臨床免疫學檢驗（一）
1. 免疫防御（對外）免疫自穩(wěn)（防自身免疫?。┟庖弑O(jiān)視（防腫瘤）。
2. 標記免疫技術(shù)應用最多，自動化是免疫學檢驗發(fā)展趨勢。
3. 抗原的表位至少有二種方式：順序或線性表位，三維結(jié)構(gòu)的構(gòu)象表位。
4. 天然抗原絕大多數(shù)是胸腺依賴性抗原（TD-Ag）。超抗原被T細胞識別時雖然要與MHCⅡ類分子結(jié)合，但不受Ⅱ類分子的限制，可以直接活化T細胞而且效率高?？贵w由漿細胞產(chǎn)生?？贵w分子上VH和VL是抗原結(jié)合部位，CL，CH1是遺傳標記所在，CH2有補體結(jié)合點，CH5能固定組織細胞，CH3和CH4還參加Ⅰ型變態(tài)反應。免疫學中常用木瓜酶和胃蛋白酶。
5. 免疫球蛋白的血清型有：同種型（正常個體都有）同種異型（只存在同種的某些個體中）獨特型（某一個體獨有的。獨特性網(wǎng)絡在免疫應答的調(diào)控中起重要作用）。
6. 天然IgG分子無活性。IgM（五聚體，天然凝集素和冷凝集素，是B細胞膜上主要表面膜Ig）激活補體能力最強，IgG（單體，電泳最慢，再次免疫應答的主要抗體）至少要兩分子。0.1mol/L 2巰基乙醇能破壞IgM但不破壞IgG，可以區(qū)分它們。
7. 母乳中的分泌型IgA提高了嬰兒出生后4～6個月內(nèi)的局部免疫屏障，常稱為局部抗體。
8. 人類重鏈基因位于14號染色體上，K基因位于第二號染色體上。
9. 參與補體激活經(jīng)典途徑的固有成份按先后為C1，C2……C9，C1由C1q，C1r，C1s，三種組成。滅活的補體在片在符號前加i，有酶活性的上加一橫。
10. 補體大多是糖蛋白多屬β球蛋白，C1q，C8是γ蛋白。C1s，C9是α球蛋白。C3含量最多，C2含量最少。替代途經(jīng)的激活物主要是細胞壁成分。
11. 補體清除免疫復合物的方式：吞噬調(diào)理，免疫粘附，免疫復合物抑制。
12. 編碼人C4，C2，B因子的基因在第六染色體短臂上與MHC的基因相鄰，命名為Ⅲ類組織相容性基因。產(chǎn)生補體主要是肝臟主要是巨噬細胞。
13. 已發(fā)現(xiàn)的歸巢受體有：CD44，LFA-1，VLA-4，MEL-14/LAM-1等。CD2表達于全部T細胞和NK細胞。CD3表達在全部T細胞，CD4（輔助性T細胞）/CD8（細胞毒性T細胞）相互關(guān)聯(lián)但意義不同是T細胞亞群的表面標志。
14. SIg的功能是作為B細胞表面的抗原受體可與相應抗原特異性結(jié)合并將抗原內(nèi)攝處理。MHCⅡ是輔佐細胞（AC）遞呈抗原的必須物質(zhì)是輔佐細胞（有單核吞噬，樹突狀，B細胞）的標志。明確的白介素有15個，IL-2主要由T細胞（CD4+）受抗原或絲裂原刺激后產(chǎn)生，15KD，113糖蛋白。
15. Ⅱ型干擾素又稱免疫干擾素或IFNγ，主要由T細胞產(chǎn)生。腫瘤壞死因子：TNFα：由細菌脂多糖活化的單核細胞產(chǎn)生引起出血壞死也稱惡病質(zhì)素，TNFβ：由抗原或絲裂原刺激的淋巴細胞產(chǎn)生有腫瘤殺傷和免疫調(diào)節(jié)功能又稱淋巴毒素。
16. 紅細胞生成素（EPO）是糖蛋白，30～39KD，主要由腎小管內(nèi)皮細胞合成也可由肝和巨噬細胞產(chǎn)生。
17. 人類MHC稱為HLA復合體，位于第六對染色體的短臂上。其多態(tài)性為復等位基因所致，當群體中位于同一位點的等位基因多于兩種時為復等位基因，HLA的遺傳特點：單倍型，共顯性，連鎖不平衡。Ⅰ和Ⅱ類MHC分子是引起同種異體移植排斥反應的主要抗原。
18. 當抗原遞呈細胞向免疫活性細胞遞呈抗原時，免疫活性細胞在識別特異性抗原時，必須識別遞呈細胞的MHC抗原稱為MHC限定性。
19. HLA是體內(nèi)最復雜的多態(tài)性基因系統(tǒng)。抗原-MHCⅡ類分子復合物與T細胞受體的結(jié)合是使Th細胞活化的首要信號。
