和樣品間隧道效應電流的變化形成物像。
25．透射電子顯微鏡(transmissionelectronmicroscope) 這種顯微鏡用電子束透射樣品，用磁透鏡使散射的電子聚焦成像。
26．反差(contrast) 被觀察物區(qū)別于背景的程度。
27．暗視野顯微鏡(dark—field microscope) 這種顯微鏡利用特殊的聚光器進行斜射照明，經(jīng)樣品反射或折射的光線進入物鏡成像。
28．固定(fixation) 制樣過程中使整個機體及其細胞的內(nèi)、外結構被保存并固定在適當位置的過程。
29．負染色(negative staining) 染料使背景顏色加深而樣品沒有著色的染色法。
30．菌絲體(mycelium) 聚成一團的分支菌絲，見于真菌和某些細菌。
31．菌絲(hypha) 大多數(shù)霉菌和某些細菌的結構單位，管形絲狀體。
32．雙球菌(diplococcus) 分裂后成對排列的球菌。
33．球菌(COCCUS) 細胞大致呈球狀的細菌。
34．螺菌(spirillum) 剛性的螺旋狀細菌。
35．螺旋體(spirochete) 柔韌的螺旋狀細菌，具有周質(zhì)鞭毛。
36．桿菌(rod) 細胞呈桿狀的細菌。
37．柄細菌(prosthecate bacteria) 細胞上有柄、菌絲、附器等細胞質(zhì)伸出物，細胞呈桿狀或梭狀，并有特征性細柄的細菌。
38．霉菌(mold) 以多細胞絲狀群體形式生存的真菌。
39．真菌(fungi) 有線粒體，無葉綠體，沒有根、莖、葉分化，以無性和有性孢子進行繁殖的真核微生物。
40．酵母菌(yeast) 單細胞真菌。
41．藻類(algae) 能進行光合作用的真核微生物。
42．原生動物(prokaryote) 缺少真正細胞壁，具有運動能力，進行吞噬營養(yǎng)的單細胞真核微生物。
題
填空題
1．動植物的研究能以 體為單位進行，而對微生物的研究一般用——體。
2．在微生物學中，在人為規(guī)定的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體稱為培養(yǎng)物，其中只有
3．一般情況下，培養(yǎng)微生物的器具，在使用前必須先行 ，使容器中不含 。
4．用培養(yǎng)平板進行微生物純培養(yǎng)分離的方法包括： 、 和 。
5．微生物在特定培養(yǎng)基上生長形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征，可以成為對該微生物進行 、 的重要依據(jù)。
6．微生物保藏的目標就是要使所保藏菌株在一段時間不 、不 和不 。
7．一般說來，采用冷凍法時，保藏溫度越 ，保藏效果越 。
8, 、 和 是影響顯微鏡觀察效果的3個重要因素。
9．光學顯微鏡能達到的最大有效放大倍數(shù)是 ，這時一般使用 X的目鏡，和 x的物鏡，并應在物鏡鏡頭和玻片之間加 。
10．采用明視野顯微鏡觀察未經(jīng)染色的標本(如活的細胞)時， 光的 和 都沒 有明顯的變化，因此，其形態(tài)和內(nèi)部結構往往難以分辨。
11．在 的照射下，發(fā)熒光的物體會在黑暗的背景下表現(xiàn)為光亮的有色物體，這就是熒光顯微技術的原理。
12．透射電子顯微鏡用電子作為 ，因此其分辨率較光學顯微鏡有很大提高，但鏡筒必須是 環(huán)境，形成的影像也只能通過 或 進行觀察、記錄。
13．在顯微鏡下不同細菌的形態(tài)可以說是千差萬別，豐富多彩，但就單個有機體而言，其基本形態(tài)可分為 、 與 3種。
14．霉菌菌體均由分支或不分支的菌絲構成。許多菌絲交織在一起，稱為 。在固體培 養(yǎng)基上，部分菌絲伸入培養(yǎng)基內(nèi)吸收養(yǎng)料，稱為 ；另一部分則向空中生長，稱為 。有的氣生菌絲發(fā)育到一定階段，分化成 。
15． 是一類缺少真正細胞壁，細胞通常無色，具有運動能力，并進行吞噬營養(yǎng)的單細胞真核生物。它們個體微小，大多數(shù)都需要顯微鏡才能看見。
選擇題／4個答案選1／／
