與人類(lèi)一樣，作為犬消化道的起始部位，口腔中寄居著大量的微生物，以生物膜形式組成復(fù)雜的微生物群落，定植于口腔的不同部位。口腔微生物群落主要以細(xì)菌為主，也包含真菌、病毒、原核生物(古菌)等其它微生物體。各種微生物群落在口腔不同部位保持動(dòng)態(tài)平衡，構(gòu)成了復(fù)雜的口腔微生態(tài)系統(tǒng)。
口腔微生物參與口腔的正常代謝，刺激機(jī)體的免疫反應(yīng)，增加機(jī)體抗病的免疫能力，維護(hù)宿主口腔健康。眾多研究表明，犬口腔疾病(如牙周炎、牙齦炎及口臭等)的發(fā)生與口腔微生物組成改變有關(guān)。并且，作為最普通的伴侶動(dòng)物，犬與主人間的密切身體的接觸(如表示親近的嗅聞舔舐行為)，引發(fā)了人們對(duì)犬口腔微生物(潛在的人畜共患病原菌和牙周致病菌)傳播給人的擔(dān)憂，成為一個(gè)重要公共衛(wèi)生問(wèn)題?？梢?jiàn)，犬口腔微生物不僅與犬口腔健康有關(guān)，而且可能與人類(lèi)的健康有關(guān)。因此，對(duì)犬口腔微生物結(jié)構(gòu)組成的相關(guān)研究具有積極意義。
據(jù)報(bào)道，目前在種的水平，口腔發(fā)現(xiàn)超過(guò)350多種細(xì)菌，許多細(xì)菌在健康的犬口腔中的檢出率和豐度都很低，其中幾十種常見(jiàn)的細(xì)菌構(gòu)成了犬口腔微生物的大部分。多項(xiàng)研究表明，在門(mén)水平上犬口腔微生物組成主要由14個(gè)不同門(mén)的細(xì)菌所組成。其中，厚壁菌門(mén)、擬桿菌門(mén)、變形菌門(mén)、放線菌門(mén)、梭桿菌門(mén)、螺旋體菌門(mén)是最常在口腔中被檢測(cè)到的細(xì)菌類(lèi)型，且豐度在整個(gè)口腔菌群占優(yōu)勢(shì)地位?？梢栽诳谇恢袡z測(cè)到、豐度較低的菌門(mén)有互養(yǎng)菌門(mén)、綠菌門(mén)、綠彎菌門(mén)、SR1、TM7。此外，口腔中還偶爾能夠檢測(cè)到無(wú)壁菌門(mén)、WPS-2及GNO2的存在。犬口腔內(nèi)普遍存在的細(xì)菌屬類(lèi)包括：嚇啉菌屬、梭桿菌屬、鏈球菌屬、二氧化碳噬纖維菌屬及巴氏桿菌科和奈瑟菌科菌種，且不同的研究結(jié)果存在一定差異。由上可知，關(guān)于犬口腔微生物的多項(xiàng)研究中，研究結(jié)果并不完全一致。其原因可能與動(dòng)物本身差異、動(dòng)物飼養(yǎng)(飲水、日糧結(jié)構(gòu))、口腔護(hù)理、采樣方法、樣本加工處理過(guò)程(不同DNA萃取技術(shù))微生物分析方法等實(shí)驗(yàn)步驟某些環(huán)節(jié)不同造成檢測(cè)結(jié)果差異所致。較早的研究通過(guò)PCR和凝膠電泳技術(shù)，而最近的研究采用了新一代高通量測(cè)序技術(shù)，所得結(jié)果更精確。Santin R等研究了犬口腔真菌組成，結(jié)果為59只犬中30只犬分離得到真菌(分離率50.85%)。共分離得到61個(gè)真菌分離物，分別屬于5個(gè)屬：馬拉色菌屬、念珠菌屬、毛孢子菌屬、紅酵母屬和隱球菌屬。共鑒定得到11種真菌類(lèi)，厚皮病馬拉色菌、紅酵母、白色念珠菌、鏈狀念珠菌、無(wú)名假絲酯母、吉利蒙氏念珠菌、近平滑念珠菌、中間假絲酵母、阿薩希絲孢酵母、粘性絲孢酵母和白色隱球菌；犬口腔內(nèi)分離率最高的真菌是厚皮病馬拉色菌。