20. 細胞免疫的效應方式有：細胞毒，遲發(fā)超敏。
21. 體液免疫以血清中有循環(huán)抗體為特征。
22. 炎癥細胞有：中性，肥大，嗜酸，嗜堿，血小板，內(nèi)皮。炎癥介質(zhì)：血管和平滑肌收縮介質(zhì)，趨化因子，酶類，蛋白多糖。免疫炎癥類型：IgE介導，免疫復合物，細胞，皮膚嗜堿細胞型。
23. 抗原抗體結(jié)合基于結(jié)構(gòu)互補與親和性。由一級結(jié)構(gòu)決定。結(jié)合力有：電荷吸引，范德華力，氫鍵，疏水性作用力。
24. 常用佐劑有：氫氧化鋁，明礬（弗氏）是目前動物免疫中最常用的。
25. 抗血清保存：4℃，低溫，冰凍干燥。
26. 抗體特異性純化有：親和層析，吸附法。
27. 特異性鑒定有：效價，特異性，純度，親和力。
28. 脾淋巴細胞特征是抗體分泌功能和能在選擇培養(yǎng)基中生長，骨髓瘤細胞則可無限分裂既永生性。細胞融合的選擇培養(yǎng)基有三成份：次黃嘌呤（H）氨甲蝶呤（A）胸腺嘧啶核苷（T）稱為HAT培養(yǎng)基。
29. 液體沉淀試驗有：抗原稀釋法和抗體稀釋法及方陣滴定法。
30. 免疫固定電流常用于M蛋白的鑒定。
31. 補體結(jié)合試驗中5種成份分三個系統(tǒng)（反應，補體，指示）不溶血為陽性。
32. 常用的標記酶有辣根過氧化物酶（底物為鄰苯二胺，四甲基聯(lián)苯胺）堿性磷酸酶（底物為磷酸酯）。
33. 抗體制備常用二醛法及過碘酸鹽法。
34. RIA（放免）核素標記抗原，競爭抑制，2～3個數(shù)量級，標記物限量。
35. IRMA（免疫放射）核素標記抗體，非競爭結(jié)合，3個數(shù)量級以上，標記物過量。
36. 常用的熒光素有：異硫氰酸（FITC）四乙基羅丹明（RB200）四甲基異硫氰酸羅丹明（TRITC）。
37. 常用標記蛋白的方法有：攪拌法和透析法。熒光抗體鑒定包括效價及熒光素與蛋白的結(jié)合率，大于1:16為理想，一般固定標本的熒光抗體以F/P=1.5為宜用于活細胞染色的以2.4為宜。
38. 時間分辨熒光免疫測定以鑭系元素銪合物為熒光標記物，偏振免疫測定的偏振波長是485（藍光）。
39. 發(fā)光免疫技術(shù)：生物發(fā)光有熒火蟲熒光素，化學發(fā)光底物有：氨基苯二酰肼類主要為魯米諾及異魯米諾衍生物，啞啶酯類，電化學發(fā)光底物為三聯(lián)吡釕另一類為三丙胺。
40. 膠體金顆粒由一個基礎(chǔ)金核及包圍在外的雙離子層構(gòu)成，其性質(zhì)有對電解質(zhì)敏感性，呈色性，光吸收性（510～550nm）。
41. 雙抗體夾心法的質(zhì)控點最好是相應抗原。
42. 外周單個核細胞的分離的分層液常用：Ficoll（由上到下為：血漿，單個核細胞，粒，紅）和Percoll（由上至下：死細胞，單個核細胞，淋，紅，粒）。
43. 純淋巴細胞群的采集有：黏附貼壁法，吸附柱過濾法，磁鐵吸引法。
44. 亞型的分離法有：E花環(huán)沉降法，尼龍分離法，親和板結(jié)合法，熒光激活細胞分離儀法。
45. 淋巴細胞活力測定常用臺盼藍染色法，死為藍色。保存時二甲亞砜為保護劑。
46. 植物血凝素（PHA）刀豆素（ConA）刺激T細胞增殖。
47. 增殖試驗有：形態(tài)法（分別計數(shù)淋母，過渡型淋母，核有絲分裂相及成熟小淋，前三者為轉(zhuǎn)化細胞，計200個，算轉(zhuǎn)化率）核素法。
48. SmIg是鑒定B細胞可靠的指標。
49. B細胞功能檢測方法：溶血空斑形成試驗（直接法只能檢測IgM生成細胞，其它用間接法，即在脾細胞和SRBC混合時加入抗Ig抗體。B細胞增殖能力試驗。測定人NK細胞活性多用以K562細胞株為靶細胞，測鼠NK細胞活性則用YAG細胞株。
50. 嗜酸粒細胞活化產(chǎn)物的測定：產(chǎn)物有：陽離子蛋白（ECP），主要堿基蛋白（MBP），X，EPD，EDN等，其中ECP毒性最強因而認為是嗜酸的特異性標志。
