腫瘤（tumor）是機(jī)體中正常細(xì)胞在不同因素長(zhǎng)期作用下異常增生與分化所形成的新生物。根據(jù)腫瘤對(duì)機(jī)體的影響，可分為良性與惡性腫瘤兩類。惡性腫瘤除在原位無(wú)控制的生長(zhǎng)外，可轉(zhuǎn)移到身體其他部位，并且治療困難，常危及生命。全世界每年約有1000萬(wàn)人發(fā)生惡性腫瘤。腫瘤的發(fā)病機(jī)制是內(nèi)外因素導(dǎo)致細(xì)胞基因突變、激活原癌基因或抑癌基因失活，最終影響調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、分化的基因表達(dá)，進(jìn)而組織細(xì)胞發(fā)生惡性改變。外界因素指物理、化學(xué)和生物刺激等；內(nèi)在因素則更為復(fù)雜，受多種基因控制，其中免疫功能低下及內(nèi)分泌機(jī)制紊亂在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起重要作用。到目前為止，腫瘤的病因尚未完全認(rèn)識(shí)。
腫瘤的診斷在于確定有無(wú)腫瘤及明確腫瘤的性質(zhì)，對(duì)惡性腫瘤需進(jìn)一步了解其生長(zhǎng)與浸潤(rùn)的范圍與程度。結(jié)合病史、體檢及各種檢查，包括影像診斷和實(shí)驗(yàn)診斷的綜合檢查是當(dāng)前診斷腫瘤的有效方法，但目前尚缺乏特異性高的早期診斷方法，尤其對(duì)深部腫瘤的早期診斷較為困難。
實(shí)驗(yàn)診斷是腫瘤檢查中必不可少的手段之一。通過(guò)血液、尿液和糞便等標(biāo)本的常規(guī)檢查可提供腫瘤診斷的線索。血清、體液、分泌物或排泄物中腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的糖蛋白、激素、酶類及代謝產(chǎn)物等腫瘤標(biāo)志物（tumor markers）檢測(cè)是目前腫瘤的診斷、療效觀察、復(fù)發(fā)判斷等的重要手段。流式細(xì)胞術(shù)（FCM）分析腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期改變、DNA倍體異常和DNA指數(shù)、腫瘤標(biāo)志物表達(dá)等，可以協(xié)助腫瘤的診斷、判斷良惡性性質(zhì)與預(yù)后等。腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)對(duì)腫瘤發(fā)病機(jī)制的研究、早期診斷、估計(jì)預(yù)后等有重要的作用。
腫瘤標(biāo)志物是指在腫瘤發(fā)生和增殖過(guò)程中，由腫瘤細(xì)胞本身合成、釋放或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)，可存在于血液、細(xì)胞、組織或體液中。腫瘤標(biāo)志物的種類較多，但目前尚無(wú)公認(rèn)的統(tǒng)一分類和命名標(biāo)準(zhǔn)。
腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的潛在應(yīng)用是一般人群中腫瘤的篩查、有癥狀患者的診斷、輔助腫瘤的臨床分期、與腫瘤的體積相關(guān)、有助于選擇適宜的治療手段、監(jiān)測(cè)治療效果、判斷預(yù)后、腫瘤復(fù)發(fā)的早期診斷等，但遺憾的是幾乎目前發(fā)現(xiàn)的所有腫瘤標(biāo)志物作為篩查指標(biāo)缺乏足夠的靈敏度，在診斷病人是否患有惡性腫瘤時(shí)，大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物并非特異，在一些良性腫瘤、炎癥反應(yīng)等也升高。因此，目前腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)主要的臨床應(yīng)用是：①部分腫瘤如肝癌、前列腺癌、絨毛膜上皮癌高危人群的篩查；②協(xié)助腫瘤的診斷：如肝癌、前列腺癌、絨毛膜上皮癌、結(jié)腸癌、小細(xì)胞肺癌等；③監(jiān)測(cè)腫瘤治療效果、判斷預(yù)后和復(fù)發(fā)的早期診斷。
一、甲胎蛋白
甲胎蛋白（alpha fetoprotein, AFP）是在胎兒早期主要由肝臟合成的一種單鏈糖蛋白，分子量為67～74kD，在胎兒成長(zhǎng)期AFP濃度最高，出生后降低，1歲時(shí)處在非常低的濃度，2歲時(shí)與成人水平一致。當(dāng)肝細(xì)胞或生殖腺胚胎組織發(fā)生惡性病變時(shí)，有關(guān)基因重新被激活，使原來(lái)已喪失合成AFP能力的細(xì)胞又重新開始合成，以致血中AFP含量明顯升高。因此血中AFP濃度檢測(cè)對(duì)診斷肝細(xì)胞癌及生殖細(xì)胞腫瘤有重要的臨床價(jià)值。
㈠適應(yīng)證
1、臨床疑為肝癌和生殖細(xì)胞腫瘤，如睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等的診斷及手術(shù)后、放化療過(guò)程中的監(jiān)測(cè)
2、高危人群的監(jiān)測(cè)：如肝硬化患者發(fā)展為肝癌，隱睪癥患者發(fā)展為睪丸癌的監(jiān)測(cè)。
㈡標(biāo)本采集：一般用血清，胸水、腹水、腦脊液也可測(cè)定。
㈢檢測(cè)方法：RIA、ELISA、化學(xué)發(fā)光免疫分析（chemiluminescent immunoassay, CLIA）、微粒子酶免疫分析（micropaticle enzyme immunoassay，MEIA）、電化學(xué)發(fā)光免疫分析（electrochemiluminescent immunoassay，ECLIA）等多種方法。
㈣參考范圍：血清AFP：MEIA 0~10μg/L，ELISA 0~25μg/L。
㈤臨床意義
1、原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者血清AFP約80%~90%增高，約75%左右的患者＞300μg/L，肝癌診斷的醫(yī)學(xué)決定水平為＞400μg/L。未經(jīng)治療的原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者血清AFP可呈持續(xù)性升高，術(shù)后和治療有效時(shí)AFP減低，腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移時(shí)回升。約有10%的原發(fā)性肝癌患者血清AFP不增加。
2、生殖腺胚胎性腫瘤，如睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等患者血清AFP可增高，檢測(cè)的靈敏度可達(dá)40%~85%。診斷和監(jiān)測(cè)顱內(nèi)轉(zhuǎn)移的生殖細(xì)胞腫瘤時(shí)，腦脊液AFP測(cè)定有意義，這些患者血清AFP可能并不增高。
3、其他腫瘤：胃癌、胰腺癌、膽管癌、結(jié)腸癌、肺癌等血清中AFP也可升高，但檢測(cè)的靈敏度較低，僅約20%左右，而且增高水平一般＜300μg/L。
4、病毒性肝炎、肝硬化時(shí)AFP也有不同程度的升高。約10%~60%肝硬化患者血清AFP可呈持續(xù)性或短暫性增高，但增加幅度一般＜300μg/L。肝硬化伴有血清AFP增高的患者發(fā)展為原發(fā)性肝癌的危險(xiǎn)性增高。急性肝炎和慢性活動(dòng)性肝炎時(shí)，血清AFP濃度升高，但多為暫時(shí)性改變，尤其是急性肝炎。
㈥評(píng)價(jià)與問(wèn)題
1、不同檢測(cè)方法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有差別，應(yīng)使用不同的參考范圍。
2、AFP的生理變化：①妊娠：第10周開始，孕婦血清AFP開始升高；在妊娠第32~36周達(dá)高峰，可達(dá)400~500μg/L，以后下降直至分娩，維持在250μg/L左右；分娩后迅速下降，約4d后即可減低一半。但是，在胎兒神經(jīng)管畸形、食管及十二指腸閉鎖、先兆流產(chǎn)、胎兒宮內(nèi)窒息時(shí)，母體血清和羊水中AFP增高。②胎兒出生時(shí)，血清AFP濃度大約70mg/L；2~3周后降至0.5~4mg/L，10個(gè)月后低于20μg/L。
二、癌胚抗原
癌胚抗原（carcinoembryonic antigen, CEA）是一種富含多糖的蛋白復(fù)合物，最初從結(jié)腸癌組織中提取。胎兒早期的消化管及某些組織均有合成CEA的能力，孕六個(gè)月以后含量逐漸減少，出生后血中含量極低。后來(lái)發(fā)現(xiàn)除結(jié)腸癌外，其他一些惡性腫瘤患者的血清中CEA含量有異常升高。
㈠適應(yīng)證：消化道腫瘤、肺癌、乳腺癌、腎癌、卵巢癌、子宮癌等的輔助診斷、療效或復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)。
㈡標(biāo)本采集：血清、胸腹水。
㈢檢測(cè)方法：RIA、ELISA、CLIA、ECLIA和MEIA等多種方法。
㈣參考范圍：血清＜5μg/L（MEIA）。
⑸臨床意義
1、惡性腫瘤的輔助診斷：血清CEA明顯升高，見于多種惡性腫瘤，如結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、腎癌、卵巢癌、子宮癌等，不同統(tǒng)計(jì)資料報(bào)道的陽(yáng)性率有較大差別，結(jié)腸癌多為40%~50%，肺癌、乳腺癌、胃癌的陽(yáng)性率相對(duì)較高。一般血清CEA高于參考范圍上限4倍時(shí)，惡性腫瘤的可能性較大；如果超過(guò)8倍以上，則高度懷疑惡性腫瘤。上述有關(guān)惡性腫瘤胸腹腔轉(zhuǎn)移時(shí)，胸腹水可先于血清中CEA升高。最近發(fā)現(xiàn)胃液和唾液中CEA檢測(cè)對(duì)胃癌診斷有一定價(jià)值。由于CEA診斷惡性腫瘤的靈敏度較低，一般不用于普通人群的篩查。
2、惡性腫瘤療效與復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)：惡性腫瘤（如結(jié)腸癌）術(shù)后6~8周，血清CEA濃度不能達(dá)到穩(wěn)定的低水平或又逐漸上升，提示存在殘留病灶。在腫瘤的放化療過(guò)程中，血清CEA濃度逐漸降低，表明治療有效；腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移時(shí)，血清CEA濃度又再度升高。在監(jiān)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)過(guò)程中，一般在第1~2年內(nèi)，每2~3個(gè)月檢測(cè)一次。
3．非腫瘤性疾?。簼冃越Y(jié)腸炎、胰腺炎、肝臟疾病、肺氣腫、支氣管炎、肺炎等可見CEA輕度升高，但一般不超過(guò)參考范圍上限的4倍。
㈥評(píng)價(jià)與問(wèn)題
1、不同方法、不同儀器和試劑可影響測(cè)定結(jié)果。不同參考人群，如非吸煙健康人血清CEA濃度一般＜2.5μg/L，大量吸煙的人群升高，少數(shù)人可＞5μg/L。因此，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立本室的參考范圍。
2、CEA作為腫瘤標(biāo)志物在監(jiān)測(cè)腫瘤的復(fù)發(fā)（如結(jié)腸癌）比其他的檢查手段可以更早期發(fā)現(xiàn)。在345例CEA升高的結(jié)腸癌術(shù)后患者，有13.5%的患者再次進(jìn)行了治療性切除術(shù)。
三、糖鏈抗原19-9
糖鏈抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）于1979年被發(fā)現(xiàn)，研究人員用結(jié)腸癌細(xì)胞株的提取物作為抗原制備了一株單克隆抗體（1116NS-19-9），此抗體所識(shí)別的腫瘤相關(guān)抗原被命名為CA19-9。CA19-9是一種單鏈唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂（monosialoganglioside），分子量大于36KD，屬于Lewis血型系統(tǒng)成分，胚胎期分布于胎兒的胰腺、肝、膽囊和腸等組織。在成人的胰、膽管等部位也有少量存在。當(dāng)患胰腺癌、肝膽和胃腸道癌時(shí)血中CA19-9的水平可明顯升高，故又稱為胃腸癌抗原（gastrointestinal cancer antigen, GICA）。
㈠適應(yīng)證：疑為胰腺癌、肝癌、膽管癌、胃癌的輔助診斷、治療與復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)。
㈡標(biāo)本采集：血清、胸腹水。
㈢檢測(cè)方法：RIA、ELISA、ELIA、ECLIA和MEIA等多種方法。
㈣參考范圍：血清＜37U/ml（MEIA）。
㈤臨床意義
1、胃腸道惡性腫瘤
⑴胰腺癌：血清CA19-9可明顯增高，與胰腺炎鑒別的臨界值（cutoff level）為50U/ml。根據(jù)受試者工作特性曲線（receiver operator characteristic curves, ROC）分析數(shù)據(jù)表明，在胰腺癌的臨床特異性（clinical specificity）為94%時(shí)，臨床靈敏度（clinical sensitivity）為81%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值（positive predicative values）為95%，陰性預(yù)測(cè)值（negative predicative values）為78%。
⑵肝癌和膽管癌：一些研究報(bào)道CA19-9診斷肝癌的臨床靈敏度為22%~51%，膽管癌為55%~79%。鑒別良性與惡性膽道疾病時(shí)，醫(yī)學(xué)決定水平（medical decision level）為200U/ml時(shí)，臨床靈敏度為65%，特異性為91%；當(dāng)臨界值為37U/ml時(shí)，臨床靈敏度為83%，特異性為45%。在鑒別肝癌和膽管癌時(shí)，前者血清CA19-9常＜200U/ml，后者CA19-9常＞200U/ml。
⑶胃癌：血清CA19-9的臨床靈敏度為26%~60%，并與胃癌的病程相關(guān)；血清CA19-9和CEA聯(lián)合測(cè)定時(shí)，靈敏度可增加兩倍。根據(jù)多變異研究發(fā)現(xiàn)，CA19-9和CEA是胃癌患者生存時(shí)間的獨(dú)立預(yù)后因素。