結(jié)果提示，真菌是犬口腔不同區(qū)域微生物組成部分。人類(lèi)口腔唾液中還含有一部分古細(xì)菌，目前只有3種可以進(jìn)行培養(yǎng)，分別是口腔甲烷短桿菌、史氏甲烷短桿菌、斯氏甲烷短桿菌。已有研究發(fā)現(xiàn)，口腔甲烷桿菌豐度增加與人類(lèi)牙周病嚴(yán)重程度相關(guān)。之前關(guān)于犬口腔微生物組成的研究中未報(bào)道古菌的存在，而Radeerom等運(yùn)用高通量測(cè)序技術(shù)進(jìn)行犬貓牙結(jié)石內(nèi)微生物組成的研究中首次報(bào)道了古菌群存在，犬牙結(jié)石內(nèi)最優(yōu)勢(shì)古菌門(mén)類(lèi)是廣古菌門(mén)，優(yōu)勢(shì)屬類(lèi)是產(chǎn)甲烷短桿菌。Oba等(2021)運(yùn)用高通量測(cè)序技術(shù)于健康成年比格犬口腔中也檢測(cè)到古菌，并且發(fā)現(xiàn)唾液(SAL)和齦下菌斑(SUB)樣本中廣古菌門(mén)相對(duì)豐度較齦上菌斑(SUP)高。目前，尚未有關(guān)于犬口腔病毒組成的系統(tǒng)研究報(bào)道。對(duì)犬口腔微生物的研究表明，犬口腔內(nèi)不同區(qū)域也存在不同的微生物多樣改變。Ruparell等基于細(xì)菌16S rRNA基因V3-V4區(qū)，運(yùn)用IlluminaMiSeq高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)14只拉布拉多犬口腔內(nèi)不同生態(tài)位(齦上菌斑、刺激性唾液、頰部和舌背部粘膜)微生物組成進(jìn)行分析研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與口腔其它生態(tài)位比，齦上菌斑內(nèi)微生物菌群多樣性最高，并且在單個(gè)分類(lèi)群存在最大量的顯著差異。唾液內(nèi)微生物組成在不同犬個(gè)體間的差異最高，并且菌群多樣性最低，有最少微生物種類(lèi)，舌背和頰側(cè)微生物種類(lèi)豐度介于兩者之間?？傮w上，頰部和舌背粘膜的菌群組成相似度最高。結(jié)果提示，犬口腔內(nèi)細(xì)菌譜存在三個(gè)獨(dú)立的生態(tài)位：軟組織表面、硬組織表面(齦上菌斑)和唾液。通過(guò)每個(gè)生態(tài)位微生物組成的鮮明特征來(lái)辨別生態(tài)位的能力為每個(gè)生態(tài)位內(nèi)作為診斷用途的潛在微生物生物標(biāo)志物的鑒別提供了可能。運(yùn)用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)26只健康成年比格犬唾液(SAL)、齦下菌斑(SUB)和齦上菌斑(SUP)三個(gè)不同口腔區(qū)域微生物組成的分析結(jié)果表明，犬唾液、齦下菌斑和齦上菌斑生境存在差異，口腔不同生境對(duì)犬口腔細(xì)菌門(mén)類(lèi)和屬類(lèi)均有顯著影響。唾液中細(xì)菌種類(lèi)最豐富，其次齦下菌斑，齦上菌斑細(xì)菌種類(lèi)最低，唾液和齦上菌斑中微生物組成差異最明顯。這一研究結(jié)果與先前關(guān)于犬SUP和口腔棉拭子研究結(jié)果相一致，也與人類(lèi)口腔不同區(qū)域中SUP和SAL樣本微生物多樣性參數(shù)最高的研究結(jié)果相似。