1．培養(yǎng)微生物的常用器具中，( )是專為培養(yǎng)微生物設計的。
(1)平皿 (2)試管 (3)燒瓶 (4)燒杯
2．( )可用來分離培養(yǎng)出由科學家設計的特定環(huán)境中能生長的微生物，盡管我們并不知道什么微生物能在這種特定的環(huán)境中生長。
(1)選擇平板 (2)富集培養(yǎng) (3)稀釋涂布 (4)單細胞顯微分離
3．下面哪一項不屬于稀釋倒平板法的缺點?( )
(1)菌落有時分布不夠均勻 (2)熱敏感菌易被燙死 (3)嚴格好氧菌因被固定在培養(yǎng)基中生長受到影響 (4)環(huán)境溫度低時不易操作
4．下面哪一種方法一般不被用作傳代保藏?( )
(1)瓊脂斜面 (2)半固體瓊脂柱 (3)培養(yǎng)平板 (4)搖瓶發(fā)酵
5．冷凍真空干燥法可以長期保藏微生物的原因是微生物處于( )的環(huán)境，代謝水平大大降低。
(1)干燥、缺氧、寡營養(yǎng) (2)低溫、干燥、缺氧 (3)低溫、缺氧、寡營養(yǎng) (4)低溫、干燥、寡營養(yǎng)
6．對光學顯微鏡觀察效果影響最大的是( )。 (1)目鏡 (2)物鏡 (3)聚光器 (4)總放大倍數(shù)
7．暗視野顯微鏡和明視野顯微鏡的區(qū)別在于( )。
(1)目鏡 (2)物鏡 (3)聚光器 (4)樣品制備
8．相差顯微鏡使人們能在不染色的情況下，比較清楚地觀察到在普通光學顯微鏡和暗視野顯微鏡下都看不到或看不清的活細胞及細胞內(nèi)的某些細微結構，是因為它改變了樣品不同部位間光的( )，使人眼可以察覺。
(1)波長 (2)顏色 (3)相位 (4)振幅
9．( )不是鑒別染色。
(1)抗酸性染色 (2)革蘭氏染色 (3)活菌染色 (4)芽孢染色
10．細菌的下列哪項特性一般不用作對細菌進行分類、鑒定?( )
(1)球菌的直徑 (2)球菌的分裂及排列 (3)桿菌的直徑 (4)桿菌的分裂及排列
是非題
1．為了防止雜菌，特別是空氣中的雜菌污染，試管及玻璃燒瓶都需采用適宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各種金屬、塑料及硅膠帽，并在使用前進行高溫干熱滅菌。
2，所有的微生物都能在固體培養(yǎng)基上生長，因此，用固體培養(yǎng)基分離微生物的純培養(yǎng)是最重要的微生物學實驗技術。
3．所有的培養(yǎng)基都是選擇性培養(yǎng)基。
4．直接挑取在平板上形成的單菌落就可以獲得微生物的純培養(yǎng)。
5．用稀釋搖管法分離獲得的微生物均為厭氧微生物。
6．冷凍真空干燥保藏、液氮保藏法是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法，大多數(shù)專業(yè)的菌種保藏機構均采用這兩種方法作為主要的微生物保存手段。
7．光學顯微鏡的分辨率與介質(zhì)折射率有關，由于香柏油的介質(zhì)折射率(約1．5)高于空氣(1．0)， 因此，使用油鏡的觀察效果好于高倍鏡，目前科學家正在尋找折射率比香柏油更高的介質(zhì)以進一步改善光學顯微鏡的觀察效果。
8．與其他電子顯微鏡相比，掃描隧道顯微鏡在技術上的最大突破是能對活樣品進行觀察。
9．與光學顯微鏡相比，電子顯微鏡的分辨率雖然有很大的提高，但卻無法拍攝彩色照片。
10．和動植物一樣，細菌細胞也會經(jīng)歷由小長大的過程，因此，在相同情況下應選擇成熟的細菌而非幼齡細菌進行顯微鏡觀察，這樣可以看得更清楚。
11．霉菌、酵母菌均是沒有分類學意義的普通名稱。
問答題
1．一般說來，嚴格的無菌操作是一切微生物工作的基本要求，但在分離與培養(yǎng)極端嗜鹽菌時常在沒有點酒精燈的普通實驗臺上傾倒培養(yǎng)平板、在日常環(huán)境中直接打開皿蓋觀察和挑取菌落，而其研究結果并沒有因此受到影響，你知道這是為什么嗎?
2．如果希望從環(huán)境中分離得到厭氧固氮菌，你該如何設計實驗?
3，為什么光學顯微鏡的目鏡通常都是15X?是否可以采用更大放大倍率的目鏡(如30x)來進 一步提高顯微鏡的總放大倍數(shù)?