⑷結(jié)腸癌：血清CA19-9的臨床靈敏度為18%~58%，與腫瘤的發(fā)展階段密切相關(guān)。與CEA相比，臨床靈敏度較低，但特異性較高（cutoff ＞40U/ml），可達(dá)92%~99%。
2、其他腫瘤：診斷的臨床靈敏度：肺癌7%~42%，乳腺癌約10%，卵巢癌15%~38%，子宮癌約13%。
3、良性疾?。阂认傺住⒛懼俜e型膽管炎、膽石癥、慢性活動(dòng)性肝炎、肝硬化、大面積肝細(xì)胞壞死等，血清CA19-9也可出現(xiàn)不同程度的升高。急性胰腺炎、慢性胰腺炎急性發(fā)作時(shí)，15%~20%的病例血清CA19-9可升高，但一般＜100U/ml，但少數(shù)可高達(dá)500 U/ml。以臨界值100U/ml鑒別胰腺癌和胰腺炎，診斷胰腺癌的臨床特異性為97%、靈敏度為62%。
4、腫瘤治療的監(jiān)測(cè)：未治療的惡性腫瘤患者血清CA19-9濃度呈逐漸升高變化，可高于1000U/ml以上。胰腺癌、肝癌、胃癌患者的血清CA19-9濃度與臨床外科治療、化療、放療相關(guān)，在完全手術(shù)切除后2~4周，血清CA19-9應(yīng)＜15U/ml；采用非手術(shù)或輔助治療時(shí)，血清CA19-9可輕度、短暫地降低，但較難恢復(fù)到參考范圍；患者再次或進(jìn)一步升高，提示腫瘤轉(zhuǎn)移或病情進(jìn)行性加重。胰腺癌、膽管癌患者在治療過(guò)程中，血清CA19-9的變化較為快速，而且比病理學(xué)和影像學(xué)檢查更可靠。在化療效果的監(jiān)測(cè)中，對(duì)血清CA19-9減低不明顯的患者，可以考慮調(diào)整化療方案。
㈥評(píng)價(jià)與問(wèn)題
1、不同的CA19-9檢測(cè)試劑盒所用的抗體有差別，室內(nèi)變異系數(shù)為3%~13%、室間變異系數(shù)為4%~16%時(shí)屬于可接受范圍。
2、參考范圍上限為37U/ml，與年齡、吸煙無(wú)相關(guān)性，婦女顯示稍高的變化，妊娠時(shí)輕度升高，可達(dá)70 U/ml。
3、胸腹水CA19-9檢測(cè)對(duì)鑒別良性與惡性積液有意義，以30U/ml作為臨界值，惡性積液診斷的臨床靈敏度約為50%，特異性可達(dá)100%。
四、癌抗原125
1981年，Bast等首先報(bào)道了一株單克隆抗體OC125，它能與卵巢癌細(xì)胞系和卵巢癌腹水腫瘤細(xì)胞反應(yīng)，其相應(yīng)的抗原被命名為癌抗原125（cancer antigen 125, CA125）。CA125為一種糖蛋白，分子量約為200KD，主要存在于女性生殖道上皮細(xì)胞表面。因此，女性生殖道腫瘤或良性疾病時(shí)，血清中CA125可呈不同程度升高，尤其是卵巢癌是升高更為顯著。
㈠適應(yīng)證：卵巢癌的診斷、治療與復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)。
㈡標(biāo)本采集：血清、胸腹水、腦脊液。
㈢檢測(cè)方法：RIA、ELISA、CLIA、ECLIA和MEIA等多種方法。
㈣參考范圍：血清＜35U/ml（MEIA）。
㈤臨床意義：
1、卵巢癌：血清CA125水平明顯升高，可高達(dá)5000U/ml以上；當(dāng)臨界值為35U/ml時(shí)，臨床靈敏度為82%~96%；臨界值為65U/ml時(shí)，臨床靈敏度為74%~78%，故對(duì)卵巢癌診斷有較大臨床價(jià)值。血清CA125濃度與卵巢癌的預(yù)后相關(guān)，手術(shù)前輕度增高，多處于臨床早期，腫瘤體積一般較小，治療反應(yīng)好，復(fù)發(fā)率低；相反，術(shù)前的血清CA125濃度高，疾病常處于進(jìn)展階段，對(duì)化療反應(yīng)差。在術(shù)后1~3個(gè)月，CA125持續(xù)增高，提示殘存腫瘤直徑＞1~2cm。腫瘤復(fù)發(fā)時(shí)，74%~89%的病例血清CA125＞65U/ml。手術(shù)后或初始化療后3個(gè)月的血清CA125水平是腫瘤治療反應(yīng)的關(guān)鍵指征。
2、其他婦科腫瘤：血清CA125測(cè)定對(duì)其他婦科腫瘤的輔助診斷價(jià)值不如卵巢癌，其臨床靈敏度分別為：子宮頸腺癌43%~57%，子宮內(nèi)膜癌20%~33%，輸卵管癌約38%，乳腺癌8%~13%。
3、胃腸腫瘤：血清CA125測(cè)定對(duì)胃腸腫瘤的輔助診斷有一定意義，以臨界值35U/ml時(shí)，其臨床靈敏度分別為：胰腺癌45%~79%，肝轉(zhuǎn)移癌40%~77%，膽管癌約46%，結(jié)腸癌20%~39%，胃癌約39%；血清CA125濃度與這些腫瘤的病程有關(guān)。
4、良性疾?。杭毙宰訉m附件炎、子宮內(nèi)膜異位、腹膜炎、良性胃腸疾病、急性胰腺炎、膽結(jié)石、急慢性肝炎、肝硬化、自身免疫性疾病等，血清CA125可增高，但增高幅度較小，一般＜65U/ml。
㈥評(píng)價(jià)與問(wèn)題
1、不同的CA125檢測(cè)試劑盒所測(cè)結(jié)果可能會(huì)有較大差別，當(dāng)血清濃度＞350~400U/ml時(shí)，應(yīng)將血清稀釋后再測(cè)定。應(yīng)采用本實(shí)驗(yàn)室所建立的參考范圍。
2、非妊娠婦女在月經(jīng)期時(shí)，CA125可偶爾輕度升高。一些妊娠婦女CA125可增高。
3、所有體液均可測(cè)定CA125，在一些良性和惡性胸腹水中發(fā)現(xiàn)有不同程度的升高，羊水中也可見出較高濃度的CA125，故體液中的CA125升高應(yīng)注意結(jié)合臨床分析。
五、糖類抗原15-3
糖類抗原15-3（carbohydrate antigen 15-3, CA15-3）是一種高分子量的糖蛋白，分子量超過(guò)400kD，通過(guò)兩種單克隆抗體（115D8和DF3）識(shí)別。單克隆抗體DF3所識(shí)別的抗原定位在人乳腺癌細(xì)胞，這種抗原被認(rèn)為是一種惡性乳腺上皮細(xì)胞的分化抗原。
㈠適應(yīng)證：監(jiān)測(cè)乳腺癌的治療和病情進(jìn)展。
㈡標(biāo)本采集：血清、胸腹水、腦脊液。
㈢檢測(cè)方法：一般使用雙抗體夾心法酶免疫分析，115D8單克隆抗體作為捕捉抗體，使標(biāo)本中CA15-3結(jié)合到固相，單克隆抗體DF3作為檢測(cè)抗體，分析的靈敏度可＜1U/ml。
㈣參考范圍：血清＜25U/ml。
㈤臨床意義
1、乳腺癌：患者血清CA15-3呈不同程度升高，其升高的水平與乳腺癌瘤體的大小、分期和轉(zhuǎn)移等相關(guān)。不同分期的臨床靈敏度分別為：I期4%~16%，II期13%~54%，III期約60%，IV期54%~91%。由于對(duì)早期乳腺癌檢測(cè)的臨床靈敏度較低，血清CA15-3不推薦作為篩查和診斷指標(biāo)，但作為和監(jiān)測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移有一定價(jià)值。在13~40個(gè)月的治療后監(jiān)測(cè)中，CA15-3檢測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)的臨床靈敏度44%~77%，特異性為94%~98%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值41%~92%。腫瘤轉(zhuǎn)移時(shí)，血清CA15-3濃度升高。在判斷乳腺癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移方面，CA15-3增高比臨床癥狀出現(xiàn)和影像學(xué)檢查更敏感。
2、轉(zhuǎn)移性的乳腺癌、胰腺癌、肺癌、卵巢癌、胃癌、結(jié)腸直腸癌及肝癌時(shí)，血清CA15-3可升高。乳房和肝臟的良性疾病，如肝硬化、肝炎也見CA15-3的升高。
㈥評(píng)價(jià)與問(wèn)題：
1、CA15-3對(duì)蛋白酶和神經(jīng)酰胺酶敏感，標(biāo)本應(yīng)避免微生物污染所致的假陰性。不同試劑盒，盡管所用抗體相同，但仍可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的差異，參考范圍也不同。
2、與CEA相比，CA15-3在鑒別復(fù)發(fā)方面更具靈敏性。如果CEA與CA15-3聯(lián)合應(yīng)用于檢測(cè)乳腺癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，其靈敏度從30%~50%可增至80%。
六、糖類抗原72-4
糖類抗原72-4（carbohydrate antigen 72-4, CA72-4）是一種分子量為220~400KD的粘蛋白，有多個(gè)抗原決定族，可被單克隆抗體B72.3和CC49識(shí)別。CA72-4屬于胃腸道腫瘤和卵巢癌的標(biāo)志物。
㈠適應(yīng)證：胃癌、卵巢癌治療和病程的監(jiān)測(cè)。
㈡標(biāo)本采集：血清、腦脊液、胸腹水。
㈢檢測(cè)方法：用兩種單克隆抗體B72.3和CC49結(jié)合微粒子酶免疫或電化學(xué)法光免疫分析。
㈣參考范圍：血清＜6000U/L。
㈤臨床意義
1、胃腸道腫瘤
⑴胃癌：胃癌患者血清CA72-4濃度增高，臨床靈敏度約為40%~46%，高于CA19-9（平均為32%）和CEA（20%~24%），故常作為胃癌的首選腫瘤標(biāo)志物。胃癌術(shù)后1~2周，CA72-4水平可降至參考范圍內(nèi)。約70%的腫瘤復(fù)發(fā)病例CA72-4水平可再次升高，如果與CA19-9聯(lián)合檢測(cè)，其臨床靈敏度可達(dá)57%。
⑵結(jié)腸癌：血清CA72-4的臨床靈敏度為20%~41%。腫瘤完全切除后約18d內(nèi)，血清CA72-4可降低。如果長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)中發(fā)現(xiàn)CA72-4處于較高水平或進(jìn)一步增高，提示腫瘤殘留或復(fù)發(fā)。與CEA聯(lián)合檢測(cè)可使臨床診斷的靈敏度增加至43%~60%，早期監(jiān)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)的靈敏度為78%~87%。
2、卵巢癌：血清CA72-4的臨床靈敏度為47%~80%，并與腫瘤的分期相關(guān)。
3、其他惡性腫瘤：食管癌、胰腺癌、膽管癌、乳腺癌、子宮頸癌等血清CA72-4也可有不同程度升高。
4、良性疾病：少部分肝硬化、胰腺炎、肺炎、風(fēng)濕性疾病等患者，可見血清CA72-4的水平升高。
㈥評(píng)價(jià)與問(wèn)題
1、檢測(cè)方法：不同方法或不同廠商生產(chǎn)的試劑盒可能會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響，必要時(shí)應(yīng)建立本實(shí)驗(yàn)室的參考范圍。
2、健康人血清濃度變化：一般在1000~3000U/L之間，上限一般在3000~6000U/L。
七、前列腺特異抗原
前列腺特異抗原（prostate specific antigen, PSA）是一種由前列腺上皮細(xì)胞合成和分泌的單鏈糖蛋白，分子量33KD，具有絲氨酸蛋白酶活性。PSA屬于精漿的一種基本成分，在精液中的主要功能是防止精子凝集。生理狀況下，血清中只存在極低濃度的PSA，只有當(dāng)前列腺組織結(jié)構(gòu)被破壞時(shí)，如前列腺癌（prostatic cancer）、良性前列腺增生、急性前列腺炎、前列腺活檢等，PSA自由彌散進(jìn)入血液中。血清中大部分PSA與α1－抗糜蛋白酶（ACT）和α2-巨球蛋白（絲氨酸蛋白酶抑制物）形成穩(wěn)定的復(fù)合物，稱作復(fù)合PSA（C-PSA）。少量的PSA以未結(jié)合狀態(tài)存在，稱為游離PSA（F-PSA）。血清C-PSA和F-PSA之和為總PSA（total PSA, T-PSA），含量基本恒定。
㈠適應(yīng)證：50歲以上無(wú)癥狀男性可能存在前列腺癌的篩查，前列腺癌的診斷、治療前的分期、療效監(jiān)測(cè)。
㈡標(biāo)本采集：血清、胸腹水、腦脊液。
㈢檢測(cè)方法：ELISA、CLIA、ECLIA和MEIA等多種方法。
㈣參考范圍：血清T-PSA＜4μg/L，F(xiàn)-PSA＜0.93μg/L（ECLIA）。F-PSA/T-PSA＞0.11。
㈤臨床意義
1、前列腺癌的篩查
⑴血清PSA測(cè)定和直腸指檢相結(jié)合篩查：可以提高陽(yáng)性預(yù)測(cè)值（達(dá)50%），明顯高于單獨(dú)測(cè)定血清PSA（20%）或一般直腸指檢（10%）。美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)和泌尿科學(xué)會(huì)推薦50歲以上無(wú)癥狀男性應(yīng)一年一次檢查血清PSA和直腸指檢，以篩查前列腺癌；若有異常時(shí)，進(jìn)一步做經(jīng)直腸超聲檢查或活檢；通過(guò)這種方法，至少可比期望的壽命延長(zhǎng)10年。
⑵測(cè)定PSA增加的速率：血清PSA濃度每年增加＞0.75或0.8μg/L，提示存在前列腺癌，其靈敏度約為90%，特異性為90%~100%。
2、前列腺癌的診斷與鑒別診斷
⑴PSA只對(duì)器官特異不對(duì)腫瘤特異，因此在前列腺癌和良性前列腺增生之間的PSA值有相當(dāng)大部分的重疊。以T-PSA＞4.0μg/L為臨界值，診斷前列腺癌的靈敏度為50%～80%，而特異度僅為49%左右。
⑵在確診前列腺癌時(shí)，同時(shí)測(cè)定F-PSA和T-PSA，其特異性比單測(cè)T-PSA有顯著的提高。當(dāng)T-PSA在4～20μg/L時(shí)，F(xiàn)-PSA/T-PSA比值＜0.10，提示前列腺癌（前列腺癌患者血液中94%的PSA呈結(jié)合狀態(tài)），其靈敏度為86%、特異性為99%；比值＞0.25時(shí)，則可能為良性前列腺增生（前列腺增生患者血液中78%的PSA呈結(jié)合狀態(tài)），其特異性達(dá)90％。
⑶PSA檢測(cè)的臨床靈敏度與前列腺癌分期有關(guān)，I、II、III、IV腫瘤各期的靈敏度分別約為10%，24%，53%，92%。成功地接受了前列腺癌根除術(shù)、放射治療或雄激素治療后，PSA可降至參考范圍。若PSA不降或治療后再次升高則預(yù)后不良；PSA再次升高提示腫瘤復(fù)發(fā)，并且比其他指征可早2～6個(gè)月。
