凝血酶原時間（PT）測定和膽堿酯酶（ChE）活力檢測各有什么臨床意義？凝血酶原是由肝臟合成的一種蛋白質(zhì)。凝血酶原試驗是一種了解血液凝固情況的試驗，它可以反映肝臟的凝血功能。凝血酶原時間（PT）和凝血因子Ⅰ、Ⅴ、Ⅶ和Ⅹ有關(guān)，而這些因子也均在肝臟合成。凝血酶原時間的正常值為11～15秒（奎氏法）。當肝臟出現(xiàn)病變、肝功能不良、上述凝血因子因合成障礙而含量降低時，即可引起凝血酶原時間延長而發(fā)生凝血障礙。如重型肝炎時，凝血酶原時間明顯延長，患者容易出血，預(yù)后較差；慢性活動性肝炎與肝硬變時，凝血酶原時間可輕度延長；肝外阻塞而無明顯肝細胞損害時，凝血酶原時間可正常。長期肝外阻塞、膽汁淤積、影響維生素K的吸收時，也可導(dǎo)致凝血酶原時間延長；若給患者注射維生素K時，則凝血酶原時間可恢復(fù)正常。此外, 由于凝血酶原半衰期短，在急性重型肝炎發(fā)病后的短時間內(nèi)即有凝血酶原時間的改變，故測定凝血酶原時間，對重型肝炎的診斷，病情和預(yù)后的判定，具有重要的臨床意義。血清膽堿酯酶，又稱“假性”或“非特異性”膽堿酯酶，是由肝臟合成的一種特異性較差的，既可作用于乙酰膽堿，又能作用于其他膽堿酯類的酶。其正常值為0.80～1.00或40單位以上。由于血清膽堿酯酶的半衰期短，所以它是肝內(nèi)損害時的一種極為敏感的、反映肝臟酶合成障礙的試驗。其活性降低的程度往往與肝病的嚴重程度相一致。如重型肝炎患者膽堿酯酶活性值一般都較正常降低，且降低程度與病情輕重密切相關(guān)；約80％的病人，其血清膽堿酯酶活性可降至正常值的60％，重危病人甚至下降至10％以下，此類患者多很快死亡。因此，血清膽堿酯酶活性的測定，有助于對重型肝炎的診斷及對病情和預(yù)后的判定。此外，重度慢性肝炎和晚期肝硬變患者，血清膽堿酯酶亦有不同程度的降低。血栓與止血實驗室檢查的臨床重要性與日俱增，檢驗內(nèi)容不斷擴大，工作量也日益增多；不斷出現(xiàn)的方法更新和試劑商品化、操作自動化，改變了以往靠手工操作、自配試劑、工作效率低的局面。與此同時，方法標準化和質(zhì)量控制也顯得格外重要。然而，由于血栓與止血試驗的特殊性 ......有關(guān)（凝血酶原時間（PT）、活化的部分凝血活酶時間（APTT）和纖維蛋白原(FIB)測定等三項實驗）摘要：對ICSH、ICTH或美國國家臨床生物化學(xué)委員會（NCCLS）等國際以文件形式公布的有關(guān)凝血酶原時間（PT）、活化的部分凝血活酶時間（APTT）和纖維蛋白原測定等三項實驗的標準化及其重要性作了簡單敘述。關(guān)鍵詞： 凝血酶原時間 活化的部分凝血活酶時間 纖維蛋白原 標準化由于血栓與止血實驗的特殊性，因此迄今僅有凝血酶原時間（prothrombin time,PT）、活化的部分凝血酶時間（activated partial thromboplastin time,APTT）和纖維蛋白原（fibrinogen,Fg）等三項實驗有了標準化的試劑（如PT）、標準品（如Fg）、質(zhì)控品和統(tǒng)一的報告形式等；其他，如血小板功能、抗凝因子和纖溶成分等檢測尚缺乏成熟的標準化方案。本文僅就經(jīng)國際血液學(xué)標準化委員會（ICSH）國際血栓與止血委員會（ICTH）或美國國家臨床生物化學(xué)標準委員會（NCCLS）等國際組織以文件形式公布的有關(guān)PT、APTT和Fg三項實驗的標準化問題作一簡介。一、標準化和質(zhì)量控制的重要性所謂血栓與止血檢測方法的標準化和質(zhì)量控制，是指采用統(tǒng)計學(xué)原理，運用規(guī)范的物理、化學(xué)、生物學(xué)的方法，對血栓與止血實驗的技術(shù)、操作、儀器、試劑和標本等項的質(zhì)量水平，進行合理的管理、檢測和評價，以標準化和質(zhì)量控制來堵絕誤差，提高實驗的精密度、準確性和可靠性。標準化和質(zhì)量控制的重要性在于：1、為臨床診治提供可靠的依據(jù)：實驗結(jié)果的可靠性是臨床診治疾病的重要依據(jù)和條件。