但與Ruparell等口腔其它區(qū)域相比，SUP樣本的Shannon多樣性指數(shù)更大，唾液微生物多樣性最低研究結(jié)果不一致，這可能由于唾液采集前的刺激，造成唾液增加而使唾液微生物稀釋所致。該研究中，唾液采集過(guò)程未進(jìn)行刺激，因此唾液樣本未被稀釋。研究表明，犬口腔微生物的組成隨食物結(jié)構(gòu)、口腔環(huán)境(溫度，pH值等)健康狀況﹑年齡、體型大小變化等而發(fā)生改變，也可能與犬遺傳因素及口腔衛(wèi)生狀況有關(guān)。張寧寧等對(duì)16只食用商品犬糧(干糧)、12只食用商品犬糧+自家飯的犬和16只食用自家飯的犬的口腔微生物構(gòu)成進(jìn)行了研究。高蛋白，高脂肪﹑低碳水化合物和多肉類(lèi)的食物可以導(dǎo)致犬口腔正常菌群比例的改變，特別是厭氧菌菌群失調(diào)，主要涉及的菌種為消化球菌和梭桿菌。相比實(shí)驗(yàn)中商品犬糧組的犬而言，長(zhǎng)期食用自家飯的犬容易發(fā)生口腔菌群失調(diào)，而導(dǎo)致口腔疾病的發(fā)生，不利于犬的健康。但犬口腔的正常菌群的種類(lèi)未發(fā)生明顯變化。另外一項(xiàng)對(duì)集中飼養(yǎng)和飼喂不同日糧的犬口腔微生物分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，僅有不同年齡和不同品種的犬口腔微生物組成存在差異。Bell等研究發(fā)現(xiàn)，飼喂不同日糧蛋白前后犬口腔微生態(tài)系統(tǒng)仍保持穩(wěn)定。這一發(fā)現(xiàn)與人類(lèi)口服抗生素后盡管腸道微生物發(fā)生明顯變化，但口腔微生物譜穩(wěn)定的研究結(jié)果相似。以上研究結(jié)果提示，飼喂不同結(jié)構(gòu)的日糧可能影響犬口腔微生物比例，但犬口腔核心微生物種類(lèi)仍保持穩(wěn)定。口腔的微生物組成受到口腔環(huán)境pH值的影響。大部分口腔微生物不適合在極端的酸性或堿性環(huán)境生長(zhǎng)，需要在接近中性的條件下才能達(dá)到最佳生長(zhǎng)條件。研究表明，堿性的pH條件更適合許多牙周致病菌(如牙齦嚇啉菌等)的生長(zhǎng)。唾液在口腔中的循環(huán)流動(dòng)，可以對(duì)口腔表面的pH值進(jìn)行調(diào)節(jié)。此外，年齡和食物結(jié)構(gòu)變化也會(huì)對(duì)口腔pH值產(chǎn)生影響。唾液pH在犬和人類(lèi)不同，犬唾液呈偏堿性(pH 8.5~8.65)，而人類(lèi)則偏中性(pH 6.5~7.5)。研究發(fā)現(xiàn)，人類(lèi)和犬口腔微生物組成相似性較低，推測(cè)可能與兩者間的口腔環(huán)境(唾液pH值等)存在生理學(xué)上的差異有關(guān)，導(dǎo)致犬口腔細(xì)菌難以在人類(lèi)的口腔環(huán)境存活。Wallis等對(duì)不同健康狀況和年齡犬齦下菌斑微生物組成的研究發(fā)現(xiàn)，健康狀況和年齡對(duì)齦下菌斑微生物組成的影響顯示出明顯的相似性，即隨年齡增加和牙齦炎的發(fā)展，犬口腔內(nèi)齦下菌斑的微生物組成發(fā)生了明顯改變。年輕犬和無(wú)牙齦炎犬齦下菌斑中擬桿菌門(mén)和變形菌門(mén)占優(yōu)勢(shì)，而老齡犬和中度牙齦炎犬齦下菌斑中厚壁菌門(mén)占優(yōu)勢(shì)。研究還發(fā)現(xiàn)，小型犬齦下菌斑微生物與中大型犬顯著不同，厚壁菌門(mén)為優(yōu)勢(shì)菌門(mén)。