⑷PSA值超過(guò)參考范圍上限1～2倍的患者，其術(shù)后40周的存活率為50％，高于2倍以上患者生成期縮短，術(shù)后存活率為50％的生成期僅為18周。
㈥評(píng)價(jià)與問(wèn)題
1、前列腺按摩也可導(dǎo)致血清PSA的升高。血清PSA水平可隨年齡的增加而升高，有研究報(bào)告不同年齡男性的參考范圍：40~49歲≤2.5μg/L，50~59歲≤3.5μg/L，60~69歲≤4.5μg/L，70~79歲≤6.5μg/L。
2、良性前列腺增生或急性前列腺炎時(shí)，部分患者血清PSA水平升高，但升高的幅度較小，一般在4~10μg/L，極少數(shù)病例可＞10μg/L。
3、約有5%左右的前列腺癌患者，血清T-PSA水平不增加，但前列腺酸性磷酸酶（PAP）可升高，故將PSA與PAP聯(lián)合測(cè)定可提高前列腺癌診斷的靈敏度。
八、神經(jīng)元特異性烯醇化酶
烯醇化酶是糖酵解途徑中催化2-磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變成磷酸烯醇式丙酮酸的一種酸性蛋白酶，由α、β、γ三個(gè)亞基組成5種二聚體（αα、ββ、γγ、αβ、αγ）同工酶。α、β、γ亞基分別由不同細(xì)胞合成。γ亞基由機(jī)體各處，如小腸、肺和內(nèi)分泌器官，如甲狀腺、胰腺、腦垂體的神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞合成，形成γγ和αγ兩種烯醇化酶同工酶，故被稱為神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）。NSE并非神經(jīng)細(xì)胞所特有，神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞也能合成，故稱為γ烯醇化酶（γ-enolase）更合理。由于腫瘤組織中的糖酵解作用增強(qiáng)，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的NSE釋放入血增多，故測(cè)定血清或腦脊液中的含量對(duì)神經(jīng)元或神經(jīng)內(nèi)分泌起源有關(guān)腫瘤的診治有重要意義。
㈠適應(yīng)證：小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer）、神經(jīng)母細(xì)胞瘤（neuroblastoma）、甲狀腺髓樣癌等神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷、療效監(jiān)測(cè)等。
㈡標(biāo)本采集：血清、腦脊液、胸腹水。
㈢檢測(cè)方法：ECLIA和MEIA等方法。
㈣參考范圍：①成人：血清＜10μg/L，腦脊液＜20μg/L。②幼兒及兒童：＜1歲：血清＜25μg/L，1~5歲 血清＜20μg/L，6~8歲 血清＜18μg/L。
㈤臨床意義
1、肺癌
⑴肺癌的診斷：①小細(xì)胞肺癌：血清NSE增高，69%~77%的患者＞12.5μg/L，約40%的患者＞25μg/L。與CEA比較診斷小細(xì)胞肺癌，NSE的臨界值為11~12.5μg/L時(shí)，臨床靈敏度為60%~93%；CEA的臨界值為5.5~10μg/L時(shí)，臨床靈敏度為29%~69%。②其他肺癌：血清NSE增高的臨床靈敏度：非小細(xì)胞肺癌7%~25%，大細(xì)胞肺癌30%~38%，腺癌18%~30%，鱗狀細(xì)胞癌 13%~20%。
⑵肺癌的治療與復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)：小細(xì)胞肺癌化療過(guò)程中，在最初的化療后24~72h，由于腫瘤細(xì)胞破壞可致NSE短暫性升高，隨后的一周內(nèi)迅速降低。如果治療失敗，與治療前相比NSE水平持續(xù)上升或呈間斷性降低，但不能恢復(fù)至參考范圍。80%~96%治療有效的病例，血清NSE可處于參考范圍；腫瘤復(fù)發(fā)時(shí)增高，并可早于臨床復(fù)發(fā)前1~4個(gè)月。
2、神經(jīng)母細(xì)胞瘤：兒童神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者血清NSE可明顯升高，約62%病例可＞30μg/L，并且升高的幅度與腫瘤的分期相關(guān)。有研究報(bào)道不同分期患者血清NSE升高的中位數(shù)分別為：I期13μg/L，II期23μg/L，III期40μg/L，IV期214μg/L。
3、神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤：嗜鉻細(xì)胞瘤、胰島細(xì)胞瘤、甲狀腺髓樣癌、黑色素瘤、原發(fā)性腦腫瘤、腦轉(zhuǎn)移瘤等患者血清NSE也可見升高。
4、其他腫瘤：腎癌、乳腺癌、淋巴瘤、白血病、精原細(xì)胞瘤等患者血清NSE也可升高，精原細(xì)胞瘤轉(zhuǎn)移時(shí)增高顯著。
5、一些良性疾病也可有血清NSE增高，良性肺部疾病和神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如腦膜炎、彌漫性腦炎、腦缺血、腦梗死、顱內(nèi)出血、尿毒癥等。約一半的孕育胎兒神經(jīng)管缺陷的孕婦血清NSE可增高。
㈥評(píng)價(jià)與問(wèn)題
1、紅細(xì)胞中也存在NSE，標(biāo)本溶血時(shí)可使測(cè)定結(jié)果假性增高，采血時(shí)應(yīng)特別注意避免溶血。若用血漿標(biāo)本，應(yīng)高速離心分離，使其不含血小板，否則血小板可釋放NSE。
2、不同測(cè)定方法或試劑盒可能影響測(cè)定結(jié)果，而且參考范圍也有差別，已有報(bào)道為血清＜15或20μg/L。
3、腦脊液參考范圍：與性別和年齡無(wú)關(guān)，也有不同的報(bào)道，如＜6.8或6.3~15.3μg/L。腦脊液與血漿NSE濃度的比值為1.04±0.8。
九、鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原
鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen, SCC）是一種糖蛋白，分子量為48KD，于1977年首先在子宮頸鱗狀上皮癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)。后來(lái)在子宮、子宮頸、肺、頭頸等鱗狀上皮細(xì)胞癌的細(xì)胞質(zhì)均發(fā)現(xiàn)其存在，特別在非角化癌的大細(xì)胞中含量更豐富，但在消化道的一些正?；蛟錾涣嫉镊[狀上皮細(xì)胞也有表達(dá)。因此，SCC可作為鱗狀上皮細(xì)胞癌的標(biāo)志物，但并非特異性標(biāo)志物。
㈠適應(yīng)證：各種原發(fā)性或復(fù)發(fā)性鱗狀上皮細(xì)胞癌的輔助診斷，但主要用于監(jiān)測(cè)療效和疾病的進(jìn)程。
㈡標(biāo)本采集：血清、腦脊液、胸腹水。
㈢檢測(cè)方法：ELISA、ECLIA和MEIA等方法。
㈣參考范圍：＜1.5μg/L。
㈤臨床意義
1、子宮頸鱗狀上皮細(xì)胞癌：血清中SCC升高最明顯，陽(yáng)性率在初發(fā)者為45%~83%，復(fù)發(fā)者為66%~84%，并且升高的水平與腫瘤的分期相關(guān)。血清SCC濃度與患者淋巴結(jié)狀態(tài)和臨床癥狀相關(guān)，與癌細(xì)胞分化程度、患者年齡及其他實(shí)驗(yàn)檢查指標(biāo)無(wú)關(guān)。血清SCC濃度與腫瘤的病程和治療相關(guān)，手術(shù)或放療后2~7d，血清SCC可降至參考范圍；腫瘤復(fù)發(fā)時(shí)再次升高，并且可早于臨床復(fù)發(fā)1~14個(gè)月。血清SCC＞30μg/L的患者易復(fù)發(fā)，而且生存時(shí)間較短。治療后血清SCC持續(xù)2~6周處于高水平的患者復(fù)發(fā)率（約92%）較高。
2、肺癌：肺鱗狀上皮細(xì)胞癌患者的血清SCC增高，陽(yáng)性率為39%~78%，對(duì)所有肺癌的臨床靈敏度為18%~27%。在腫瘤切除后的兩天內(nèi)，血清SCC濃度可降至參考范圍；如果有腫瘤組織殘留，血清SCC濃度僅輕度下降；腫瘤復(fù)發(fā)時(shí)再次升高，而且可早于臨床復(fù)發(fā)4~5個(gè)月。
3、食管癌（esophageal cancer）：平均臨床靈敏度為30%~39%，并與腫瘤分期有關(guān)。I期0~27%，II期20%~40%，III期39%~61%，IV期45%~50%。成功治療后的食管癌，血清SCC濃度可降至參考范圍；持續(xù)增高或進(jìn)一步增高，提示腫瘤組織殘留；重新升高表明腫瘤復(fù)發(fā)。血清SCC水平不升高的食管癌患者，提示腫瘤處于原位、預(yù)后較好；而SCC增高則提示腫瘤擴(kuò)散、預(yù)后較差。
4、其他腫瘤：子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、陰道癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、胰腺癌等也可見血清SCC水平升高。
5、良性疾病：腎功能衰竭、肝硬化、肝炎、肺炎、結(jié)核病等，血清SCC水平可輕度升高。
㈥評(píng)價(jià)與問(wèn)題
1、由于SCC在汗液、唾液等體液中存在，標(biāo)本檢測(cè)應(yīng)注意避免干擾。
2、不同檢測(cè)方法或試劑盒檢測(cè)結(jié)果有差別，應(yīng)使用本實(shí)驗(yàn)室建立的參考范圍。
3、SCC作為子宮頸、肺、食道鱗狀上皮細(xì)胞癌的腫瘤標(biāo)志物與腫瘤的分期、治療、臨床表現(xiàn)和復(fù)發(fā)等相關(guān)，但缺乏足夠的臨床靈敏度和特異性，一般不適合作為臨床篩查腫瘤。
十、細(xì)胞角蛋白19片段
細(xì)胞角蛋白（cytokeratin）是一種支持蛋白，它與肌動(dòng)蛋白絲和微管一起形成細(xì)胞的骨架，這是上皮細(xì)胞的特征之一。細(xì)胞角蛋白包括20種不同的多肽，在血漿中不溶解，但被蛋白酶水解后形成的一些片段可溶于血漿中。細(xì)胞角蛋白19是一種分子量為36KD的最小的細(xì)胞角蛋白分子，既無(wú)器官特異性，也無(wú)腫瘤特異性。研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞角蛋白19被降解的片段，即細(xì)胞角蛋白19片段（cytokeratin 19 fragment）在惡性腫瘤患者血清中增高，尤其是非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）較為明顯。用BM21-1和KS19-1兩種單克隆抗體可以檢測(cè)細(xì)胞角蛋白19片段，故又將其稱為細(xì)胞角蛋白碎片21-1（cytokeratin fragment 21-1，CYFRA21-1）。
㈠適應(yīng)證：疑為肺癌的檢查，非小細(xì)胞肺癌的療效與病程監(jiān)測(cè)，膀胱癌的監(jiān)測(cè)。
㈡標(biāo)本采集：血清、胸水。
㈢檢測(cè)方法：用BM21-1和KS19-1兩種單克隆抗體相關(guān)的ELISA或電化學(xué)法光分析。
㈣參考范圍：血清＜2.0μg/L。
㈤臨床意義
1、肺癌
⑴診斷：血清CYFRA21-1增高診斷肺癌（與組織學(xué)分型無(wú)關(guān)）的臨床靈敏度為46%~61%。對(duì)小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer, SCLC）的臨床靈敏度為16%~52%，與NSE聯(lián)合檢測(cè)可提高至62%。對(duì)非NSCLC的臨床靈敏度為40%~64%；對(duì)鱗狀細(xì)胞癌的陽(yáng)性率可達(dá)52%~79%，優(yōu)于SCC和CEA，三者結(jié)合檢查并不能增加臨床靈敏度；腺癌和大細(xì)胞癌的臨床靈敏度分別為42%~54%和44%~65%，如果與CEA聯(lián)合檢查可提高約10%的靈敏度。原發(fā)性肺癌患者血清CYFRA21-1常＞30μg/L；轉(zhuǎn)移性肺癌，如胃癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、睪丸癌等，血清CYFRA21-1常＜30μg/L。
⑵療效監(jiān)測(cè)與預(yù)后判斷：由于在健康人的水平低、半壽期短，CYFRA21-1監(jiān)測(cè)療效較為靈敏和特異，在患者手術(shù)后48h以后即可觀察到變化。治療后腫瘤復(fù)發(fā)的患者，血清CYFRA21-1濃度可增高。CYFRA21-1濃度與患者預(yù)后有關(guān)，較高者比較低者的預(yù)后差。
2、膀胱癌：血清CYFRA21-1臨床靈敏度與腫瘤的分期有關(guān)，從0期~IV期的靈敏度為4%~16%和71%~73%；對(duì)早期檢測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)是一種合適的標(biāo)志物。
㈥評(píng)價(jià)與問(wèn)題
1、健康人與一些良性疾病患者的血清CYFRA21-1水平變化：約80%的健康人血清CYFRA21-1＜1.5μg/L，95%的人＜1.7μg/L，與年齡、性別、吸煙無(wú)關(guān)。在一些良性疾病，如肺、胃腸、婦科、泌尿道和腎功能不全時(shí)，血清CYFRA21-1可輕度升高，但其決定水平分別為3.3、6.9、3.1、2.4、5.2μg/L，＞10μg/L極少。
2、胸水CYFRA21-1：良性與惡性胸水的濃度可明顯不同，原發(fā)性與轉(zhuǎn)移性肺癌的胸水濃度未見差別。通常胸水CYFRA21-1的濃度比血清更高，但良性與惡性胸水測(cè)定值有交叉；當(dāng)臨界值為20.9μg/L時(shí)，診斷惡性胸水的臨床靈敏度為71%，特異性為82%。