4．為什么透射電鏡和掃描電鏡對樣品厚度與大小的要求有如此大的差異?能否用掃描電鏡來觀察樣品的內(nèi)部結構，而用透射電鏡來觀察樣品的表面結構?
5．試論電子顯微鏡在進行生物樣品制備與觀察時應注意的問題。
6．對細菌的細胞形態(tài)進行觀察和描述時應注意哪些方面?你是否能很快地在顯微鏡下區(qū)分同為單細胞的細菌、酵母菌和原生動物?
填空題 1．個 群 2．純 3。滅菌 任何生物 4．稀釋倒平板法 涂布平板法 平板劃線法 5．分類 鑒定 6．死亡 污染 變異 7．低(高) 好(差) 8．放大 反差 分辨率 9．1 000～1 500x 10或15 90或100 香柏油 10．’波長 振幅 11．紫外線 12．光源 真空 熒光屏 照片 13．球狀 桿狀 螺旋狀 14．菌絲體 營養(yǎng)菌絲 氣生菌絲 繁殖菌絲 15．原生動物
選擇題 1． (1) 2． (2) 3． (1) 4． (4) 5． (2) 6． (2) 7． (3) 8． (4) 9． (3) 10． (4)
是非題
1． - 2． - 3． + 4。 - 5． - 6． +
7． - 8． + 9． + 10． - 11． +
問答題
1．培養(yǎng)極端嗜鹽菌的培養(yǎng)平板需要添加很高濃度的氯化鈉(25％)，實驗室環(huán)境中的一般微生物都不能在這種選擇培養(yǎng)基上生長，因此在實驗過程中即使不采取無菌操作技術，實驗結果仍不會受到影響。
2．(1)根據(jù)選擇分離的原理設計不含氮的培養(yǎng)基，在這種培養(yǎng)基上生長的細菌，其氮素應來自固氮作用。(2)將環(huán)境樣品(例如土樣)稀釋涂布到選擇平板上，放置于厭氧罐中。對厭氧罐采用物理、化學方法除去氧氣，保留氮氣。培養(yǎng)后在乎板上生長出來的細菌應是厭氧固氮菌或兼性厭氧固氮菌。(3)挑取一定數(shù)量的菌落，對應點種到兩塊缺氮的選擇平板上，分別放置于厭氧罐內(nèi)、外保溫培養(yǎng)。在厭氧罐內(nèi)外均能生長的為兼性厭氧固氮菌，而在厭氧罐外的平板上不生長，在厭氧罐內(nèi)的平板上生長的即為可能的厭氧固氮菌。(4)對分離得到的厭氧固氮菌菌落樣品進行系列稀釋，涂布于相應的選擇平板，重復上述步驟直到獲得厭氧固氮菌的純培養(yǎng)。
3．光學顯微鏡的分辨率受到光源波長及物鏡性能的限制，在使用最短波長的可見光(4．50nnl)作為光源時在油鏡下可以達到的最大分辨率為0．18 μm。由于肉眼的正常分辨能力一般為 0．25mm左右，因此光學顯微鏡有效的最高總放大倍數(shù)只能達到1 000～1 500倍。油鏡的放大倍數(shù)是100x，因此顯微鏡配置的目鏡通常都是15 x，選用更大放大倍數(shù)的目鏡(如30 x)進一步提高顯微鏡的放大能力對觀察效果的改善并無幫助。
4．(1)透射電子顯微鏡的成像原理類似于普通光學顯微鏡，作為光源的電子束在成像時要穿透樣品。由于電子束的穿透力有限，因此在進行透射電鏡觀察時要求樣品一定要薄。而掃描電鏡的成像原理類似于電視或電傳真照片，圖像是通過收集樣品表面被激發(fā)的二次電子形成的，因此對樣品的厚度并無特別的要求。(2)掃描電鏡一般被用于觀察樣品的表面結構，但通過樣品制備過程中的冰凍蝕刻技術，用掃描電鏡也可觀察到樣品的內(nèi)部結構，獲得立體的圖像。(3)透射電鏡一般通過超薄切片技術觀察樣品的內(nèi)部結構，但通過樣品制備過程中的復型技術，用透射電鏡也可對樣品的表面結構進行觀察。