同時(shí)，研究者也探索了不同體型大小的犬口腔微生物的組成變化特征。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，小型犬口腔菌斑菌群明顯不同于中大型犬。與中大型犬相比，小型犬齦下菌斑包含更高水平的厚壁菌門(mén)類(lèi)細(xì)菌，這些細(xì)菌成員包括韋榮球菌科和梭菌目。此類(lèi)細(xì)菌也與中度牙齦炎有關(guān)，并且小型犬齦下菌斑中與健康牙齦有關(guān)的許多屬于變形菌門(mén)的細(xì)菌種類(lèi)比例顯著降低。這一研究發(fā)現(xiàn)也許能解釋小型犬牙周炎發(fā)病率明顯高于大型犬事實(shí)。此外，也有研究發(fā)現(xiàn)，犬不同個(gè)體間口腔微生物組成也存在差異。犬口腔內(nèi)微生物組成是否具有品種特異性的特征，需要進(jìn)一步研究證實(shí)。Wallis等運(yùn)用454-焦磷酸測(cè)序技術(shù)對(duì)來(lái)自不同國(guó)家(英國(guó)、美國(guó)、中國(guó)和泰國(guó))的587只犬齦下菌斑微生物組成進(jìn)行了研究，探討了不同地理位置與犬口腔微生物間的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，來(lái)自不同國(guó)家犬群齦下菌斑擁有相似的微生物組成，盡管其中有某些特定的菌類(lèi)的豐度在不同國(guó)家間存在顯著差異。然而，最重要的是，在不同地理位置下，與犬健康、牙齦炎及牙周炎相關(guān)的細(xì)菌類(lèi)群沒(méi)有顯著差異。這一結(jié)果提示，菌斑內(nèi)細(xì)菌種類(lèi)可能用于界定牙周病犬，而不受犬飼養(yǎng)地理位置的影響，有利于改進(jìn)犬牙周病的檢測(cè)效率。這與在人類(lèi)的口腔微生物組成沒(méi)有明顯的環(huán)境(地理位置)差異的研究結(jié)果相一致。研究發(fā)現(xiàn)，不同的口腔部位(如唾液﹑齦上菌斑、齦下菌斑等)具有其特有的理化特性和生理?xiàng)l件(氧張力、pH和口腔粘膜表面特性)，為不同微生物的黏附定植以及后續(xù)的生長(zhǎng)增殖提供了條件。因此，每個(gè)口腔部位可能定植著各自不同的微生物群落。與此同時(shí)，不同口腔部位的菌群也時(shí)刻互相影響。即使在一個(gè)口腔位點(diǎn)內(nèi)，不同的環(huán)境條件也會(huì)產(chǎn)生不同的微生境，從而造成微生物的差異。牙冠上的氧氣很豐富﹐但齦溝中的牙面處于缺氧環(huán)境中，浸泡在齦溝液中，齦溝液是一種從牙齦組織中滲出的富含蛋白質(zhì)的物質(zhì)。舌背表面有多重乳頭，增加了微生物的多樣性?？谇惶峁┝艘粋€(gè)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的環(huán)境，具有一系列不同的微生境。近期的研究結(jié)果顯示，口腔微生物群落改變是導(dǎo)致口腔多種疾病(口臭和牙周病等)的關(guān)鍵因素之二。牙周病是犬常見(jiàn)的口腔疾病。據(jù)報(bào)道，犬牙周炎和牙齦炎發(fā)病率范圍分別為50%~70% 、95%~100%，發(fā)病率隨年齡的增大而增高。高達(dá)80%犬在2歲齡時(shí)已經(jīng)患有某種程度的牙周病，小型犬更易發(fā)生牙周病。