細(xì)胞周期與DNA倍體分析是腫瘤學(xué)研究的重要檢測(cè)指標(biāo)，對(duì)反映一個(gè)細(xì)胞群體的增殖活性具有重要意義。細(xì)胞周期是指從上一次分裂結(jié)束開始生長(zhǎng)到下一次分裂終了所經(jīng)歷的過(guò)程。整個(gè)細(xì)胞周期分為靜止期（G0）、DNA合成前期（G1）、DNA合成期（S）、DNA合成后期（G2）和分裂期（M）。正常人靜止期細(xì)胞有46條染色體，稱之為二倍體細(xì)胞。在細(xì)胞周期的各個(gè)時(shí)期，DNA的含量隨各時(shí)相呈現(xiàn)出周期性的變化：在G1期，細(xì)胞開始RNA和蛋白質(zhì)的合成，但DNA含量仍保持二倍體；進(jìn)入S期后，DNA開始合成，這時(shí)細(xì)胞內(nèi)DNA的含量介于G1和G2期之間；當(dāng)DNA復(fù)制結(jié)束成為4倍體時(shí)，細(xì)胞進(jìn)入G2期，G2期細(xì)胞繼續(xù)合成RNA及蛋白質(zhì)，直到進(jìn)入M期（圖13-2-1）。因此，單純從DNA含量無(wú)法區(qū)分G2期和M期；一旦有絲分裂發(fā)生，細(xì)胞分裂為兩個(gè)子細(xì)胞，這兩個(gè)子細(xì)胞或者進(jìn)入下一個(gè)細(xì)胞周期，或者進(jìn)入靜止期（G0期），而G0期從DNA含量上同樣無(wú)法與G1期區(qū)分。因此，整個(gè)細(xì)胞周期DNA復(fù)制的倍體變化可以描述為G0/G1，S，G2/M期 。
腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞相比，最大的生物學(xué)特征是無(wú)限制和異常增殖。腫瘤細(xì)胞DNA含量的增加能充分反應(yīng)腫瘤的這種生物學(xué)特性，流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期和DNA 倍體已經(jīng)成為一種日益重要的腫瘤檢查方法，并已廣泛應(yīng)用于腫瘤基礎(chǔ)和臨床研究中，為腫瘤診斷，療效評(píng)價(jià)和預(yù)后判斷提供了重要的參考指標(biāo)。
㈠ 適應(yīng)證：血液腫瘤（淋巴瘤、白血病、骨髓瘤）和各種實(shí)體組織腫瘤。
㈡ 標(biāo)本采集：血液、骨髓、體液、穿刺液、活檢腫瘤組織、石蠟包埋組織等。液態(tài)標(biāo)本可用EDTA-K2或肝素抗凝送檢。從腫瘤或其周圍組織新鮮采集的活檢實(shí)體組織塊，一般有5×5mm以上大小即可，2h內(nèi)應(yīng)盡快送檢；如不能及時(shí)送檢，應(yīng)在2h內(nèi)直接放入-20℃以下的低溫冰箱凍存。
㈢ 檢測(cè)方法：流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期與DNA倍體，其原理為液體標(biāo)本制備成濃度為（1~5）×106的單細(xì)胞懸液；組織標(biāo)本經(jīng)單細(xì)胞樣本制備儀處理后配成（1~5）1×106的單細(xì)胞懸液。單細(xì)胞懸液經(jīng)固定、透膜處理、去處RNA后，用DNA特異性染料，如碘化丙啶（propidium iodide, PI）染色，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度，熒光強(qiáng)度大小與細(xì)胞內(nèi)的DNA含量成正比。FCM分析一個(gè)群體細(xì)胞峰DNA倍體與細(xì)胞周期時(shí)，將DNA含量以直方圖顯示，直方圖可分為三部分，即G0/G1、S、G2/M期三個(gè)細(xì)胞峰。G0/G1和G2/M細(xì)胞峰DNA的含量呈正態(tài)分布，S期細(xì)胞峰則是一個(gè)加寬的正態(tài)分布（圖13-2-2）。以正常外周血單個(gè)核細(xì)胞或正常組織作為已知DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)2倍體細(xì)胞，由此統(tǒng)計(jì)分析出細(xì)胞DNA的相對(duì)含量。經(jīng)過(guò)計(jì)算機(jī)軟件處理，可得到細(xì)胞周期各時(shí)相的百分比、DNA非整倍體數(shù)和DNA指數(shù)。
㈣ 參考范圍
1、DNA指數(shù)（DNA index，DI）：指樣本細(xì)胞與標(biāo)準(zhǔn)二倍體（diploid）細(xì)胞G0/G1峰的平均熒光強(qiáng)度的比值。二倍體細(xì)胞DI=0.9~1.1，四倍體細(xì)胞DI=1.9~2.1，DI在二倍體和四倍體范圍之外的稱非整倍體（aneuploid），包括亞二倍體、超二倍體等。
2、G0/G1、S、G2/M期細(xì)胞百分比作為判斷細(xì)胞增殖狀態(tài)的指標(biāo)，外周血淋巴細(xì)胞幾乎100%為G0/G1；骨髓細(xì)胞的G0/G1期一般占85%~90%左右，S期約站5%~10%，G2/M期約占2%~5%；其他細(xì)胞依組織來(lái)源不同有差別。
㈤ 臨床意義
正常細(xì)胞具有較恒定的DNA含量，而細(xì)胞惡變過(guò)程中結(jié)構(gòu)和/或染色體數(shù)量的異常較為常見，這種變化在流式細(xì)胞術(shù)分析中表現(xiàn)為DNA倍體數(shù)或DNA指數(shù)的異常，為腫瘤的早期診斷，交界瘤、間葉組織腫瘤的良惡性判斷提供了重要的輔助指標(biāo)。根據(jù)細(xì)胞各個(gè)時(shí)期的G0/G1%，S%及G2/M%分布狀態(tài)，可了解細(xì)胞的增殖能力，通常以S期細(xì)胞比率作為判斷腫瘤增殖狀態(tài)的指標(biāo)。DNA分析對(duì)臨床有價(jià)值的指標(biāo)是：非整倍體和/或超二倍體百分比和四倍體增高。一般而言，流式細(xì)胞術(shù)分析實(shí)體組織腫瘤細(xì)胞時(shí)，若出現(xiàn)DNA非整倍體峰、S期細(xì)胞＞15%、G2/M＞10%（四倍體峰顯著），多為惡性腫瘤；若S期細(xì)胞在10%~15%之間，并有突出的四倍體峰，為可疑惡性腫瘤。
1、腫瘤的早期診斷：DNA非整倍體出現(xiàn)可能提示癌前病變或早期癌變，形態(tài)學(xué)表現(xiàn)為良性腫瘤但出現(xiàn)非整倍體提示有惡變的可能性。
2、腫瘤的輔助診斷：實(shí)體惡性腫瘤大多有DNA非整倍體出現(xiàn)，但不同組織來(lái)原腫瘤非整倍體出現(xiàn)的百分比有差別，一般可達(dá)70%以上。白血病患者僅有30%左右的出現(xiàn)非整倍體（圖13-2-3），多發(fā)性骨髓瘤非整倍體出現(xiàn)可達(dá)60~80%。
3、腫瘤的療效觀察與預(yù)后判斷：一般二倍體或近二倍體腫瘤預(yù)后優(yōu)于非整倍體腫瘤。非整倍體腫瘤的惡性度高、復(fù)發(fā)率高、轉(zhuǎn)移率高、死亡率高，腫瘤治療后非整倍體出現(xiàn)提示腫瘤復(fù)發(fā)。
4、各種體液和穿刺液中腫瘤脫落細(xì)胞的DNA倍體與細(xì)胞周期檢查：可為腫瘤的診斷提供更多的信息，結(jié)合細(xì)胞學(xué)檢查和腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)可得到更準(zhǔn)確的結(jié)果。如胸腹水細(xì)胞出現(xiàn)DNA非整倍體提示惡性腫瘤；尿液中脫落細(xì)胞CD15表達(dá)與DNA倍體分析可提高膀胱癌篩查的靈敏度。
㈥ 評(píng)價(jià)與問(wèn)題
1、DNA含量分析中的精密度尤為重要，通常檢測(cè)以G0/G1期的變異系數(shù)（CV）來(lái)反映，CV應(yīng)＜8%。如果CV太大，可影響亞二倍體、超二倍體、G0/G1和S期分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2．應(yīng)盡量減少細(xì)胞碎片和細(xì)胞聚集，較多的碎片會(huì)干擾亞二倍體分析，細(xì)胞聚集也會(huì)妨礙分析四倍體。
3．只有在染色體數(shù)目的變化引起的DNA含量差異可被檢測(cè)時(shí)，才可能有DNA非整倍體的檢出。因此，DNA含量的無(wú)異?；驘o(wú)非整倍體，不能除外惡性腫瘤或染色體結(jié)構(gòu)異常的存在。
腫瘤的發(fā)生是一個(gè)復(fù)雜的多因素相互作用的過(guò)程，既有環(huán)境因素又有遺傳因素的參與，涉及到多種相關(guān)基因包括癌基因(oncogene)和抑癌基因(tumor suppressor gene)的變異。癌基因參與或直接導(dǎo)致正常細(xì)胞發(fā)生惡性改變，抑癌基因可抑制細(xì)胞生長(zhǎng)并具有潛在的抑制細(xì)胞癌變作用。一種腫瘤可有多種基因的異常，而同一種基因的改變也可在不同種類腫瘤的發(fā)生中起重要作用，大多數(shù)腫瘤的發(fā)生與癌基因的活化和（或）腫瘤抑制基因的失活有關(guān)。近十年來(lái)，隨著細(xì)胞和分子生物學(xué)理論與技術(shù)的研究進(jìn)展及各種基因診斷技術(shù)的成熟，腫瘤基因的分子生物學(xué)檢測(cè)已開始應(yīng)用于臨床。
一、適應(yīng)證：疑為腫瘤病人的輔助診斷、預(yù)后判斷及發(fā)病機(jī)制研究等。
二、標(biāo)本采集
㈠實(shí)體瘤組織標(biāo)本：根據(jù)癌基因和抑制基因類型及研究目的選擇。
1、基因序列異常導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生，以瘤組織DNA作為檢測(cè)標(biāo)本。
2、基因表達(dá)的變化導(dǎo)致了腫瘤的發(fā)生，則應(yīng)從瘤組織中提取RNA作為檢測(cè)標(biāo)本。
3、若欲在腫瘤原位觀察、檢測(cè)突變的癌基因或腫瘤抑制基因，可取腫瘤組織作切片，進(jìn)行DNA原位雜交分析。
4、腫瘤組織細(xì)胞癌基因或抑癌基因表達(dá)產(chǎn)物分析：可直接取腫瘤組織制備成單細(xì)胞懸液后檢測(cè)。
㈡其它標(biāo)本：人的外周血、胸腹水、痰、糞、尿等標(biāo)本中的少量腫瘤細(xì)胞，通過(guò)富集后可進(jìn)行基因檢測(cè)。但目前的實(shí)驗(yàn)技術(shù)還處于研究和發(fā)展中。
三、檢測(cè)方法
由于腫瘤的發(fā)生涉及多基因、多環(huán)節(jié)，并且腫瘤基因突變呈多種多樣，從而使腫瘤基因的檢測(cè)不可能象各種病原體的基因檢測(cè)一樣特異。對(duì)于某一癌基因和腫瘤抑制基因可能存在多種檢測(cè)手段，而具體采用哪些檢測(cè)手段，應(yīng)取決于基因突變的性質(zhì)。癌基因和抑癌基因的突變性質(zhì)一般包括三類：基因序列異常，基因表達(dá)異常和突變基因的積累。
㈠基因序列異常的檢測(cè)
癌基因和抑癌基因的序列異常主要包括點(diǎn)突變和片段性突變，甚至缺失。檢測(cè)這些異常的主要技術(shù)有PCR產(chǎn)物的限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析、等位基因特異性寡核苷酸雜交、單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析和變性梯度凝膠電泳。
1、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（restriction fragment length polymorphism, RFLP）分析：由于DNA分子組成的堿基變異，可能導(dǎo)致限制性酶切點(diǎn)的消失或新的切點(diǎn)出現(xiàn)，從而引起不同個(gè)體在用同一限制酶切割時(shí)，DNA片段長(zhǎng)度出現(xiàn)差異，這種由于內(nèi)切酶切點(diǎn)變化所導(dǎo)致的DNA片段長(zhǎng)度的差異稱為RFLP。RFLP可用Southern印跡雜交或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物酶解法檢出。
2、等位基因特異性寡核苷酸（allele-specific oligonucleotide，ASO）雜交：當(dāng)基因的突變部位和性質(zhì)已完全明了時(shí)，可以合成等位基因特異的寡核苷酸探針，用同位素或其他標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè)。
3、聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性(PCR-single strand comformation polymorphism，PCR-SSCP)分析：是1989年Crita建立的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物單鏈DNA凝膠電泳技術(shù)，指單鏈DNA由于堿基序列的不同可引起構(gòu)象差異，這種差異將造成相同或相近長(zhǎng)度的單鏈DNA電泳遷移率不同，從而可用于DNA中單個(gè)堿基的替代、微小的缺失或插入的檢測(cè)。
4、變性梯度凝膠電泳（denaturing gradient gel electrophoresis，DGGE）：DNA分子的物理特性之一是當(dāng)DNA分子被加熱至其融點(diǎn)溫度（Tm）時(shí)，DNA分子的雙鏈被打開。Tm取決于DNA分子本身的序列，即不同序列的DNA分子具有不同的Tm。DGGE技術(shù)正是利用了DNA分子的這一特征，在設(shè)計(jì)引物時(shí)使被擴(kuò)增的目的片段含有2個(gè)不同的區(qū)域，其中1個(gè)區(qū)域的Tm較高，另一個(gè)較低。將這一PCR產(chǎn)物在由變性劑形成的梯度膠上進(jìn)行電泳，片段中Tm較低一端的雙鏈被部分解鏈，致使該片段的電泳遷移率大大降低。由于正常序列的PCR產(chǎn)物片段與突變的PCR產(chǎn)物的Tm不同，它們?cè)陔娪具^(guò)程中部分解鏈的先后不同。據(jù)此，可以區(qū)別正常片段還是突變片段。
㈡基因表達(dá)異常的檢測(cè)：一些腫瘤的發(fā)生與基因表達(dá)異常有關(guān)?；虮磉_(dá)異常通常用RNA印跡技術(shù)和RT-PCR技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，這兩種方法都是對(duì)mRNA進(jìn)行半定量檢測(cè)。
1、RNA印跡：是將RNA變性并經(jīng)電泳分離后，轉(zhuǎn)移到固相支持物上，再進(jìn)行雜交，以鑒定相應(yīng)的mRNA的分子量大小及含量的變化。
2、RT-PCR：是從某一特定組織細(xì)胞或外周血中抽提出RNA后，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，RNA被逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，再將cDNA作為模板進(jìn)行PCR。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)凝膠分離后通過(guò)掃描條帶的密度可得出相對(duì)的mRNA的含量。