實驗結(jié)果若為假陽性就會造成誤診、誤治；若為假陰性就會造成漏診、漏治；實驗結(jié)果偏高或偏低都會影響患者的診斷、鑒別診斷以及影響醫(yī)師對病情和療效的判斷。2、提高血栓與止血基礎(chǔ)研究的效率和價值：血栓與止血基礎(chǔ)研究的形式就是進行各種實驗。實驗可靠性好，就能揭示血栓與止血的客觀規(guī)律，甚至可帶來重大理論突破及（或）社會、經(jīng)濟效益；若實驗可靠性差或有錯誤，則會造成假象或錯誤理論。3、有助于人群健康調(diào)查和建立血液學(xué)參數(shù)的正常范圍：為了解一定人群的健康水平，建立具有廣泛意義的血液學(xué)參考值的范圍須進行較大規(guī)模人群的健康調(diào)查，健康調(diào)查必須要有實驗結(jié)果的可靠性作保障，不然會導(dǎo)致不準確或錯誤的結(jié)果，故質(zhì)量控制對群體醫(yī)學(xué)也有重要意義?？傊?，血栓與止血實驗室的質(zhì)量控制，從一定程度上反映一個國家，一個地區(qū)，一個單位血栓與止血醫(yī)療水平和研究水平的高低。因此，應(yīng)倍加重視。二、 凝血酶原時間（PT）的標準化自1935年Quick創(chuàng)建凝血酶原時間（prothrombin time,PT）測定方法以來，迄今仍然 是檢查外源凝血系統(tǒng)諸因子及相關(guān)抑制物的重要篩選試驗，PT也是目前口服抗凝劑治療的主要手段。但是，PT測定受多種因素影響，必須對它進行標準化和質(zhì)量控制，以提高PT檢測的精密度、準確度和可靠性。 （一）凝血酶原時間（PT）的標準化問題1、組織凝血活酶標準化：應(yīng)用的國際參考品（international reference preparation IRP），有下列幾種：（1）單一組織凝血活酶國際參考品：是一種組織提取物的生理鹽水懸液制劑。WHO在英國使用的統(tǒng)一標準的"英國比較凝血活酶"（British comparative thromboplastin,BCT）為基礎(chǔ)，制備WHO的原級凝血活酶參考品（primary reference preparation），如人腦組織凝血活酶，編號67/40。同時又以BCT67/40為基礎(chǔ)標化了次級參考品（secondary reference preparation）。如牛腦組織凝血活酶，編號為68/434；兔腦為70/178。后來WHO還公布了一些次級組織凝血活酶參考品，如人腦或胎盤制劑，如BCT/253；兔或兔、猴組織混合制劑，如RBT/79等。（2）復(fù)合組織凝血活酶國際參考品：它是組織提取物的生理鹽水懸液中加入適量的纖維蛋白原、因子V 和氯化鈣組成的制劑，如牛組織凝血活酶OBT/79等。目前世界各國都廣泛應(yīng)用WHO的這些參考品來校正本國或本地區(qū)制備或生產(chǎn)的組織凝血活酶參考物。這樣使世界范圍內(nèi)有了多種組織凝血活酶參考品。2、組織凝血活酶工作制劑（working preparation,WP）的國際敏感度指數(shù)（international sensitivity index,ISI）由于不同組織凝血活酶對凝血因子的敏感性不同。為了使不同敏感性的組織凝血活酶在檢測PT中能得到同樣的結(jié)果，必須要制定一個共同的敏感性指標。這就需要通過自制的試劑與國際參考品（IRP）進行比較，然后得出一個校正值。具體的方法如下：（略）3、PT測定結(jié)果的報告方式：理論上，無論何種組織凝血活酶，只要標有ISI，就可與國際參考制品進行對比校正，并可用同一種計量單位報告。1985年ICSH和ICTH推薦以PT監(jiān)測口服抗凝劑的報告方式是國際正常化比率（international normalizde ratio,INR）。INR的計算公式如下： 在用INR后，各種敏感性不同的組織凝血活酶均可得到相同的INR值。