5．(1)電子束的穿透能力：電子束的穿透能力是十分有限的，超薄切片是基本的透射電鏡實驗技術。相比之下，掃描電鏡對樣品的大小和厚度沒有嚴格的要求。(2)生物組織的特點：生物組織的主要成分之一是水，若生物樣品不經(jīng)處理直接放進電鏡，鏡筒中的高真空必然會使樣品發(fā)生嚴重的脫水現(xiàn)象，失去樣品原有的空間構型，所以一般都不能用電鏡進行生物樣品的活體觀察。而且，由于生物樣品很容易遭到破壞，在對樣品進行固定、干燥、染色及其他一些處理過程中，也必須隨時注意使樣品盡量保持生活狀態(tài)下的精細結構，而不嚴重失真。另外，在掃描電鏡的使用中，除要求樣品干燥外，還需要樣品具一定的導電能力，以減少樣品表面電荷的堆積并得到良好的二次電子信號。而生物樣品一般都是不導電的，所以在制備掃描電鏡生物樣品時，一般需在其表面鍍上一層金屬薄膜。(3)增加樣品的反差：顯微觀察時，只有樣品具有一定的反差，才能得到清晰的圖像。光學顯微鏡可以通過各種染色技術來增加樣品的反差，并得到彩色的樣品圖像。而在電鏡的使用中，彩色染料是不采用的，因為兩種不同的顏色在電鏡中是不能區(qū)別的。電鏡中生物樣品不同結構之間反差的取得一般是用重金屬鹽染色或噴鍍，凡是嗜金屬的結構，對電子的散射與吸收的能力增強，易于形成明暗清晰的電子圖像。而且，由于電子圖像是靠不同電子密度形成的亮度差異而構成，所以，電鏡得到的電視或照相圖像都是黑白的。
6．(1)首先應使用稀釋涂布等方法對待檢菌株的純度、群落形態(tài)、生理特性等進行檢查、確認。(2)選用正常的新鮮培養(yǎng)基和新鮮培養(yǎng)物進行培養(yǎng)和觀察，避免培養(yǎng)過程中一些物理、化學條件的改變或培養(yǎng)時間過長等因素對細胞形態(tài)的影響。(3)報告細胞大小時應選用多個細胞檢測的平均數(shù)，并記錄所用的實驗方法，包括培養(yǎng)條件、培養(yǎng)時間、樣品制備方法和染色方法等。(4)可從大小和形態(tài)上對細菌、酵母菌和原生動物進行區(qū)分。酵母菌、原生動物個體較大，一般可用低倍鏡觀察，酵母菌細胞一般呈卵圓形、圓形、圓柱形或檸檬形，不具運動性，原生動物細胞形態(tài)多變，能夠運動。相比較而言，細菌細胞一般較小，需用高倍鏡或油鏡才能看清。
附：顯微鏡種類比較
顯微鏡類型
基本原理及特點
應 用
光學顯
微鏡
明視野顯微鏡
光線透射照明，物像處于亮背景中。為光學顯
微鏡的最基本配置，價格便宜、容易使用
各種情況下染色樣品或活細胞個體形態(tài)的觀察
暗視野顯微鏡
通過特殊的聚光器實現(xiàn)斜射照明，亮物像形成
于暗背景中
明視野顯微鏡下不易看清的活細胞的觀察；不易被染色或易被染色過程破壞的細胞的觀察(例如對梅毒密螺旋體的檢測)；觀察活細胞的運動性
相差顯微鏡
通過特殊的聚光器和物鏡提高樣品不同部位
間的反差(明暗差異)
活細胞及其內(nèi)部結構的觀察
熒光顯微鏡
經(jīng)熒光染料染色或熒光抗體處理的樣品在紫外線照射下激發(fā)出各種波長的可見光，在黑暗
的背景中形成明亮的彩色物像
環(huán)境微生物的直接觀察；病灶或醫(yī)學樣品中特定病原微生物的直接檢測(使用特定的熒光抗體)
共聚焦顯微鏡
激光作為光源，每次照明樣品的一個點，連續(xù)
掃描后經(jīng)計算機處理獲得樣品的二維或三維
圖像。顯微鏡價格昂貴
對完整細胞的細微立體結構進行觀察
和分析
電子顯微鏡
透射電鏡
用電子束作為“光源”聚焦成像，分辨率較光學顯微鏡大大提高。儀器龐大、昂貴、對工作環(huán)境和操作技術有較高要求
對病毒顆?；虺∑幚砗髮毎?div style="height:15px;">
有內(nèi)外兩層膜。內(nèi)膜可形成嵴，其上有大量的基粒(ATP酶復合體)?；|(zhì)內(nèi)含TCA酶系、70S核糖體和雙鏈環(huán)狀DNA
由內(nèi)、外兩層膜以及類囊體和基質(zhì)構成?；|(zhì)內(nèi)含70 S核糖體和雙鏈環(huán)狀DNA等。類囊體數(shù)量多，常疊成基粒