㈢基因突變積累的檢測(cè)：腫瘤的發(fā)生不僅涉及到癌基因和抑癌基因的質(zhì)的變化，同時(shí)涉及到基因量變的積累。定量PCR技術(shù)在腫瘤基因檢測(cè)中有重要意義。熒光定量PCR技術(shù)和分子信標(biāo)探針技術(shù)是目前常用的兩種定量PCR技術(shù)。這兩種技術(shù)由于熒光分子基團(tuán)數(shù)與PCR擴(kuò)增的拷貝數(shù)是一對(duì)一的關(guān)系，因此這一方法可作為較理想的定量技術(shù)；同時(shí)這兩種技術(shù)檢測(cè)系統(tǒng)能同步顯示PCR反應(yīng)的過(guò)程和擴(kuò)增結(jié)果，無(wú)須反應(yīng)結(jié)束后取出產(chǎn)物進(jìn)行分析，從而避免了污染。
近年來(lái)，毛細(xì)管電泳技術(shù)由于其快速、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，已被許多學(xué)者應(yīng)用于腫瘤基因的檢測(cè)。把毛細(xì)管電泳技術(shù)與分子信標(biāo)技術(shù)相結(jié)合，檢測(cè)胃癌抑癌基因P16已獲得了成功，這使基因檢測(cè)技術(shù)進(jìn)入一個(gè)新階段。
㈣癌或抑癌基因表達(dá)產(chǎn)物測(cè)定：一般用熒光素標(biāo)記的單克隆抗體與腫瘤組織的單細(xì)胞懸液反應(yīng)后，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)其表達(dá)量。也可用免疫分析法檢測(cè)血清中可溶性表達(dá)產(chǎn)物的含量。
四、臨床意義
㈠癌基因激活、突變或過(guò)度表達(dá)
1、腫瘤的輔助診斷：與臨床診斷有關(guān)的癌基因一般分三類：一類是腫瘤非特異性基因，如C-MYC、H-RAS、K-RAS、C-FOS等，在許多類型的腫瘤中都可以檢測(cè)到；第二類是腫瘤特異性基因，如視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤與RB基因、慢性粒細(xì)胞白血病與BCR-ABL融合基因、急性早幼粒細(xì)胞白血病與PML-RARα融合基因等。第三類是暫未證明其臨床意義的癌基因，如SCR、FPS、MOS、YES基因等。目前用于臨床輔助診斷的癌基因主要是第一類和第二類。RAS基因是人類腫瘤中最易被激活的癌基因，最常見的突變是第12、13、或61位密碼子突變；90%的胰腺癌和50%的結(jié)腸癌有K-RAS基因第12位密碼子突變。
⑵腫瘤治療與預(yù)后判斷：應(yīng)用癌基因進(jìn)行預(yù)后判斷最具有說(shuō)服力的例子是兒童急性白血病。若患有急性淋巴細(xì)胞白血病的兒童的白血病細(xì)胞中含有TEL-AML1融合基因，治療失敗的風(fēng)險(xiǎn)較低；反之如果白血病細(xì)胞中含有BCR-ABL融合基因，治療失敗的風(fēng)險(xiǎn)則較高，此時(shí)采取同種異體的干細(xì)胞移植可能為最佳選擇。另外，神經(jīng)母細(xì)胞瘤不管是處于早期還是晚期，若發(fā)現(xiàn)第1號(hào)染色體短臂缺失和N-MYC基因過(guò)度表達(dá)，患者的預(yù)后較差。乳腺癌患者出現(xiàn)HER2/neu基因過(guò)度表達(dá)，則預(yù)后差，若用HER2/neu基因表達(dá)抗原的單克隆抗體治療可取的較好的療效。
㈡腫瘤抑制基因突變、丟失
1、腫瘤的輔助診斷：腫瘤抑制基因的數(shù)量較少，有診斷價(jià)值的主要是RB、P53、BRCA、APC、WT-1、NF-1、NF-2等基因。P53基因是與人類腫瘤相關(guān)性最密切的基因，有資料表明P53基因的突變與多種惡性腫瘤有關(guān)，主要異常為點(diǎn)突變，常為第175、248、273位密碼子突變。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤（retinoblastoma, RB）基因定位于13號(hào)染色體，RB常因缺失突變而失去抑制細(xì)胞生長(zhǎng)和致瘤作用，導(dǎo)致視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤發(fā)生。結(jié)腸多發(fā)性腺瘤樣息肉病（adenomatous polyposis coli, APC）基因定位于5號(hào)染色體，突變主要包括點(diǎn)突變和框架移動(dòng)突變，在遺傳性結(jié)直腸癌的發(fā)生中起著關(guān)鍵作用。多發(fā)性神經(jīng)纖維瘤易感基因（neurofibromatosis type 1, NF1）定位于17號(hào)染色體，具有抑制細(xì)胞增殖的功能。Wilms腫瘤易感基因（Wilms tumor type 1, WT1）定位于11號(hào)染色體，在絕大多數(shù)Wilms腫瘤中有高表達(dá)。BRCA1基因的突變與乳腺癌、卵巢癌的易感性有關(guān)。
2、預(yù)后判斷：應(yīng)用腫瘤抑制基因進(jìn)行預(yù)后判斷有一定意義，如膀胱癌病人出現(xiàn)RB基因雜合性缺失，表明預(yù)后較差；胃癌病人中發(fā)現(xiàn)P53雜合性缺失，說(shuō)明具有侵襲性。
㈢癌和抑癌基因表達(dá)產(chǎn)物
1、癌基因表達(dá)產(chǎn)物
⑴RAS基因蛋白：RAS基因編碼酪氨酸激酶，位于1號(hào)染色體短臂，在多種腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有RAS癌基因的激活，其編碼蛋白產(chǎn)物的分子量為21kD，稱為P21蛋白。P21蛋白主要定位在多種腫瘤細(xì)胞和非腫瘤細(xì)胞的胞膜內(nèi)側(cè)和胞質(zhì)內(nèi)。P21在乳腺癌、肺癌、胃癌等細(xì)胞有過(guò)量表達(dá)；在早期膀胱癌表達(dá)增高，被認(rèn)為是腫瘤早期階段的標(biāo)志物。有研究發(fā)現(xiàn)P21蛋白表達(dá)與腫瘤的DNA倍體和細(xì)胞增殖有關(guān)，DNA非整倍體腫瘤明顯高于二倍體腫瘤；P21蛋白表達(dá)的腫瘤S期細(xì)胞高于不表達(dá)者。此外，P21蛋白高表達(dá)者的復(fù)發(fā)率和死亡率高于不表達(dá)者。
⑵HER-2/neu基因蛋白：HER-2/neu癌基因過(guò)度表達(dá)與乳腺癌有密切關(guān)系，其編碼蛋白產(chǎn)物的分子量為185kD，可以激活酪氨酸激酶，P185蛋白過(guò)度表達(dá)可見于多種腫瘤，如乳腺癌、卵巢癌、肝癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、皮膚基底細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌等，尤其是乳腺癌患者的無(wú)病生存期明顯縮短，而且易復(fù)發(fā)。
2、P53基因蛋白：P53基因?qū)儆谝职┗颍蛔兣c多種惡性腫瘤有關(guān)，突變后表達(dá)的P53蛋白比未突變者的半衰期延長(zhǎng)，在細(xì)胞內(nèi)堆積，用流式細(xì)胞術(shù)可進(jìn)行檢測(cè)。有研究表明P53蛋白的表達(dá)量與肺癌、乳腺癌的分化程度相關(guān)，小細(xì)胞肺癌的表達(dá)量明顯高于分化型的肺癌，P53蛋白陽(yáng)性的乳腺癌生存期比陰性者縮短。胃腸道腫瘤、肝細(xì)胞癌等也常見表達(dá)。
㈣多藥耐藥基因蛋白：腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐受性是腫瘤治療的主要障礙，多藥耐藥（multi-drug resistance, MDR）蛋白包括P糖蛋白、多藥耐藥相關(guān)蛋白等。P糖蛋白（P-gp）是一種由多藥耐藥基因（mdr-1）編碼的、具有ATP酶活性的跨膜蛋白，當(dāng)腫瘤細(xì)胞與抗癌藥物接觸時(shí)，脂溶性藥物按濃度梯度進(jìn)入細(xì)胞，在細(xì)胞內(nèi)，藥物與P糖蛋白結(jié)合后將藥物從細(xì)胞內(nèi)泵出，細(xì)胞內(nèi)藥物濃度不斷下降，使藥物對(duì)細(xì)胞的損傷減弱直至消失，最終出現(xiàn)耐藥?？烧T導(dǎo)P糖蛋白過(guò)度表達(dá)產(chǎn)生耐藥的藥物有蒽環(huán)類、長(zhǎng)春新堿、柔紅霉素、放線菌素D和紫杉醇等，當(dāng)這些藥物誘導(dǎo)發(fā)生耐藥時(shí)，即可同時(shí)對(duì)其他各類藥物產(chǎn)生交叉耐藥。一些研究表明P糖蛋白高表達(dá)的腫瘤患者對(duì)化療不敏感、療效差、緩解率低。
五、評(píng)價(jià)與問(wèn)題
㈠腫瘤原癌基因或抑癌基因的改變，包括突變、缺失、易位等，屬于腫瘤的基因標(biāo)志，但并不一定就是腫瘤產(chǎn)生的原因，因?yàn)槟[瘤是多基因、多階段累積的結(jié)果，目前大多數(shù)腫瘤并未發(fā)現(xiàn)特異的基因改變。因此，采用ELISA和流式細(xì)胞分析等技術(shù)檢測(cè)其在血清或細(xì)胞中的表達(dá)產(chǎn)物量，并結(jié)合基因診斷結(jié)果綜合分析，對(duì)腫瘤的分類、發(fā)病機(jī)制研究、診斷與鑒別診斷、療效監(jiān)測(cè)、藥物選擇、預(yù)后判斷等更有意義。
㈡腫瘤的基因診斷及有關(guān)基因表達(dá)產(chǎn)物的測(cè)定目前尚處于臨床研究和早期應(yīng)用階段，在臨床腫瘤的診治中僅供參考，尚未作為診斷的必須依據(jù)，但檢查到一些腫瘤特異性基因表達(dá)時(shí)對(duì)肯定診斷有意義。
一、惡性腫瘤的實(shí)驗(yàn)診斷策略
臨床腫瘤的診斷一般主要靠病史、臨床表現(xiàn)、物理診斷（如B超、CT等）和病理學(xué)診斷等，尤其是腫瘤組織的病理切片檢查是確診腫瘤最重要手段之一。目前，上述這些手段往往都難以達(dá)到早期診斷，有可能使患者錯(cuò)過(guò)治療的最佳時(shí)期；而且在腫瘤治療過(guò)程中的療效監(jiān)測(cè)、復(fù)發(fā)判斷等方面缺乏足夠的靈敏度。腫瘤的實(shí)驗(yàn)診斷可以彌補(bǔ)上述診斷手段的一些不足，與其配合可以為腫瘤的篩查、診斷（部分腫瘤可能達(dá)到早期診斷）提供一些十分有價(jià)值的指標(biāo)，而且更重要的是對(duì)腫瘤的療效評(píng)估、復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)及預(yù)后判斷等有重要的臨床意義。
㈠高危人群腫瘤的早期篩查
目前，雖然大部分腫瘤還難以通過(guò)實(shí)驗(yàn)診斷進(jìn)行普通人群的大規(guī)模篩查，但通過(guò)對(duì)腫瘤標(biāo)志物、腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物等的檢測(cè)有助于部分腫瘤高危人群的篩查和腫瘤風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估。例如，血清甲胎蛋白（AFP）檢測(cè)可以作為慢性乙型肝炎及其所致的肝硬化患者篩查原發(fā)性肝細(xì)胞癌；血液和尿液絨毛膜促性腺激素（hCG）測(cè)定可用于高危人群的絨毛膜上皮癌的篩查；血清AFP和hCG測(cè)定可篩查有家族史人群的生殖細(xì)胞腫瘤；血清前列腺特異性抗原（PSA）檢測(cè)可用于50歲以上無(wú)癥狀男性前列腺癌的篩查；血清降鈣素（calcitonin）測(cè)定可篩查有家族史的甲狀腺髓樣癌。但是，目前大部分腫瘤標(biāo)志物、腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物等的器官特異性和靈敏度均較低，難于用作臨床篩查或普查。
㈡腫瘤的實(shí)驗(yàn)診斷
1、特異性診斷：主要依據(jù)腫瘤的特異性標(biāo)志物，包括血清腫瘤標(biāo)志物、染色體特異性畸變、腫瘤特異性基因等的檢測(cè)，如前列腺特異性抗原（PSA）、甲狀腺球蛋白（TG）具有極高的器官特異性，血清中顯著升高時(shí)對(duì)診斷前列腺癌和甲狀腺癌具有高度特異性；Ph1染色體、t(9;22)(q34;q11)、BCR-ABL基因重排陽(yáng)性，可特異性診斷慢性粒細(xì)胞白血病；t(8;21)(q22;q22)和AML-ETO融合基因、t(15;17)(q22;q21)和PML-RARα融合基因分別是診斷急性原粒細(xì)胞白血病（AML-M2）和急性早幼粒細(xì)胞白血?。ˋML-M3）的特異性標(biāo)志。但是，目前所發(fā)現(xiàn)的腫瘤診斷特異性標(biāo)志物太少，其他腫瘤相關(guān)標(biāo)志物僅能用于腫瘤的輔助診斷。
2、輔助診斷：通過(guò)血液或體液腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)、細(xì)胞周期與DNA倍體分析、染色體核型與熒光原位雜交（FISH）、原癌基因與抑癌基因分析，可以輔助腫瘤的診斷、鑒別診斷和分型等。目前，血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)在臨床腫瘤的輔助診斷中應(yīng)用最普遍，例如，血清AFP顯著升高常見于肝癌；血清癌胚抗原（CEA）顯著升高可見于結(jié)腸癌、肝癌、膽囊癌、胰腺癌、肺癌等；血清CA125和CA153顯著升高主要見于卵巢癌和乳腺癌。前列腺癌時(shí)血清PSA的升高；滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤時(shí)血清hCG的升高。由于一種腫瘤可有多種腫瘤標(biāo)志物的血清濃度顯著升高，而每一種腫瘤標(biāo)志物對(duì)某種腫瘤診斷的臨床靈敏度和特異性又有明顯差別，臨床常常將幾種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)，既能增加靈敏度又可提高特異性。但是，不同實(shí)驗(yàn)診斷指標(biāo)在取不同的臨界值時(shí)，其診斷的靈敏度和特異性有顯著差別。
㈢腫瘤的預(yù)后估計(jì)：一些腫瘤的血清標(biāo)志物、DNA倍體變化、染色體畸變種類和腫瘤相關(guān)基因表達(dá)水平等與腫瘤的預(yù)后相關(guān)。血清標(biāo)志物濃度變化，例如AFP、hCG與生殖細(xì)胞腫瘤，CEA、CA19-9與結(jié)腸癌，CA125與卵巢癌、β2微球蛋白與多發(fā)性骨髓瘤的預(yù)后有關(guān)；DNA倍體為2倍體或近二倍體的腫瘤比非整倍體腫瘤的預(yù)后好；HER2/neu基因表達(dá)、HER2/neu基因表達(dá)蛋白增加的乳腺癌患者預(yù)后較差。