51. 特異性鼻粘膜激發(fā)試驗用變應原，非特異性采用乙酰甲基膽堿或組胺。
52. 新月體性腎小球腎炎的免疫病理類型有：免疫復合物，抗腎小球基底膜（GBM）抗體，抗中性白細胞質(zhì)抗體。含有新月體的腎小球數(shù)目和比例是該病的關(guān)鍵。
53. 膜性增生性腎小球腎炎（MPGN）是原發(fā)性腎小球病中唯一具有獨特的血清補體異常的疾病，測C3腎炎因子（C3NeF）。
54. 自身免疫?。ˋID）的特征：高滴度自身抗體，病理特點為免疫炎癥損傷與抗原分布一致，能建動物模型。
55. 不溶性DNP（抗核蛋白抗體）通常完全被DNA和組蛋白吸收，是形成狼瘡細胞的因子。
56. 抗dsDNA抗體對SLE有較高的特異性。抗Sm抗體是SLE的特異性標志之一。
57. ANA陽性的熒光現(xiàn)象分：周邊型表示抗DNA抗體存在（SLE），均質(zhì)型表示有抗核蛋白抗原（DNP）抗體，斑點型多為抗ENA抗體（結(jié)締組織?。巳市投酁榭购诵◇w抗體（硬皮?。?/p>
58. 抗乙酰膽堿受體抗體的檢測對重癥肌無力（MG）具有診斷意義。
59. Hep-2細胞（人喉癌上皮細胞株），Hela細胞（宮頸癌細胞株），F(xiàn)arr法測定dsDNA抗體的特異性高為公認標準法，當抗dsDNA抗體結(jié)合率大于20%時對SLE有意義。
60. 口干癥和干燥性角膜炎是干燥綜合癥（SS）的主要臨床表現(xiàn)。
61. 多發(fā)性骨髓瘤（最常見免疫增殖病）以IgG居多，重鏈病類別常見γ，α，μ三型。
62. 原發(fā)性B細胞缺陷?。喝獻g缺失（Broton病，女帶，男患病，最先考慮測Ig濃度，CD分子，SmIg）；部分缺失；Ig正常但無抗原反應。
63. 原發(fā)性T細胞缺陷病：易發(fā)生GVHR。
64. 原發(fā)性聯(lián)合免疫缺陷病，以重癥聯(lián)合免疫缺陷（SCID）的預后最差，屬性聯(lián)或常染色體隱性遺傳，T細胞表面存在特異性CD抗原，通過特異性單克隆抗體檢測是診斷細胞免疫最有價值的試驗。
65. 補體缺陷發(fā)病率最低。
66. 性聯(lián)慢性肉芽腫（CGD）是性聯(lián)遺傳，女帶男患病，特點是吞噬細胞不能產(chǎn)生超氧化物酶殺菌，白細胞低于1500時應考慮，可作四唑氮藍（NTB）還原試驗，REBUCK皮膚窗檢測。
67. 只有感染了乙肝才肢感染丁肝。
68. 艾滋病T淋巴細胞亞群檢查可發(fā)現(xiàn)T細胞絕對數(shù)下降，CD4＋淋巴細胞也下降，CD4/CD8小于1?？贵w主要是p24，gp120。
69. CEA大于60μg/L時可見于結(jié)腸，胃，肺癌。
70. 手術(shù)6周后CEA水平正常。血清CEA結(jié)合甲狀腺降鈣素測定有助于甲狀腺髓樣癌的診斷和估計。
71. AFP是原發(fā)性肝癌的最靈敏最特異的標志。
72. 胰胚胎抗原（POA），糖類抗原有：CA125（上皮性卵巢癌（基因有K-RAS）和子宮內(nèi)膜癌）CA15-3（乳腺癌，基因有P53，C-ERB-2）CA19-9（胰腺，結(jié)直腸癌）CA50（胰腺結(jié)直腸癌）AFU（A-L巖藻糖苷酶）是原發(fā)性肝癌的新指標。神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）是神經(jīng)母細胞瘤和小細胞肺癌（基因有P53，RB）的標志物。
73. HLA-A，B，C，DR，DQ位點的抗原可用血清學方法進行檢測，所以稱為SD抗原，采用補體依賴的細胞毒（CDC）試驗，HLA－D，DP位點的抗原須用細胞分型進行鑒定，稱為LD抗原，采用混合淋巴細胞培養(yǎng)（MLC）。
74. 排斥反應有：宿主抗移植反應（HVGR）和移植物抗宿主反應（GVHR）。
來源：檢驗視界網(wǎng)