牙齦炎能醫(yī)治，而牙周炎則會(huì)導(dǎo)致牙周組織的穩(wěn)定損害﹐這種損害對(duì)寵物來(lái)說(shuō)常常是痛苦的。犬牙周病造成牙齒疼痛、咀嚼困難，從而嚴(yán)重影響犬的生活質(zhì)量。如果得不到及時(shí)的治療﹐結(jié)締組織的附著喪失和牙槽骨吸收會(huì)使牙齒產(chǎn)生松動(dòng)，并最終導(dǎo)致牙齒脫落。研究發(fā)現(xiàn)，犬口腔疾病(尤其是牙周病)與口腔微生物比例失衡密切相關(guān)。當(dāng)嚴(yán)重牙齦炎和輕度牙周炎時(shí)，屬于厚壁菌門(mén)的細(xì)菌屬類(lèi)(產(chǎn)線菌屬，梭菌目及韋榮球菌科和消化鏈球菌科）相對(duì)豐度增加。放線菌屬、嚇啉菌屬和梭桿菌屬是犬口腔內(nèi)最優(yōu)勢(shì)的細(xì)菌屬類(lèi)，屬于在犬口腔內(nèi)后期定植的厭氧微生物群，具有蛋白水解活性這一牙周病原菌的生物學(xué)特性。梭桿菌屬亞種常能導(dǎo)致犬牙周炎，消化鏈球菌科是牙周炎的病原體。與牙齦炎和牙周炎患犬比，健康犬更年輕化，有更高比例的需氧菌；相比健康犬和牙齦炎犬，牙周炎患犬口腔內(nèi)有更高比例的厭氧菌，但健康犬比輕度牙周炎犬有更多兼性厭氧菌種類(lèi)。革蘭氏陰性厭氧活動(dòng)的桿狀和絲狀菌是嚴(yán)重牙周病犬口腔優(yōu)勢(shì)菌種類(lèi)。Oba等研究也發(fā)現(xiàn)，犬牙菌斑內(nèi)的放線菌屬、棒狀桿菌屬、二氧化碳噬纖維菌屬、纖毛菌屬和奈瑟菌屬與更高的口腔健康(健康惡化)評(píng)分相關(guān)。Wallis等對(duì)犬齦下菌斑樣本中微生物組成分析發(fā)現(xiàn)，隨著牙周炎的發(fā)展，需氧革蘭氏陰性菌群數(shù)量成比例下降，牙菌斑菌群組成保持相對(duì)穩(wěn)定，而菌群各類(lèi)細(xì)菌成員比例發(fā)生改變。結(jié)果提示，犬牙周炎的發(fā)生是因口腔內(nèi)微生物菌群發(fā)生演替，特別是與口腔健康相關(guān)的優(yōu)勢(shì)菌群豐度降低所致，強(qiáng)調(diào)了口腔微生物比例失衡在犬牙周病發(fā)生中的重要性。口臭來(lái)源于口腔內(nèi)的一些揮發(fā)性物質(zhì)，其中最主要的一類(lèi)是揮發(fā)性硫化物，包括硫化氫、甲硫醇和二甲硫醇等?？谇恢写嬖诖罅磕軌蜥尫艙]發(fā)性硫化物的細(xì)菌(如牙齦嚇啉單孢菌和舌乳頭間隙內(nèi)的微生物)，此類(lèi)細(xì)菌通過(guò)產(chǎn)生大量H2S等致口臭的化物學(xué)質(zhì)，是產(chǎn)生口臭的獨(dú)特原因。研究發(fā)現(xiàn)，口臭在成年犬普遍存在，牙齦炎和牙周炎是引起犬口臭的最主要的致病因素。牙周病患犬常伴有牙石、牙菌斑，細(xì)菌對(duì)其進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生口腔異味。揮發(fā)性硫化物水平與牙周病存在正相關(guān)，口臭可能是犬嚴(yán)重牙周疾病開(kāi)始的唯一癥狀，并且具有年齡依賴性。對(duì)犬口腔真菌組成研究發(fā)現(xiàn)，患口臭犬的口腔真菌分離率顯著高于無(wú)口臭犬。這一結(jié)果提示，真菌可能是誘發(fā)犬口臭的一大原因。來(lái)源：林琳等《犬口腔微生物研究進(jìn)展》，僅用于學(xué)習(xí)交流用，如涉及侵權(quán)，請(qǐng)聯(lián)系小編?。ǚ饷鎴D來(lái)源于創(chuàng)客貼會(huì)員）