㈣腫瘤的治療指導(dǎo)與療效監(jiān)測(cè)：腫瘤的有關(guān)實(shí)驗(yàn)檢查對(duì)指導(dǎo)臨床用藥有一定意義，如t(15;17)染色體易位、表達(dá)PML-RARα基因的急性白血病患者對(duì)全反式維甲酸誘導(dǎo)治療易獲得緩解；表達(dá)HER2/neu基因的乳腺癌患者，對(duì)Herceptin（一種抗HER2/neu受體的基因工程抗體）治療有效。在腫瘤切除或放化療有效時(shí)，大部分血清腫瘤標(biāo)志物濃度可以顯著降低；如果下降緩慢、甚至長(zhǎng)時(shí)間不能降至參考范圍，提示手術(shù)或其他治療不成功或預(yù)后不良。因此，根據(jù)腫瘤標(biāo)志物濃度減低水平的動(dòng)態(tài)變化，可監(jiān)測(cè)腫瘤的治療效果、有無(wú)腫瘤組織殘留等。
㈤腫瘤復(fù)發(fā)的早期監(jiān)測(cè)：腫瘤術(shù)后或放化療后，依據(jù)腫瘤類型不同，需要對(duì)患者進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，尤其是簡(jiǎn)便、無(wú)創(chuàng)傷、早期的檢查更有意義和實(shí)用價(jià)值。一些血清腫瘤標(biāo)志物濃度在下降后又持續(xù)升高是腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的指征，而且這種變化在許多情況下可比臨床癥狀或影像學(xué)改變提前出現(xiàn)幾個(gè)月，對(duì)復(fù)發(fā)患者的早期治療具有重要意義。腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)時(shí)，聯(lián)合檢測(cè)兩種以上可提高臨床靈敏度。
㈥腫瘤標(biāo)志物應(yīng)用時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題
1、采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）或免疫放射分析法（IRMA）、微粒子酶免疫分析（MEIA）、電化學(xué)法光免疫分析（ECLIA）等檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物時(shí)，同一份標(biāo)本使用不同方法或不同品牌的試劑盒時(shí)，檢查結(jié)果可出現(xiàn)差異，其原因可能是由于使用的抗體抗同一抗原的不同位點(diǎn)所致；有時(shí)即使使用同一抗體，也可能因抗原異質(zhì)性（如原發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移后，失去了原有的抗原性或停止分泌原有的腫瘤抗原）或基質(zhì)的影響得到不同的結(jié)果，造成腫瘤緩解或進(jìn)展的假象，這種現(xiàn)象特別容易發(fā)生在療效評(píng)價(jià)中。因此，在對(duì)患者的連續(xù)監(jiān)測(cè)中，在同一實(shí)驗(yàn)室用同一方法所測(cè)結(jié)果才有可比性。
2、不同方法或試劑盒的參考范圍有差別，應(yīng)使用本實(shí)驗(yàn)室建立的參考范圍。
3、對(duì)于患有同一種腫瘤或同一器官腫瘤的不同個(gè)體，不能通過(guò)腫瘤標(biāo)志物濃度高低對(duì)腫瘤的大小、分期與進(jìn)程、預(yù)后等進(jìn)行對(duì)比，因?yàn)橛行┠[瘤雖已發(fā)展至晚期，但腫瘤標(biāo)志物分泌的水平可不高或不分泌。
㈠食管癌（esophageal cancer）：我國(guó)是食管癌的高發(fā)國(guó)家，又是食管癌死亡率最高的國(guó)家。食管癌組織學(xué)類型分為鱗狀上皮癌、腺癌、未分化癌、癌肉瘤。最常見的食管惡性腫瘤是食管鱗狀上皮癌（squamous cell carcinoma of esophagus）。國(guó)內(nèi)將食管癌的臨床病理分期分為0、I~IV期。早期食管癌的癥狀常不明顯，食道脫落細(xì)胞檢查有較高的陽(yáng)性率。
1、血清腫瘤標(biāo)標(biāo)志物檢測(cè)：對(duì)食道鱗癌最敏感的是SCC，其次為CEA、CA19-9；SCC升高的陽(yáng)性率與腫瘤的分期有關(guān)，SCC、CEA和CA19-9三種標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)可提高I期腫瘤診斷的靈敏度，但不能用于食管癌篩查。治療前有必要檢測(cè)，可為療效觀察、復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)等提供依據(jù)。
2、細(xì)胞周期與DNA倍體分析：流式細(xì)胞術(shù)分析食管癌患者的食道活檢組織細(xì)胞，可見DNA非整倍體；而且發(fā)現(xiàn)DNA非整倍體與食道鱗狀上皮細(xì)胞癌的分期和組織學(xué)分級(jí)相關(guān)；有DNA非整倍體的鱗狀上皮細(xì)胞癌比二倍體腫瘤患者的預(yù)后更差。
3、腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)：食管癌及其癌旁上皮組織中H-RAS、C-MYC基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物明顯增加，RB基因完全或部分片段丟失以及重排。在食管癌變過(guò)程中P53是常見的基因變化，食管癌中APC基因亦有變化。用Southern法分析食管癌組織中轉(zhuǎn)化基因，在轉(zhuǎn)化的DNA中發(fā)現(xiàn)H-RAS，從轉(zhuǎn)化的細(xì)胞中分離出P21蛋白，用PCR方法證明第12位密碼子突變。
4、其他檢查：食管癌患者血清sIL-2R水平可升高，血液淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)CD4+T淋巴細(xì)胞明顯減低，而CD8+T淋巴細(xì)胞增高，NK細(xì)胞也較低。
㈡胃癌（gastric cancer）：胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，在我國(guó)的惡性腫瘤死亡率中占首位。約95%的胃癌為胃腺癌，根據(jù)WHO的組織病理分類可分為：①乳頭狀腺癌，②管狀腺癌，③低分化腺癌，④粘液腺癌，⑤印戒細(xì)胞癌，⑥未分化癌，⑦特殊型癌，包括類癌、腺鱗癌、鱗狀細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌等。根據(jù)胃癌形態(tài)特點(diǎn)，將進(jìn)展期胃癌分為I~IV期。早期胃癌一般無(wú)明顯癥狀，中晚期時(shí)可發(fā)生消化道出血。
1、糞隱血試驗(yàn)：由于胃癌患者常有慢性胃出血，可呈持續(xù)陽(yáng)性，重者可見嘔血或黑便。一些患者常因體檢查糞便隱血試驗(yàn)陽(yáng)性而被發(fā)現(xiàn)，尤其是對(duì)40歲以上男性、近期出現(xiàn)消化不良或上消化道出血者應(yīng)警惕。由于本試驗(yàn)方便、快速，臨床可作為胃癌的篩查試驗(yàn)，持續(xù)陽(yáng)性者進(jìn)一步做血清腫瘤標(biāo)標(biāo)志物檢測(cè)，并結(jié)合胃鏡、病理活檢等，?？稍缙谠\斷。
2、全血細(xì)胞計(jì)數(shù)：約50%的胃癌患者因慢性出血或營(yíng)養(yǎng)缺乏而導(dǎo)致缺鐵性貧血，部分患者可因維生素B12吸收障礙引起惡性貧血，呈大細(xì)胞性貧血的血液學(xué)改變。對(duì)近期出現(xiàn)原因不明的貧血并伴有糞隱血試驗(yàn)持續(xù)陽(yáng)性者應(yīng)進(jìn)一步檢查。
3、血清腫瘤標(biāo)標(biāo)志物檢測(cè)：胃癌患者血清CA72-4、CA19-9、CEA均可增高，但與胃癌的臨床分期有關(guān)，三種標(biāo)志物同時(shí)測(cè)定可提高對(duì)胃癌高危人群早期診斷的靈敏度（高于單項(xiàng)測(cè)定10%~20%），尤其CA72-4對(duì)鑒別良性與惡性有較高的特異性。但是，由于其臨床靈敏度仍較低，即使三者聯(lián)合測(cè)定，也難用于普通人群的篩查和早期診斷。術(shù)前CA72-4、CA19-9測(cè)定可作為療效觀察、預(yù)后與復(fù)發(fā)判斷指標(biāo)。
三種腫瘤標(biāo)志物在胃癌不同臨床分期時(shí)的靈敏度（平均值）比較
臨床分期 CA72-4（>6U/L）% CA19-9（>37U/L）% CEA（>5ng/L）%
IA期 11 33 0
IB期 20 20 13
II期 13 6 19
IIIA期 46 42 25
IIIB期 41 28 21
IV期 58 42 37
腫瘤復(fù)發(fā)期 56 32 11
4、細(xì)胞周期與DNA倍體分析：對(duì)通過(guò)胃鏡取出的或手術(shù)切除的胃組織，用流式細(xì)胞術(shù)分析其細(xì)胞周期和DNA倍體，可有DNA非整倍體存在。有非整倍體者預(yù)后較差（特別是在III和IV期），并且與腫瘤的大小和較高的組織學(xué)分級(jí)相關(guān)；無(wú)論早期或進(jìn)展期的胃癌，細(xì)胞的增殖活性較低（低的S期細(xì)胞比例）者有較好的預(yù)后。
5、細(xì)胞免疫：胃癌患者可表現(xiàn)為T輔助細(xì)胞（Th）減少，T抑制細(xì)胞（Ts）增加和Th/Ts比值下降。隨著腫瘤進(jìn)展，Th遞減，Ts遞增，Th/Ts比值更低。早期胃癌NK活性正常，但隨著胃癌的進(jìn)展而下降。
6、腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)：①ras基因激活：早期胃癌陽(yáng)性率約為11.1%，而晚期可達(dá)48.8%，病發(fā)現(xiàn)RAS基因激活還與腫瘤侵犯的深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。②P53基因異常：可出現(xiàn)丟失、突變現(xiàn)象；野生型P53基因產(chǎn)物受到抑制或失活時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)和分化失控，可加速腫瘤進(jìn)展。③CA72-4基因表達(dá)：在胃癌的表達(dá)約為19%~49%，陽(yáng)性者有較強(qiáng)的侵襲能力，預(yù)后比陰性病例差。
㈢原發(fā)性肝癌
原發(fā)性肝癌（primary liver cancer）是指自肝細(xì)胞或肝內(nèi)膽管細(xì)胞發(fā)生的惡性腫瘤，為我國(guó)常見惡性腫瘤之一。根據(jù)病理組織學(xué)分型可分為肝細(xì)胞型、膽管細(xì)胞型和兩者同時(shí)出現(xiàn)的混合型。我國(guó)絕大多數(shù)為肝細(xì)胞癌（約90%）。原發(fā)性肝癌起病隱匿、早期缺乏典型癥狀，出現(xiàn)明顯的臨床癥狀的自行就診患者多已屬中晚期。
1、血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)：①AFP：現(xiàn)已廣泛用于高危人群（HBsAg陽(yáng)性的慢性活動(dòng)性肝炎、肝硬化）肝細(xì)胞癌的普查、診斷、判斷療效和預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)，普查中的陽(yáng)性發(fā)現(xiàn)可早于臨床癥狀出現(xiàn)8~11個(gè)月，若配合超聲檢查可提高篩查的陽(yáng)性率。AFP是肝細(xì)胞癌最有價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物，陽(yáng)性率為80%~90%，其濃度通常與肝癌大小呈正相關(guān)，與患者存活期呈負(fù)相關(guān)。在排除妊娠和生殖腺胚胎腫瘤的基礎(chǔ)上，血清AFP診斷肝細(xì)胞癌的標(biāo)準(zhǔn)為：血清AFP＞500μg/L持續(xù)4周；血清AFP由低濃度逐漸升高并維持在高水平（約68.5%的患者可＞1000μg/L，約39.3%的患者可＞10000μg/L）；血清AFP＞200μg/L持續(xù)8周。②CEA：常作為肝細(xì)胞癌的次選腫瘤標(biāo)志物，但靈敏度和特異性均較低。
2、血清酶檢測(cè)：①γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶同工酶II（γ-GT2）：原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性肝癌的γ- GT2的陽(yáng)性率可達(dá)90%，特異性達(dá)97.1%，在低濃度AFP肝癌中也有較高的陽(yáng)性率。②異常凝血酶原（abnormal prothrombin，AP）：肝癌細(xì)胞可合成和釋放γ谷氨酸羧化不全的異常凝血酶原，用放免法測(cè)定≥250μg/L為陽(yáng)性，約67%的肝細(xì)胞癌可呈陽(yáng)性。③α-L-巖藻糖苷酶：肝細(xì)胞癌的血清α-L-巖藻糖苷酶活性升高，超過(guò)110 nKat/L時(shí)常提示為肝細(xì)胞癌，診斷的靈敏度約為75%，特異性約為90%，對(duì)AFP不增高的肝細(xì)胞癌及小肝癌檢出的靈敏度可達(dá)70%以上。④堿性磷酸酶同工酶I（ALP-1）：幾乎僅見于肝細(xì)胞癌，特異性強(qiáng)，但靈敏度低，僅為24.8%左右。血清酶檢測(cè)對(duì)AFP不增高的原發(fā)性肝癌有輔助診斷意義，但仍不能取代AFP，一般只有在診斷困難的病例才需AFP結(jié)合幾種血清酶檢測(cè)，以提高診斷的靈敏度。
3、感染免疫學(xué)檢查：在乙型肝炎或丙型肝炎基礎(chǔ)上發(fā)展成肝癌的患者，血清HBsAg、抗HCV可陽(yáng)性。
4、腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)：肝癌有N-RAS癌基因的過(guò)量表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)N-RAS有轉(zhuǎn)化活性。目前發(fā)現(xiàn)肝癌至少有7種原癌基因、生長(zhǎng)因子和生長(zhǎng)因子受體基因的異常表達(dá)，包括N-RAS、E-MYE、CSF-IR、IGF-II等。約40%左右的肝細(xì)胞癌患者發(fā)生染色體丟失，包括抑癌基因P53的丟失。
㈣膽囊癌與膽管癌