（略）（二）凝血酶原時間（PT）的推薦方法[原理]將組織凝血活酶（主要含組織因子和脂質(zhì)）和鈣離子，加到枸櫞酸抗凝血漿中，在37℃保溫，測定血漿凝固時間，即為PT。PT主要用于篩選檢測外源凝血系統(tǒng)的因子Ⅶ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ和相關(guān)因子的抑制物的試驗。[標本來集和處理]1、標本采集：用硅化或塑料注射器抽取空腹靜脈血，按9:1比例加入含0.109mol/L的枸櫞酸鈉抗凝劑的硅化或塑料試管中，輕輕混合均勻。2、標本處理：以2000～2500g，離心15分鐘，分離乏血小板血漿，并在24小時內(nèi)完成試驗。3、正常對照血漿：選擇正常健康男性和女性各lO名以上，年齡在18～45歲。但不能是妊娠、月經(jīng)期、哺乳期和口服避孕藥的婦女，采取的血漿冰凍干燥保存或-80℃保存。[試劑]1、抗凝劑：109mmol/L枸櫞酸鈉液（相當于含二分子結(jié)晶水的枸櫞酸鈉32g/L）。2、凝血活酶試劑：市售商品，應(yīng)標有ISI、批號及有效期。凍干者應(yīng)按說明書加指定的緩沖稀釋劑復(fù)溶。3、氯化鈣（CaCl2）溶液：為25mmol/L。（目前有些商品試劑已將凝血活酶液與氯化鈣液混合好，可不必另配CaCl2液）。4、質(zhì)控物：正常及異常對照血漿5、配制試劑用水必須符合1級純水的標準。[儀器]1、手工法：秒表，保持37℃±1℃的恒溫水浴箱或電熱塊。水深能浸試管3cm以上，表面無劃痕的10×mm拭管。經(jīng)標準的0.1mL移液管。經(jīng)校正的秒表。2、儀器法：各種自動或半自動血凝儀，嚴格按說明書操作。[操作步驟]1、手工法（1）測定溫度36.5～38.5℃，上述各試劑及被測血漿，均應(yīng)預(yù)溫至此一溫度，但凝血活酶試劑預(yù)溫不可超過30分鐘，血漿預(yù)溫一般不宜超過10分鐘。（2）所用試管及加樣器等接觸血漿的器具均為塑料或硅化玻璃管。（3）吸取枸櫞酸抗凝血漿0.1mL，加入一小試管中：加入凝血活酶試劑0.1mL混勻后置37℃水浴中。再加入25mmol/L CaCl2液0.1mL，（也可先將凝血活酶試劑與CaCl2溶液等量混合，加入0.2mL）。立即混勻并開動秒表：試管仍浸于水浴中，至約10秒鐘時，自水浴中取出，在紗布上迅速擦去試管外水滴，在明亮處不斷傾斜試管，在流動狀態(tài)下觀察有無纖維蛋白形成。一旦見到纖維蛋白（同時將出現(xiàn)液體流動減慢），立即停表，記錄時間。每次測定二管，按平均數(shù)報告。本試驗的最后混合液其pH應(yīng)為7.2～7.3，大部分商品凝血活酶試劑均用含緩沖液的溶液配制。（4）每批均同時做正常和異常對照，方法應(yīng)與測定標本完全相同。[報告方式]1、以PT的秒（S）數(shù)報告（最接近的0.5秒）2、以患者血漿（S）/正常對照PT（S）的比率（PRT）報告。3、在口服華法令類抗凝藥物治療監(jiān)控時，應(yīng)報告國際正?；嚷剩↖NR）。（略）三、活化部分凝血活酶時間(APTT)的標準化（一）活化部分凝血活酶時間(APTT)的標準化APTT是檢測內(nèi)源凝血系統(tǒng)諸凝血因子缺陷和相關(guān)抑制物的篩選試驗，也是當前用于凝血因子、肝素抗凝治療以及狼瘡抗凝物質(zhì)檢測的主要手段。與PT測定一樣，不同的部分凝血活酶、不同的活化劑和不同的激活時間對各種凝血因子缺陷、對肝素和對狼瘡抗凝物質(zhì)的敏感性相差很大。例如，檢測APTT的試劑中，所用活化劑（白陶土、硅藻土、鞣花酸）不同，他們對檢測肝素、狼瘡抗凝物質(zhì)和因子Ⅷ、Ⅸ的敏感性不同。迄今，ICSH和ICTH尚未有APTT檢測方法標準化或試劑標準化的可行方案問世，僅NCCLS于1992年，提出一個編號為H29-T的暫行方案。（二）活化的部分凝血活酶時間（APTT）的推薦方法 (略）http://zhidao.baidu.com/question/6788949.html