膽囊癌（gallbladder carcinoma）是膽道系統(tǒng)中常見的惡性腫瘤，80%左右為腺癌，其次為未分化癌和鱗狀細(xì)胞癌，根據(jù)病變范圍可分I~V期。膽管癌（bile duct cancer）系指發(fā)生在左右肝管至膽總管下端的肝外膽管癌（肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌和壺腹部癌不包括在內(nèi)），組織學(xué)類型主要為腺癌。
1、血清腫瘤標(biāo)志物測(cè)定：膽囊癌和膽管癌的首選標(biāo)志物為CA19-9，雖然其血清濃度均可增高（通常＞120U/ml），但對(duì)早期診斷意義不大。膽囊癌和膽管癌的次選標(biāo)志物為CEA，約31%~80%的膽囊癌患者血清水平＞25μg/L，但特異性較低。CA19-9和CEA聯(lián)合檢測(cè)可提高膽囊癌和膽管癌診斷的靈敏度，但在早期篩查中仍不令人滿意，不過(guò)對(duì)手術(shù)后的療效觀察、復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)等仍具有重要意義。需注意的是膽汁淤積型膽管炎、膽石癥等引起的梗阻性黃疸，也有14%～33％患者的CA19-9升高。肝癌與膽管癌的鑒別，前者血清CA19-9＜200U/ml，后者CA19-9＞200U/ml。
2、生物化學(xué)改變：膽管癌典型病例表現(xiàn)為梗阻性黃疸，出現(xiàn)高膽紅素血癥，并以結(jié)合膽紅素增高為主，血清膽紅素水平越高者預(yù)后越差。尿液膽紅素強(qiáng)陽(yáng)性，尿膽原減少或消失。糞便顏色變淺或呈白陶土色。血清堿性磷酸酶顯著升高，可達(dá)參考范圍上限3倍以上。血清轉(zhuǎn)氨酶可升高，但一般＜300U/L。上述生物化學(xué)改變并非膽管癌所特異，可見于多種肝臟疾病，但對(duì)疾病篩查、觀察療效、判斷預(yù)后等仍有意義。
㈤胰腺癌
胰腺癌（pancreatic cancer）在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中發(fā)病率雖相對(duì)較低，但是惡性程度高、發(fā)展較快、預(yù)后極差。胰腺癌包括胰頭癌、胰體尾部癌和胰腺囊腺癌等，約90%的病例為胰腺導(dǎo)管細(xì)胞腺癌，胰頭癌最為常見。
1、血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)：①CA19-9：為胰腺癌的首選標(biāo)志物，具有較高的靈敏度和特異性，但對(duì)早期患者的靈敏度較低，僅為10%~30%，因此不適合作為無(wú)癥狀人群的篩查。血清CA19-9顯著升高的胰腺癌常提示有淋巴結(jié)累及或血行轉(zhuǎn)移。成功的胰腺癌術(shù)后，血清CA19-9濃度呈大幅度下降，若2~4周仍未降之參考范圍，提示有腫瘤組織殘留并可能在1個(gè)月左右復(fù)發(fā)；若術(shù)后降低一段時(shí)間后再度升高，提示腫瘤復(fù)發(fā)，而且這種變化可比影像診斷提前3~9個(gè)月。②CEA：對(duì)胰腺癌有一定診斷價(jià)值，臨床靈敏度約為50%左右，但非腫瘤病人，包括胰腺炎、肝硬化、膽道梗阻等患者CEA值也可升高；觀察CEA的動(dòng)態(tài)變化，對(duì)胰腺癌的預(yù)后估計(jì)有一定意義。
2、生物化學(xué)改變：黃疸是胰頭癌最主要的臨床表現(xiàn)，大部分患者出現(xiàn)黃疸時(shí)已屬中晚期，血清膽紅素升高，以結(jié)合膽紅素為主；重度黃疸者尿膽紅素陽(yáng)性，尿膽原陰性，糞便可呈灰白色，糞膽原含量減少或消失。此外，血清堿性磷酸酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、乳酸脫氫酶、5`-核苷酸酶、脂蛋白-X等均可升高。由于胰管梗阻或并發(fā)胰腺炎，早期患者可有血、尿淀粉酶升高，空腹血糖升高、糖耐量減低和尿糖陽(yáng)性等。
3、腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)：約70%胰腺癌有P53突變，約96%的胰腺癌有K-RAS突變。BCL-2蛋白表達(dá)與胰腺上皮癌變過(guò)程有關(guān)，P53蛋白表達(dá)可能與胰腺癌進(jìn)展有關(guān)。BCL-2和P53蛋白可作為反映胰腺癌生物學(xué)行為和預(yù)后的重要標(biāo)志物。
㈥結(jié)腸癌與直腸癌
結(jié)腸癌（colonic cancer）是常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，世界不同地區(qū)的發(fā)病率差別很大。病理組織學(xué)分型可將其分為腺癌、粘液癌和未分化癌，以腺癌占大多數(shù)。結(jié)腸癌早期的臨床癥狀不典型，易被忽視。因此，早期發(fā)現(xiàn)，早期診斷、早期治療是提高結(jié)腸癌治愈率的關(guān)鍵。國(guó)內(nèi)直腸癌（rectal cancer）的發(fā)病率占消化系統(tǒng)癌的第二位，病理組織學(xué)分類分為腺癌、粘液癌、未分化癌和少見類型（如鱗狀細(xì)胞癌、惡性黑色素瘤）。通過(guò)病史、體檢、影像學(xué)和內(nèi)鏡檢查，直腸癌比結(jié)腸癌的臨床診斷容易，其準(zhǔn)確率可達(dá)95%以上，但多數(shù)病例常有不同程度的延誤診斷。根據(jù)臨床病理Dukes分期，結(jié)腸癌和直腸癌可分為A、B、C、D四期，每一期還可再細(xì)分。
1、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)：①CEA：是一種較為廣譜的腫瘤標(biāo)志物，但由于臨床靈敏度和特異性的較低，不適合作為篩查結(jié)腸直腸癌（colorectal cancer）。血清CEA濃度增高與腫瘤的分期有關(guān)，其臨床靈敏度分別為Dukes A＜20%、Dukes B 40%~60%、Dukes C 60%~80%、Dukes D 80%~85%。CEA濃度監(jiān)測(cè)腫瘤的術(shù)后，如果手術(shù)前CEA增高，腫瘤切除手術(shù)后6~8周不能減低到穩(wěn)定的水平，甚至又再次上升，表明存在殘留腫瘤組織。若監(jiān)測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)，無(wú)論手術(shù)前CEA是否增高，在術(shù)后的的一個(gè)月內(nèi)需要連續(xù)測(cè)定3~4次，在以后的1~2年內(nèi)應(yīng)每2~3個(gè)月測(cè)定一次血清CEA濃度；如果增高，測(cè)定的時(shí)間間隔應(yīng)縮短；如果平均每月增加超過(guò)12.6%時(shí)，提示腫瘤復(fù)發(fā)，而且比臨床癥狀或影像學(xué)改變?cè)?~6個(gè)月；手術(shù)前CEA濃度增高越是顯著，腫瘤的復(fù)發(fā)率越高；如果CEA濃度用于判斷腫瘤的進(jìn)展?fàn)顩r，CEA增加的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為65%~84%，陰性預(yù)測(cè)值為85%~90%。②CA19-9：診斷結(jié)腸直腸癌的臨床靈敏度比CEA偏低，為18%~58%，并與腫瘤的分期密切相關(guān)，Dukes A 0~7%、Dukes B 17%、Dukes C 47%、Dukes D 75%。但CA19-9的臨床特異性高于CEA，當(dāng)臨界值＞40U/ml時(shí)，特異性為92%~99%。同時(shí)測(cè)定血清CEA和CA19-9，可將臨床靈敏度提高5%~20%。
2、細(xì)胞周期與DNA倍體分析：流式細(xì)胞分析結(jié)腸直腸癌手術(shù)切除的新鮮組織標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)36%~68%的直腸癌和44%~61%的結(jié)腸癌出現(xiàn)DNA非整倍體，有較高的增殖活性（S%+G2/M＞20%）病例的腫瘤有較強(qiáng)的浸潤(rùn)性，DNA倍體為二倍體的患者5年存活率高于有非整倍體的患者。
3、糞便隱血試驗(yàn)：對(duì)結(jié)腸直腸癌的診斷雖無(wú)特異性，但方法簡(jiǎn)便易行，可作為普查或一定年齡組高危人群結(jié)腸直腸癌的篩查或早期診斷的線索，陽(yáng)性者再做進(jìn)一步檢查。
4、腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)：P53基因突變可發(fā)生在良性腺瘤轉(zhuǎn)變?yōu)榘┑碾A段，檢測(cè)P53可了解腺瘤的癌變傾向，有助于早期發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌。nm23-H1等位基因缺失與結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系，結(jié)腸癌中存在nm23-H1基因突變。
5、肝腎功能檢查：血清堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶活性升高可能是結(jié)腸直腸癌肝轉(zhuǎn)移的第一指征。血清肌酐升高提示盆腔輸尿管阻塞。
㈦卵巢癌
卵巢惡性腫瘤是女性生殖器三大惡性腫瘤之一。卵巢雖小，但組織結(jié)構(gòu)復(fù)雜，常發(fā)生多種類型腫瘤。卵巢腫瘤組織學(xué)分類為卵巢上皮性腫瘤、卵巢生殖細(xì)胞腫瘤、卵巢性索間質(zhì)腫瘤、卵巢轉(zhuǎn)移性腫瘤。
1、血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)：①CA125：是卵巢癌（ovarian cancer）最重要的腫瘤標(biāo)志物，對(duì)卵巢癌診斷具有較高的特異性，并且與疾病的進(jìn)程、腫瘤的大小相關(guān)。CA125對(duì)漿液性囊腺癌臨床靈敏度高，可達(dá)92.3%。②CA72-4：診斷卵巢癌的臨床靈敏度與腫瘤的分期有關(guān)，I、II期腫瘤約為10%，III~IV期腫瘤約為56%。CA125與CA72-4聯(lián)合檢測(cè)可將診斷的臨床靈敏度從47%提高到58%。③CEA：對(duì)上皮性腫瘤較敏感，尤其是卵巢粘液性囊腺癌，其血清水平與卵巢腫瘤的分期、分級(jí)、類型及預(yù)后有關(guān)。④AFP：對(duì)內(nèi)胚竇瘤的診斷有一定特異性，且敏感度高，故AFP是卵巢內(nèi)胚竇瘤診斷和治療監(jiān)護(hù)及判斷復(fù)發(fā)的指標(biāo)。
2、細(xì)胞周期與DNA倍體分析：卵巢惡性腫瘤中約有2/3病例可出現(xiàn)非整倍體或多倍體，多倍體和非整倍體腫瘤的五年生存率明顯低于二倍體腫瘤。非整倍體常出現(xiàn)在處于進(jìn)展期的腫瘤。非整倍體卵巢癌的S期細(xì)胞比例明顯高于二倍體腫瘤，二倍體卵巢癌又明顯高于良性二倍體腫瘤，低S期細(xì)胞比例比高S期細(xì)胞比例卵巢癌預(yù)后好。
3、雌、孕激素受體分析：高分化卵巢癌的雌、孕激素受體含量均高于中、低分化癌，是細(xì)胞生理機(jī)能受損程度的一項(xiàng)重要指標(biāo)。
4、腫瘤基因分析：卵巢癌與P53基因突變和過(guò)度表達(dá)存在明顯的相關(guān)性。出現(xiàn)DNA非整倍體和染色體異常均與腫瘤抑制基因失活有關(guān)。
㈧子宮頸癌
宮頸癌（cervical cancer）是最常見的婦科惡性腫瘤?；颊吣挲g分布呈雙峰狀，35~39歲和60~64歲，平均年齡為52.2歲。宮頸癌的病理分型：宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變、宮頸浸潤(rùn)癌。宮頸癌的國(guó)際分期可分為五期，0期：原位癌；I期：癌限于宮頸；II期：癌灶超越宮頸，陰道浸潤(rùn)未達(dá)下1/3；III期：癌灶超越宮頸，陰道浸潤(rùn)已達(dá)下1/3；IV期：癌播散出真骨盆。
1、血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)：①宮頸鱗癌：鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原（SCC）和CEA分別可作為宮頸鱗癌的敏感標(biāo)志物，在一項(xiàng)有關(guān)研究中顯示各期腫瘤的SCC陽(yáng)性率分別為：0期0~25%；Ia期9%，Ib期27%~60%；II期44%~83%；III期55%~84%；IV期67%~100%，表明血清SCC增高有明顯的病期依賴性，對(duì)早期宮頸癌的篩查無(wú)意義，但對(duì)腫瘤的療效判斷、復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)有價(jià)值， SCC和CEA聯(lián)合檢測(cè)可以提高靈敏度。②宮頸腺癌：CA125比SCC和CEA更敏感，其臨床靈敏度為43%~57%。
2、細(xì)胞周期與DNA倍體分析：一些研究資料表明腫瘤的DNA倍體與患者生存時(shí)間相關(guān)，有非整倍體的宮頸鱗癌預(yù)后較差；約有31%的宮頸腺癌有DNA非整倍體，而且非整倍體與腫瘤的大小、分期、S期比例相關(guān)。DI＞1.5的腫瘤易出現(xiàn)治療失敗，DI＜1.5的生存期較長(zhǎng)。
3、腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)：宮頸癌癌基因的檢測(cè)對(duì)本病的早期診斷、治療和預(yù)后的判斷有一定的參考價(jià)值。檢測(cè)宮頸標(biāo)本的HER-2癌基因，發(fā)現(xiàn)其陽(yáng)性表達(dá)率隨病情發(fā)展、病理分級(jí)、臨床期別的增高而上升，正常宮頸均為陰性。HER-2陽(yáng)性者對(duì)放療敏感。對(duì)宮頸癌細(xì)胞內(nèi)P21蛋白和孕激素受體（PR）的檢測(cè)，顯示P21過(guò)度表達(dá)，而PR明顯降低。宮頸癌組織HPV16和18型檢出率明顯高于正常宮頸。子宮頸癌患者有H-RAS基因的點(diǎn)突變等。
㈨子宮內(nèi)膜癌
子宮內(nèi)膜癌（endometrial cancer）又稱子宮體癌，是指子宮內(nèi)膜發(fā)生的癌，絕大多數(shù)為腺癌，為女性生殖道常見三大惡性腫瘤之一，高發(fā)年齡為58~61歲。子宮內(nèi)膜癌組織學(xué)分型：內(nèi)膜樣腺癌、腺癌伴鱗狀上皮分化、透明細(xì)胞癌、漿液性腺癌。子宮內(nèi)膜癌臨床分為：0期、I期（Ia Ib）、II期、III期、IV期。
1、血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)：CA125對(duì)早期原發(fā)性子宮內(nèi)膜癌診斷的靈敏度為20%~33%，對(duì)復(fù)發(fā)癌為40%~90%；而且與腫瘤的分期相關(guān)，I、II期的靈敏度較低（20%~30%），III、IV期時(shí)的靈敏度較高，可達(dá)55%~90%。因此，CA125對(duì)子宮內(nèi)膜癌的早期診斷意義不大，但對(duì)腫瘤的進(jìn)展和復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)有重要意義。若在I、II期時(shí)CA125增高，常提示子宮內(nèi)膜癌浸潤(rùn)超越肌層。一些資料報(bào)道，約有1/3的子宮內(nèi)膜癌患者在復(fù)發(fā)前2個(gè)月血清CA125水平可升高；如腫瘤在盆腔內(nèi)復(fù)發(fā)，CA125增高不明顯；如復(fù)發(fā)腫瘤突破盆腔或廣泛轉(zhuǎn)移，CA125可顯著升高。此外，子宮內(nèi)膜癌患者的血清CEA亦可升高。
2、細(xì)胞周期與DNA倍體分析：流式細(xì)胞術(shù)分析腫瘤組織細(xì)胞DNA倍體對(duì)子宮內(nèi)膜癌的預(yù)后和復(fù)發(fā)判斷有重要意義。有研究表明：DNA二倍體比非整倍體腫瘤的分化和預(yù)后較好，四倍體腫瘤的DNA倍體和外科分期是影響腫瘤預(yù)后有意義的因素。有作者分析258例患者，其中78%為二倍體腫瘤，非整倍體和四倍體腫瘤占17%，5%為其他倍體腫瘤；治療后復(fù)發(fā)的患者，二倍體腫瘤占10%，非二倍體腫瘤占39%。
3、腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)：子宮內(nèi)膜早期癌變時(shí)可能查到K-RAS點(diǎn)突變；子宮內(nèi)膜癌HER-2/neu可出現(xiàn)高表達(dá)，抑癌基因P53可有雜合性丟失。C-FMS的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的臨床分期、組織學(xué)分級(jí)有密切關(guān)系。RAS基因表達(dá)產(chǎn)物P21與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生及細(xì)胞分化程度有關(guān)，顯示P21的表達(dá)與DNA倍體狀態(tài)和細(xì)胞增殖活性有關(guān)。
㈩前列腺癌
前列腺癌（prostate cancer）在歐美國(guó)家的發(fā)病率較高，尤其是高齡人群，以前在我國(guó)比較少見，但近年來(lái)有逐漸增加趨勢(shì)。98%的前列腺癌為腺癌，前列腺癌大多數(shù)為激素依賴型，其發(fā)生和發(fā)展與雄激素關(guān)系密切，非激素依賴型前列腺癌僅占少數(shù)。根據(jù)腫瘤組織增生及浸潤(rùn)狀況可分為I~IV期。
1、前列腺癌的篩查
篩查的目的主要是檢查出那些如果不治療就有可能引起并發(fā)癥和患者死亡的前列腺癌，但篩查出隱匿癌和非進(jìn)展性癌可能給患者帶來(lái)不必要的治療和由此引發(fā)的合并癥及經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，而且篩查能否降低死亡率目前還是一個(gè)有爭(zhēng)議的問(wèn)題。
目前使用的篩查方法包括血清PSA測(cè)定、直腸指檢和經(jīng)直腸超聲檢查。單獨(dú)用直腸指檢所查出的癌多為晚期；經(jīng)直腸超聲檢查的特異性較低，從而使活檢率增加。血清PSA檢查的靈敏度和特異性均高于直腸指檢，但兩者同時(shí)檢查可使靈敏度和特異性分別維持在84%和92%。雖然PSA并非前列腺癌的特異性檢查，在前列腺癌和前列腺增生之間有交叉，但PSA測(cè)定比直腸指檢更能查出局限于前列腺的癌。
血清PSA測(cè)定和直腸指檢篩查前列腺癌的有效性比較
篩查項(xiàng)目 敏感度（%） 特異性（%） 陽(yáng)性率（%）
PSA或直腸指檢陽(yáng)性 84 92 28
PSA陽(yáng)性（>4μg/L） 67 97 43
直腸指檢陽(yáng)性 50 94 24
PSA和直腸指檢陽(yáng)性 34 99.5 49
為了提高PSA在篩查中的使用價(jià)值，有研究表明監(jiān)測(cè)PSA增加的速率可以提高前列腺癌檢出的特異性，血清PSA每年增加＞0.75或0.8μg/L，前列腺癌的可能性增加。如果在篩查時(shí)患者的直腸指檢、經(jīng)直腸超聲檢查均正常，僅有PSA升高，可計(jì)算PSA密度（血清PSA/超聲測(cè)定的前列腺體積）來(lái)決定是否要做前列腺活檢，密度高者前列腺癌的可能性大。
2、前列腺癌的診斷
PSA的血清水平與良性和惡性前列腺組織增生的體積有關(guān)，可以協(xié)助前列腺癌的診斷、分期、判斷療效和監(jiān)測(cè)是否復(fù)發(fā)。血清PSA測(cè)定是臨床診斷前列腺癌的主要指標(biāo)之一，在PSA中度增高（4~10μg/L）的歐美人群中，約有20%~25%的人患前列腺癌，血清PSA＞10 μg/L則有2/3的人患前列腺癌。PSA中度增高常提示癌組織較局限，有可能治愈，但也有少數(shù)局限性前列腺癌患者血清PSA不增加。晚期的前列腺癌可侵犯精囊、淋巴結(jié)或有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，患者血清PSA通常可＞40μg/L。前列腺癌的游離PSA較低，測(cè)定游離PSA與總PSA比值對(duì)診斷有一定意義，比值＜0.1時(shí)惡性的可能性大；比值在0.1~0.2之間，結(jié)合臨床進(jìn)一步檢查；比值＞0.2時(shí)良性的可能性大。
3、前列腺癌的治療、復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)：前列腺癌時(shí)PSA明顯增高，術(shù)后可在3周降至參考范圍，若不減低或保持在較高水平，則可能為治療無(wú)效或腫瘤組織殘留。激素治療時(shí)PSA下降快者較下降緩慢者存活期要長(zhǎng)。若降低的PSA重新升高，提示腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。雖然血清前列腺酸性磷酸酶（PAP）診斷前列腺癌的靈敏度比PSA低，但PAP增高對(duì)預(yù)測(cè)前列腺癌轉(zhuǎn)移比PSA更準(zhǔn)確。對(duì)于術(shù)后監(jiān)測(cè)，第一年每3個(gè)月測(cè)定一次血清PSA，第二、第三年每4個(gè)月測(cè)定一次，以后每半年測(cè)定一次即可。局部或區(qū)域侵犯較為廣泛的前列腺癌引起尿潴留或輸尿管梗阻的患者，血清尿素和肌酐可增高；有骨轉(zhuǎn)移的患者血清堿性磷酸酶可增高，甚至可出現(xiàn)高鈣血癥；晚期患者還可并發(fā)彌散性血管內(nèi)凝血。
（十一）睪丸腫瘤
睪丸胚胎性癌在組織學(xué)上可分為兩種類型，精原細(xì)胞瘤（seminoma）約占40％，非精原細(xì)胞瘤(non-seminoma)約占60％。睪丸癌的標(biāo)志物主要是hCG和AFP。通常將hCG與AFP聯(lián)合用于睪丸癌的實(shí)驗(yàn)診斷。
僅約15％的精原細(xì)胞瘤患者血清hCG升高，精原細(xì)胞瘤無(wú)AFP分泌。40％~50％的非精原細(xì)胞瘤患者的血清hCG升高，50％~80％的非精原細(xì)胞瘤患者的血清AFP升高。hCG與ATP的增高幅度與睪丸癌的分期有關(guān)，I、II、III期的陽(yáng)性率分別為20％～40％，50％～70％和70％～90％。血清乳酸脫氫酶（LD）在兩種類型的腫瘤均可升高。
hCG和AFP聯(lián)合檢測(cè)在監(jiān)測(cè)術(shù)后放療化療效果時(shí)，既敏感又特異，但應(yīng)注意在治療后的短時(shí)間內(nèi)因腫瘤組織破壞釋放hCG，可引起血清hCG濃度暫時(shí)性升高，以后才逐漸下降。
（十二）乳腺癌
乳腺癌（breast cancer）是女性常見的惡性腫瘤，已成為婦女最主要的死亡原因之一。乳腺癌的病理分型：非浸潤(rùn)性癌、早期浸潤(rùn)性癌、浸潤(rùn)性特殊癌、浸潤(rùn)性非特殊癌、其它罕見癌。乳腺癌的分期：0期、I期、II期、III期、IV期。
1、血清腫瘤標(biāo)志物檢查
⑴CA15-3：是乳腺癌檢查的首選標(biāo)志物，乳腺癌時(shí)可見CA15-3升高，而且與腫瘤分期有關(guān)。由于早期陽(yáng)性率低，既不能用于早期診斷，也不能用于大范圍人群篩查。它常用于觀察乳腺癌治療后有無(wú)復(fù)發(fā)及監(jiān)測(cè)乳腺癌的轉(zhuǎn)移，約85%的骨轉(zhuǎn)移患者可出現(xiàn)持續(xù)升高。
⑵CEA：為非特異性腫瘤相關(guān)抗原，在許多腫瘤及非腫瘤疾病中都可升高，因此對(duì)乳腺癌的鑒別診斷意義不大。可行手術(shù)的乳腺癌，有8%~51%升高，有全身擴(kuò)散時(shí)，特別是肝、骨轉(zhuǎn)移時(shí)陽(yáng)性率可高達(dá)25%~93%，術(shù)后復(fù)發(fā)者有半數(shù)升高。
⑶其他標(biāo)志物：血清組織多肽抗原（tissue polypeptide antigen, TPA）、組織多肽特異性抗原（tissue polypeptide-specific antigen, TPS）、CA27-29、CA-549、乳腺癌粘蛋白（breast cancer mucin）、粘蛋白癌抗原（mucin cancer antigen, MCA）濃度在乳腺癌時(shí)均可升高，但其臨床靈敏度并未增加，對(duì)于腫瘤轉(zhuǎn)移的監(jiān)測(cè)有一定意義，多種標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)可提高靈敏度。有研究表明：約有15%的乳腺癌患者血清TPA增高比CA153和CEA更早。
2、細(xì)胞周期與DNA倍體分析：新切除的腫瘤組織、低溫冷凍的組織、石蠟包埋組織、針細(xì)活檢組織均可用于流式細(xì)胞分析。S期細(xì)胞的比例增高提示腫瘤復(fù)發(fā)的可能性較大，尤其是在第一次治療后的1~2年。近二倍體腫瘤比三倍體或四倍體腫瘤的預(yù)后更好。有證據(jù)表明超四倍體腫瘤（DI＞2.1）與腫瘤的浸潤(rùn)性相關(guān)，多倍體腫瘤的預(yù)后不良。
3、腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)：乳腺癌常有H-RAS、MYC、FOS、P53基因異常表達(dá)，部分病例表達(dá)HER2/neu基因，并與患者預(yù)后相關(guān)。表達(dá)P-糖蛋白的病例多有獲得性化療藥物耐藥。
（十三）肺癌
肺癌（lung cancer）大多數(shù)起源于支氣管粘膜上皮，故又稱支氣管肺癌（bronchogenic carcinoma），是全世界最常見的惡性腫瘤之一，死亡率占惡性腫瘤的第一位。肺癌有不同的組織學(xué)類型，根據(jù)WHO的分類標(biāo)準(zhǔn)主要分為鱗狀細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌、腺癌、大細(xì)胞癌和腺鱗癌、類癌、支氣管腺體癌等。
1、血清腫瘤標(biāo)志物測(cè)定
肺癌的主要標(biāo)志物為CYFRA21-1、NSE、CEA和SCC，由于肺癌類型的不同，各種標(biāo)志物的靈敏度有明顯差異，應(yīng)根據(jù)不同情況選擇。
⑴對(duì)于初次懷疑肺癌的患者，如果缺乏組織學(xué)分型資料，在保證特異性為95%的條件下，上述四項(xiàng)聯(lián)合檢查可提高臨床靈敏度。
⑵肺鱗狀細(xì)胞癌，診斷的臨床靈敏度由高到低的順序依次為CYFRA21-1（60%）、SCC（31%）、CEA（18%）和NSE（3%），一般只需選擇CYFRA21-1即可。
⑶肺腺癌或大細(xì)胞癌，可選擇CYFRA21-1和CEA，兩者同時(shí)測(cè)定的靈敏度可達(dá)50%以上。
⑷小細(xì)胞肺癌，一般可選擇NSE和CYFRA21-1。NSE具有較高的臨床靈敏度和特異性，可以在獲取組織學(xué)證據(jù)有困難的情況下協(xié)助確定小細(xì)胞肺癌的診斷。
2、細(xì)胞周期與DNA倍體分析：新切除的、低溫冷凍的、石蠟包埋的腫瘤組織均可用于流式細(xì)胞分析，與其他的內(nèi)臟惡性腫瘤相比，肺癌有較高的非整倍體發(fā)生率，約占70%左右，一般鱗狀細(xì)胞癌的非整倍體比例少于腺癌。和其他的實(shí)體腫瘤相比，在一個(gè)肺癌標(biāo)本中?？沙霈F(xiàn)多個(gè)非整倍體細(xì)胞群，并與形態(tài)學(xué)觀察中出現(xiàn)的高度異質(zhì)性相關(guān)。
3、腫瘤基因及其表達(dá)產(chǎn)物檢測(cè)：檢測(cè)癌基因和抑癌基因有助于肺癌的診斷，并可從基因水平來(lái)判斷癌的存在與否、預(yù)后和肺癌組織學(xué)類型等，也可利用癌基因和抑癌基因檢測(cè)肺癌高危人群。
肺癌有關(guān)癌基因和抑癌基因的異常
基因 突變類型 異常表達(dá)率
NSCLC（%） SCLC（%）
癌基因
KRAS 點(diǎn)突變（密碼子12） 30 －
MYC DNA擴(kuò)增過(guò)度表達(dá) 10 10~40
HER2/neu 表達(dá)增加 25 －
BCL2 蛋白表達(dá) 25 －
抑癌基因
3p 缺失 50 90
RB 缺失、改變蛋白表達(dá)和磷酸化 15 ＞90
P53 缺失、點(diǎn)突變、過(guò)度表達(dá) 50 80
CDKN2 蛋白表達(dá) 60 －
注：NSCLC：非小細(xì)胞肺癌，SCLC：小細(xì)胞肺癌，－：未報(bào)道
此表源自Philip Rubin主編的Clinical Oncology，2001
4、細(xì)胞學(xué)檢查：痰涂片細(xì)胞學(xué)檢查能使80%的中央型肺癌（多為鱗癌）獲得確診，而周圍結(jié)節(jié)型不到20%。肺癌出現(xiàn)的惡性胸腔積液細(xì)胞學(xué)檢查，可以發(fā)現(xiàn)40%~50%的陽(yáng)性病例。
5、副癌綜合征：15%~20%的肺癌患者可發(fā)生因原發(fā)癌而產(chǎn)生肺外組織器官的功能異?；虿∽?，稱為副癌綜合征，例如可導(dǎo)致庫(kù)欣綜合征、抗利尿激素不適當(dāng)分泌、5-羥色胺分泌過(guò)多、高鈣血癥、血栓性靜脈炎、彌散性血管內(nèi)凝血、貧血、嗜酸性粒細(xì)胞增多、血小板增多癥等，通過(guò)有關(guān)生化和血液學(xué)檢查可以發(fā)現(xiàn)，并可能為原發(fā)癌診斷提供線索。
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